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番木瓜籽挥发油对变异链球菌的抑制作用研究 被引量:2
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作者 姚孟霞 张菁芸 +2 位作者 陈锦萍 何小稳 易国辉 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2019年第7期64-68,共5页
研究番木瓜籽挥发油对变异链球菌UA159生物被膜形成及相关毒力基因表达的影响。采用甲基四氮盐(the abated tetrazolium salt,XTT)减低法评价番木瓜籽挥发油对变异链球菌生物被膜的抑制效果,实时定量PCR(real-time quantitative PCR,qP... 研究番木瓜籽挥发油对变异链球菌UA159生物被膜形成及相关毒力基因表达的影响。采用甲基四氮盐(the abated tetrazolium salt,XTT)减低法评价番木瓜籽挥发油对变异链球菌生物被膜的抑制效果,实时定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)法检测变异链球菌受番木瓜籽挥发油作用后其毒力基因luxS,gtfB,gbpD,brpA和ftf的表达情况。结果显示,番木瓜籽挥发油对变异链球菌的最低抑制生物被膜形成浓度为80μg/mL,qPCR法检测变异链球菌的毒力基因luxS,gtfB,gbpD,brpA和ftf的表达水平受到抑制。表明番木瓜籽挥发油对变异链球菌生物被膜的形成具有抑制作用,并抑制其毒力基因luxS,gtfB,gbpD,brpA和ftf的表达。 展开更多
关键词 番木瓜 挥发油 变异链球菌 毒力基因 生物被膜
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番木瓜籽提取物对白色念珠菌及菌丝特异性基因表达的研究 被引量:3
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作者 易国辉 张菁芸 +2 位作者 姚孟霞 陈锦萍 何小稳 《海南医学》 CAS 2019年第1期19-21,共3页
目的研究番木瓜籽提取物对游离态白色念珠菌的抑制效果,并探讨对其相关菌丝特异性基因表达的影响。方法采用微量稀释法测定番木瓜籽提取物对白色念珠菌标准株SC5314的最小抑菌浓度(MIC)与最小杀真菌浓度(MFC);采用荧光定量PCR法检测不... 目的研究番木瓜籽提取物对游离态白色念珠菌的抑制效果,并探讨对其相关菌丝特异性基因表达的影响。方法采用微量稀释法测定番木瓜籽提取物对白色念珠菌标准株SC5314的最小抑菌浓度(MIC)与最小杀真菌浓度(MFC);采用荧光定量PCR法检测不同浓度的番木瓜籽提取物对白色念珠菌相关菌丝特异性基因Efg1、Als3与Ece1的表达水平。结果番木瓜籽提取物对白色念珠菌的MIC为8μg/mL,MFC为8μg/mL;不同浓度下的番木瓜籽提取物能抑制白色念珠菌相关菌丝基因Efg1、Als3与Ece1的表达,在1μg/mL时,使其分别下调了1.7倍、2.1倍和0.20倍,2μg/mL时,分别下调了3.4倍、2.8倍和1.35倍。结论番木瓜籽提取物能抑制白色念珠菌的生长,并能下调白色念珠菌相关菌丝特异性基因的表达。 展开更多
关键词 白色念珠菌 番木瓜籽 荧光定量PCR 最小抑菌浓度 最小杀真菌浓度
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食品级乳酸乳球菌pNZ8149-luc质粒的构建及表达
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作者 易国辉 姚孟霞 +3 位作者 张菁芸 陈锦萍 何小稳 彭江龙 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第9期1649-1652,1623,共5页
目的:构建能够稳定表达萤火虫荧光素酶报告基因(luc)的乳酸乳球菌(Lactococcus lactis, L.lactis)食品级表达系统,以便后续研究对目的基因进行示踪。方法:从pGL4.10质粒中PCR扩增萤火虫荧光素酶报告基因,测序,克隆至载体pNZ8149,构建pNZ... 目的:构建能够稳定表达萤火虫荧光素酶报告基因(luc)的乳酸乳球菌(Lactococcus lactis, L.lactis)食品级表达系统,以便后续研究对目的基因进行示踪。方法:从pGL4.10质粒中PCR扩增萤火虫荧光素酶报告基因,测序,克隆至载体pNZ8149,构建pNZ8149-luc表达质粒;电击转化宿主乳酸乳球菌NZ3900,采用乳糖筛选法获得重组的乳酸乳球菌,Nisin诱导,采用微孔板发光检测仪检测荧光素酶的存在,Western Blot检测目标蛋白luc的表达。结果:PCR扩增的荧光素酶报告基因成功克隆至pNZ8149质粒,并电击转化宿主乳酸乳球菌NZ3900,得到乳酸乳球菌表达系统NZ3900/pNZ8149-luc。Nisin诱导后,检测到荧光素酶随诱导时间的延长活性逐渐增强,时间超过24 h之后荧光素酶活性逐渐下降。Western Blot检测到目标蛋白luc在胞内表达。结论:成功构建了p NZ8149-luc表达载体,并能够在乳酸乳球菌体内稳定表达。 展开更多
关键词 乳酸乳球菌 食品级 荧光素酶 基因表达
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