罗伯逊平衡易位携带者妊娠结局分析

罗伯逊易位又称着丝粒融合，是人类常见的染色体结构异常，其携带者不仅流产、不育发生率高，也容易生育唐氏综合征及染色体不平衡易位的患儿，他们常求助于遗传咨询、产前诊断及辅助生殖技术。理论上非同源罗伯逊易位携带者只有1／3的可能产生染色体正常（或）平衡易位的后代，实际上生育正常或平衡易位儿几率高很多。为此，笔者跟踪随访较大样本罗伯逊平衡易位携带者的妊娠结局，并对其进行产前细胞遗传学检测，旨在探讨罗伯逊平衡易位携带者的妊娠风险，为遗传咨询和生育指导提供信息。

母血中胎儿游离核酸检测在诊断胎儿非整倍体中的应用

胎儿染色体非整倍体是常见且严重的染色体异常类出生缺陷。目前常用的侵入性检查方式因存在诸多弊端而被部分孕妇拒绝。在过去的15年中,母体血浆中胎儿游离核酸的研究进展使得无创性产前诊断胎儿非整倍体成为可能。而最近胎儿与母体表观遗传学差异及胎儿特异性RNA的发现使得这项技术摆脱了胎儿性别的限制。随着数字PCR及大规模平行测序等新技术的运用,胎儿非整倍体检测的敏感性和特异性得到了提高。本文综述了无创性产前诊断胎儿非整倍体的研究进展,并讨论了其临床应用的可行性。

中孕期超声软指标与染色体异常相关分析

目的探讨单核苷酸多态性芯片(SNP-array)检测各类中孕期超声软指标胎儿染色体异常的临床应用价值。方法回顾分析2016年11月至2020年12月于湖北省妇幼保健院就诊、超声检查提示中孕期超声软指标且接受SNP-array产前诊断的胎儿542例,其中400(73.8%)例同时行染色体核型分析。542例胎儿根据超声软指标数目分成两组单超声软指标组437例(80.63%)和多超声软指标组105例(19.37%)。单超声软指标组又根据超声软指标类型分为8亚组,比较各组及亚组的染色体异常率、致病性拷贝数变异(CNVs)发生率。结果542例胎儿中,SNP-array检出染色体异常28例(5.17%),其中非整倍体12例,致病性CNVs16例。多超声软指标组的染色体异常率明显高于单超声软指标组(9.52%vs 4.12%,P<0.05);多超声软指标中包含鼻骨缺失或短小时染色体异常率远高于不包含时(27.59%vs 2.63%,P<0.01)。在单超声软指标组中,颈项皮肤皱褶增厚亚组非整倍体异常率显著增高(7.41%,P<0.05);侧脑室轻度增宽亚组致病性CNVs检出率显著增高(6.45%,P<0.05);单脐动脉亚组、四肢长骨偏短亚组、心室强回声亚组、脉络丛囊肿亚组均未检出致病性CNVs。结论胎儿染色体异常在不同数目、不同类型的中孕期超声软指标中差异很大。致病性CNVs在侧脑室轻度增宽的胎儿中更易被检出。当超声检出中孕期软指标时,临床医生应对孕妇进行遗传咨询,针对不同的超声软指标提供个性化的产前诊断或产前筛查。

3例16p11.2微缺失综合征胎儿的产前诊断及其产前超声分析

目的分析3例16p11.2微缺失综合征胎儿的临床资料,探讨其产前诊断方法及宫内表型。方法回顾3例产前诊断为16p11.2微缺失(593 kb)胎儿的染色体核型分析、单核苷酸多态性微阵列(SNP微阵列)检测结果,分析这3例胎儿的产前超声特点。结果病例1和病例2胎儿羊水染色体核型为46,XX,病例3胎儿羊水染色体核型为46,XY。病例1的SNP微阵列结果为arr[hg19]16p11.2(29,428,531~30,350,748)X1,即16p11.2存在922 kb的缺失。病例2的SNP微阵列结果为arr[hg19]16p11.2(29,591,326~30,176,508)X1,即16p11.2存在585 kb的缺失。病例3的SNP微阵列结果为arr[hg19]16p11.2(29,428,531~30,176,508)X1,即16p11.2存在748 kb的缺失。3例均有关键区域缺失,包含PRRT2、KCTD13、TBX6、HIRIP3、SEZ6L2等候选致病基因。病例1、2产前超声均提示胎儿半椎体畸形、脊柱侧弯,病例3产前超声提示胎儿颈部半透明膜增厚。结论 16p11.2微缺失综合征在产前可出现各个系统超声异常,但椎体畸形最为常见。中国汉族人群产前超声中如果出现胎儿半椎体畸形、脊柱侧弯,应考虑16p11.2微缺失综合征的可能。SNP微阵列分析可以有效地诊断16p11.2微缺失综合征,明确其断裂点以及所涉及的基因,有助于分析其基因型与表型的对应关系。

产前诊断嵌合父源性全基因组单亲二倍体胎儿1例

1病例简介孕妇,25岁,G 3P 1,因“停经22+周,超声及核磁共振检测提示胎儿双侧肾上腺混合性包块,胎盘水泡样改变”于2020年1月16日于湖北省妇幼保健院优生遗传中心就诊。孕妇停经33天检测HCG为2644mIU/ml(参考值217~7138mIU/ml),孕酮15.63ng/ml,停经45天复查HCG为41609mIU/ml(参考值3697~163563mIU/ml),孕酮21.25ng/ml,超声检查提示宫内妊娠(胚胎存活)。

染色体多态性与复发性流产的关系研究

目的:研究染色体多态性与复发性流产的关系。方法:对2011年1月至2013年6月在湖北省妇幼保健院就诊的681对(1362例)复发性流产的患者夫妇(复发性流产组),进行外周血淋巴细胞培养和染色体核型分析,同时选取373对(746例)无流产史,至少一胎足月分娩后的正常生育夫妇为对照组。结果:复发性流产组的夫妇中,染色体多态性检出率(9.03%,123/1362)高于对照组(2.41%,18/746),差异有统计学意义(P<0.05)。复发性流产组中inv(9)、Yqh-、1qh+、D/G组、Yqh+、16qh+、9qh+的染色体多态性的检出率均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),且复发性流产组中男性染色体多态性的检出率(11.31%,77/681)高于女性(6.75%,46/681),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:染色体多态性与复发性流产有一定关系,在复发性流产患者的病因分析中不应忽视染色体多态性的作用,男性染色体的多态性也是因素之一。

孕中期唐氏综合征的产前筛查

目的:探讨孕中期母血清生化指标筛查胎儿唐氏综合征的方法在中国人群中的运用,确定本地区孕妇各孕周筛查生化指标的中位数。方法:采用时间分辨荧光免疫技术,对2002年7月至2006年11月在本院产前检查的19549例孕14～20周的妇女进行血清标志物甲胎蛋白、游离β-人绒毛促性腺激素检测,并对筛查出的高危孕妇进行羊水或脐血染色体检查以确诊。结果:筛查出17例染色体异常胎儿,其中10例唐氏综合征、3例18三体综合征。筛查阴性孕妇中检出4例唐氏综合征患儿,唐氏综合征的检出率为71.4%。建立了本地区孕中期各孕周筛查指标的中位数值。结论:孕中期血清学筛查唐氏综合征的方法可提高胎儿染色体病的检出率。不同种族血清标志物的中位值有所不同,各实验室应建立自己的中位数,以提高筛查效率,降低假阳性率。

载脂蛋白E3及其突变体apoE2、apoE4的克隆与表达

目的 克隆人 3种类型载脂蛋白E (apolipoproteinE ,apoE)cDNA ,表达并纯化 3种apoE融合蛋白。 方法 采用RT PCR方法从肝组织中克隆得到apoE3cDNA ,以此为基础通过定点突变得到apoE2和apoE4的cDNA。将上述 3种cDNA亚克隆到含有His标签的融合表达载体pT7 PL中 ,表达的蛋白经镍离子柱亲和层析纯化。结果 序列分析表明 ,获得的apoE2、apoE3、apoE4与GenBank中的一致。表达并纯化了N端带有 6个组氨酸的apoE2、apoE3、apoE4融合蛋白。结论 成功地获得了人 3种类型apoEcDNA和 3种apoE融合蛋白。

全血标本离心前不同保存温度与时间对巨细胞病毒核酸检测结果的影响

目的探讨全血标本离心前不同温度与时间对人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)核酸检测(nucleic acid amplification test,NAT)结果的影响,以确定离心前放置的安全时限。方法采集含高、中、低DNA载量的全血。采血后按保存温度分为4℃、25℃、37℃组,各组放置0、1、6、12、24、48、72 h后进行离心,行实时荧光定量PCR。结果高浓度4℃组离心前放置72 h,25℃与37℃组离心前放置24 h,无明显变化;中浓度4℃组离心前放置24 h,25℃组、37℃组离心前放置12 h,无明显变化;低浓度4℃组、25℃组离心前放置12 h,37℃组离心前放置6 h,无明显变化。结论为保证HCMV NAT结果的准确性,全血标本最好在离心前4℃保存,并在采血后6 h内及时离心送检,高温条件下更应注意。

人巨细胞病毒抗体筛查预防输血性人巨细胞病毒感染的Meta分析

目的明确输注人巨细胞病毒(CMV)血液抗体筛查阴性血在减少免疫低下人群输血性CMV感染的作用,为CMV抗体血液筛查的实施提供依据。方法计算机检索PubMed、MEDLINE、Ovid、ProQuest、EBSCO、Cochrane Library、EMbase、CNKI、VIP、CBM和WanFang数据库,检索比较输入CMV血液抗体筛查阴性血与输入未经筛查且为非去白细胞处理血对输血性CMV感染率差异的文献,同时辅以手检纳入文献的参考文献。按照纳入排除标准进行筛选、资料提取和质量评价后,使用Rev Man5.1软件进行Meta分析。结果共纳入7项研究,430例患者。Meta分析结果显示输入经CMV血液抗体筛查阴性血与输入未经筛查且为非去白细胞处理血后,受血者的输血性CMV感染率差异具有统计学意义(OR=0.07,95%CI:0.03~0.18,P<0.01)。结论进行CMV抗体血液筛查能有效减少免疫低下受血者输血性CMV感染率,特别对器官移植和新生儿输血患者作用明显。

平衡易位携带者孕中期产前诊断结果分析

目的:探讨平衡易位携带者孕中期胎儿产前诊断结果及妊娠结局,为平衡易位携带者遗传咨询及生育指导提供科学依据。方法:选择2015年1月至2016年12月夫妻之一为平衡易位携带者65例,于妊娠18~24周在我院行羊水染色体核型检查,并针对检测结果进行分析。结果:65例平衡易位携带者,28例(43.1%)胎儿染色体核型正常,25例(38.5%)胎儿为平衡易位携带者,12例(18.4%)胎儿为不平衡易位患者。其中总妊娠次数为187次,早期流产总次数为122次(65.2%);妊娠活产53次(28.3%),此次妊娠活产率81.5%(53/65);引产12次(6.4%)。13号与14号染色体发生相互易位的几率最高(16.2%,19.2%),其生育不平衡胎儿的几率分别为4.8%和12.0%。结论:平衡易位携带者夫妇其早期流产发生率较高,妊娠到孕中期后获得染色体正常后代和平衡易位携带者后代的几率较高,选择自然妊娠并进行产前诊断来获取健康后代是完全可行的。不同染色体发生易位其生育不平衡后代几率不同。

武汉地区育龄期汉族女性叶酸代谢相关酶基因多态性研究

目的分析武汉地区育龄期汉族女性叶酸代谢关键酶5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)和甲硫氨酸合成酶还原酶(MTRR)基因多态性分布,为出生缺陷的个体化防控、孕期叶酸增补提供依据。方法选取2016年5月至2020年1月于该院进行孕前与孕期检查的4216例育龄期汉族女性为研究对象,对其叶酸利用能力基因进行分型,分析该地区MTHFR和MTRR基因多态性的分布特征并与我国不同地区的汉族女性进行比较。结果该地区育龄期汉族女性MTHFR基因C677T和A1298C基因与等位基因频率与北方地区尚志、太原、烟台、郑州,南方地区湘潭、柳州、阳江、琼海的结果比较,差异均有统计学意义(P<0.05);MTRR基因A66G基因与等位基因频率与太原、烟台、柳州、阳江、琼海地区的结果比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论武汉地区育龄期汉族女性MTHFR和MTRR基因多态性分布具有明显的地域特异性,实施叶酸增补时应考虑叶酸代谢能力相关基因多态性的影响,从而制订个性化的增补方案。

神经发育障碍儿童的全外显子组测序分析与产前诊断

探讨全外显子组测序(WES)在产前和产后神经发育障碍(NDDs)诊断中的应用价值。本研究回顾性分析2020年6月至2022年3月在湖北省妇幼保健院优生遗传门诊就诊的70例NDDs儿童的临床资料,另有28例为NDDs相关的产前诊断病例,利用WES以明确遗传病因。将基于WES的拷贝数变异(CNV)分析纳入常规WES数据分析。结果显示,70例神经发育障碍儿童的WES检出率为30%(21/70)。在21例阳性病例中,14例检出单核苷酸变异/小插入缺失(SNV/Indel,其中有12个变异是未见文献报道的新变异),6例检出CNV,1例检出SNV和CNV的复合杂合变异。综合CNV分析的WES检出率高于单独的SNV/Indel分析(30%,21/70 vs.20%,14/70)。28例产前诊断病例中,6例检出遗传自NDDs父母的变异,10例未检出与先证者相同的致病变异,其余12例未检出可以解释NDDs表型的明确致病或疑似变异。随访显示5个家庭选择终止妊娠,其他目前暂无异常。综上,WES可能是明确NDDs患儿遗传病因和产前诊断的有效手段,有利于评估预后以辅助临床治疗和再生育指导。

妊娠早期胎儿颈项透明层增厚的妊娠风险与遗传咨询

目的探讨孕龄为11～13+6孕周经腹超声检查提示胎儿颈项透明层(NT)增厚的妊娠风险,为遗传咨询积累有价值的临床资料。方法选择2008年3月至2011年6月于本院接受产前检查的孕龄为11～13+6孕周者,经腹彩色多普勒超声检查提示胎儿NT增厚的孕妇47例为研究对象,对其进行羊水穿刺术以了解胎儿染色体核型。对胎儿染色体核型正常者进一步行胎儿系统彩色多普勒超声及超声心动图检测(本研究遵循的程序符合本院人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员会批准,并于受试对象签署临床研究知情同意书)。结果本组47例NT增厚孕妇中,染色体异常发生率为14.89%(7/47)。其余40例为胎儿染色体核型正常的NT增厚孕妇,其胎儿的彩色多普勒超声检查结果的异常率为15.00%(6/40)。其中,33.33%(2/6)为心脏结构异常。NT增厚且胎儿染色体正常的胎儿超声异常率(15.00%,6/40)与同期在本院产前检查NT正常的胎儿彩色多普勒超声检查结果的异常率(2.13%,40/1875)比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 NT增厚与胎儿染色体非整倍体和先天性心脏病等不良妊娠结局密切相关。

67例原发性及继发性闭经患者的细胞遗传学分析

目的:探讨原发性及继发性闭经患者外周血细胞染色体异常及其临床意义。方法:对67例原发性及继发性闭经患者进行外周血淋巴细胞染色体培养,G显带,显微镜下核型分析。结果:在67例原发性及继发性闭经患者中共检出染色体异常20例,总异常率为29.85%。其中,38例原发性闭经患者中染色体异常17例,异常率44.74%;29例继发性闭经患者中染色体异常3例,异常率10.34%。包括染色体数目异常、嵌合、重复、缺失、异位及倒位。结论:染色体异常是导致原发性或继发性闭经的主要原因,对闭经患者外周血细胞进行染色体核型分析,对研究闭经的病因、估计患者预后和及时治疗具有十分重要的意义。

74例胎儿生长受限脐血染色体核型分析

目的：探讨脐血染色体异常与两种类型的胎儿生长受限之间的关系。方法：将2007年5月－2009年12月在湖北省妇幼保健院74例胎儿生长受限的病例分为两组：均称型FGR组和不均称型FGR组,对其进行脐血染色体核型分析并比较两组脐血染色体异常率。再将31例均称型胎儿生长受限的病例分为两组：合并胎儿畸形组与不合并胎儿畸形组,进一步比较两组脐血染色体异常率。结果：检出异常核型8例,染色体异常检出率为9.4%（8/74）,其中均称型FGR组异常检出率为16.1%（5/31）,不均称型FGR组检出率为7.0%（3/43）,两者异常率无统计学差异。8例异常核型中,染色体数目异常6例,包括三倍体1例、18-三体2例、21-三体1例、13-三体1例、Turner综合征1例;染色体结构异常2例,包括染色体平衡异位1例,倒位1例。11例合并胎儿畸形的均称型FGR脐血染色体异常率为36.3%（4/11）;20例未合并胎儿畸形均称型FGR脐血染色体异常率5.0%（1/20）,两者异常率差异有统计学意义。结论：脐血染色体异常是均称型FGR的主要原因之一;染色体三体为脐血染色体主要异常核型;

425例羊水染色体核型分析与荧光原位杂交方法的比较

目的比较425例羊水染色体核型分析与染色体13,18,21,X和Y荧光原位杂交方法的结果,评估染色体13,18,21,X和Y荧光原位杂交作为染色体异常独立测试的安全性并分析漏诊染色体异常的类别。方法以染色体核型分析作为金标准,比较了2011年3-7月425例患者的羊水染色体核型分析与荧光原位杂交方法的结果。结果在425例患者中染色体核型分析共发现22例染色体异常(包括16例非整倍体)。染色体异常率为5.2%(22/425),非整倍体率为72.7%(16/22)。染色体13,18,21,X和Y荧光原位杂交方法共发现15例染色体异常,漏诊一例嵌合体。针对染色体13,18,21,X和Y,荧光原位杂交的敏感性和特异性分别为93.75%和100%,针对全部染色体时,荧光原位杂交的敏感性降到了68.2%而特异性仍为100%。荧光原位杂交漏诊的7例染色体异常分别为3例染色体易位,3例染色体到位,1例嵌合体。结论本研究不支持荧光原位杂交作为检测染色体异常的独立测试。

369例男性不育症患者的染色体核型分析

目的探讨男性不育与染色体核型异常的关系。方法按照精液常规检查结果,将369例男性不育症患者分为4组(无精子症组61例,少精子症组98例,弱精子症组117例,精液正常组93例),采用常规外周血淋巴细胞染色体制备方法对上述患者进行细胞遗传学检测。结果染色体异常检出率为8.4%(31/369),其中无精子症组19.7%(12/61),少精子症组7.1%(7/98),弱精子症组6.0%(7/117),精液正常组5.4%(5/93)。结论染色体异常是男性不育的主要遗传因素。

武汉地区575例不孕不育患者的染色体分析

目的通过不孕不育患者的染色体检查分析,观察遗传因素在不孕不育中的重要性。方法对575例患者的外周血进行培养,细胞收获,制片及G显带,必要时进行C显带检查,显微镜下进行核型分析。结果发现染色体异常52例,异常检出率为9.04%。异常核型中,常染色体数目或结构明显异常21例,检出率3.65%,性染色体数目或结构明显异常15例,检出率2.61%,其中嵌合体4例。同时,本资料中染色体多态现象16例,检出率2.78%,主要有9号染色体倒位,大、小Y等。结论染色体异常是导致患者不孕不育的重要病因,对于不孕不育夫妇,染色体分析必须作为常规的检测方法。

胎儿染色体病的产前诊断

目的:通过对妊娠中晚期高危孕妇羊水细胞及脐血染色体的核型分析,进行胎儿染色体病的产前诊断,了解胎儿染色体异常发生情况及与各种产前诊断指征的关系。方法:对2001年1月～2006年8月来我院遗传门诊就诊的912例符合产前诊断指征的妊娠中晚期孕妇进行羊膜腔穿刺术或脐血管穿刺术抽取羊水或脐带血进行染色体核型分析。结果:在912例孕妇中发现54例染色体异常,占5.92%,其中数目异常33例(61.11%),其中21-三体13例,18-三体14例,13-三体2例;结构异常21例(38.89%),包括平衡易位13例(24.07%),倒位7例(12.96%),缺失1例(1.85%)。结论:染色体三体型是妊娠中晚期最常见的染色体病,孕中期母血清学筛查和胎儿系统超声检查可提高胎儿染色体病的产前诊断率。