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一种不对称水解(R,S)-2,6-二甲基苯基氨基丙酸甲酯的新酯酶基因的克隆表达和酶学性质研究
被引量:
1
1
作者
董剑鸣
张利坤
+4 位作者
卢亚南
姚星超
杨玉莹
陆跃乐
张朝晖
《工业微生物》
CAS
CSCD
2016年第5期35-41,共7页
本文将来自反硝化无色杆菌Achromobacterdenitrificans1104的酯酶基因EHest,转化大肠杆菌中,成功表达了具有不对称水解农药甲霜灵的中间体(R,S)-2,6-二甲基苯基氨基丙酸甲酯(MAP)活性的酯酶EHesterase。用重组酯酶EHesterase催化MAP的水...
本文将来自反硝化无色杆菌Achromobacterdenitrificans1104的酯酶基因EHest,转化大肠杆菌中,成功表达了具有不对称水解农药甲霜灵的中间体(R,S)-2,6-二甲基苯基氨基丙酸甲酯(MAP)活性的酯酶EHesterase。用重组酯酶EHesterase催化MAP的水解,底物浓度50 g/L,反应1h的转化率29.5%,产物(R-酸)的eep是85.1%。该酶的最适反应pH和温度分别为9.0和50℃,在50℃以下和pH5~9之间具有较好的稳定性。该酶水解MAP的米氏动力学参数Vm、Km分别是0.733 g/(L·min)和7.49 g/L。加入10%DMSO对酶EHesterase的立体选择性和催化速度有一定的促进作用。Cu^(2+)、Fe^(3+)对酶活有明显抑制作用。该酶水解MAP的活性与水解p-对硝基苯乙酸酯的活性数量级相当,是水解橄榄油活性的333倍。
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关键词
反硝化无色杆菌
酯酶
克隆表达
(R
S)-2
6-二甲基苯基氨基丙酸甲酯
酶学性质
下载PDF
职称材料
题名
一种不对称水解(R,S)-2,6-二甲基苯基氨基丙酸甲酯的新酯酶基因的克隆表达和酶学性质研究
被引量:
1
1
作者
董剑鸣
张利坤
卢亚南
姚星超
杨玉莹
陆跃乐
张朝晖
机构
浙江工业大学生物工程学院
出处
《工业微生物》
CAS
CSCD
2016年第5期35-41,共7页
基金
国家自然科学基金(21447005)
文摘
本文将来自反硝化无色杆菌Achromobacterdenitrificans1104的酯酶基因EHest,转化大肠杆菌中,成功表达了具有不对称水解农药甲霜灵的中间体(R,S)-2,6-二甲基苯基氨基丙酸甲酯(MAP)活性的酯酶EHesterase。用重组酯酶EHesterase催化MAP的水解,底物浓度50 g/L,反应1h的转化率29.5%,产物(R-酸)的eep是85.1%。该酶的最适反应pH和温度分别为9.0和50℃,在50℃以下和pH5~9之间具有较好的稳定性。该酶水解MAP的米氏动力学参数Vm、Km分别是0.733 g/(L·min)和7.49 g/L。加入10%DMSO对酶EHesterase的立体选择性和催化速度有一定的促进作用。Cu^(2+)、Fe^(3+)对酶活有明显抑制作用。该酶水解MAP的活性与水解p-对硝基苯乙酸酯的活性数量级相当,是水解橄榄油活性的333倍。
关键词
反硝化无色杆菌
酯酶
克隆表达
(R
S)-2
6-二甲基苯基氨基丙酸甲酯
酶学性质
Keywords
Achromobacterdenitrificans
esterase
gene cloning and expression
methyl(R
S)-N-(2
6-dimethylphenyl) alaninate
enantioselective hydrolysis
enzymatic properties
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
TQ450.4 [化学工程—农药化工]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一种不对称水解(R,S)-2,6-二甲基苯基氨基丙酸甲酯的新酯酶基因的克隆表达和酶学性质研究
董剑鸣
张利坤
卢亚南
姚星超
杨玉莹
陆跃乐
张朝晖
《工业微生物》
CAS
CSCD
2016
1
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