柑橘黄龙病菌侵染对‘纽荷尔’脐橙组织结构的影响

【目的】了解‘纽荷尔’脐橙受柑橘黄龙病菌侵染后植株组织微形态结构的变化,以便进一步探明柑橘黄龙病对寄主的破坏特点及作用机制。【方法】通过电镜扫描、石蜡切片等技术观测感染柑橘黄龙病和健康脐橙的叶片、果蒂组织微形态结构,利用紫外可见分光光度计测定二者叶片光合色素、丙二醛(MDA)含量和过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性变化,分析柑橘黄龙病侵染对寄主组织结构和生理生化的影响。【结果】柑橘黄龙病菌侵染后的脐橙叶片厚度变薄、气孔萎缩,栅栏组织细胞由长条形变为椭圆形、细胞间隙增大、排列松散,果蒂的韧皮部部分维管束堵塞。患病叶片的叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素含量分别是健康叶片的19.87%、22.13%和47.71%,MDA含量增加了120.39%,POD、CAT和SOD酶活性显著提升。【结论】柑橘黄龙病菌侵染后植株叶片叶绿素含量降低,严重影响光合作用,同时细胞受损程度加大,寄主抵御病原菌入侵和扩展能力减弱。

不同温度组合热处理治疗柑橘黄龙病的田间效果分析

【目的】研究不同温度组合热处理对柑橘黄龙病的控制效果,为柑橘黄龙病防治提供新思路。【方法】以12株感染柑橘黄龙病的纽荷尔脐橙为材料,设4个处理(处理1:对照,不作任何处理;处理2:套膜,薄膜中间不打孔;处理3:薄膜中间打10个半径为1.5 cm的孔洞;处理4:薄膜中间打10个半径为3.0 cm的孔洞),每处理4株病树,分别于2017年8月6、12、19、25日和9月2日进行5次热处理试验,热处理时间为温度较高的14:00~15:00,每隔5 min记录一次温度。处理前每组采集样品作为参照组,5次热处理后再次采集样品,并通过实时荧光定量PCR(q PCR)定量分析5次热处理后病菌含量相对其参照组的倍数,分析柑橘黄龙病菌在经过热处理后的变化趋势。【结果】处理2和处理3的平均温度均超过38.0℃,最高温度分别为49.3和42.3℃;5次热处理后病树体内病菌含量显著下降(P<0.05,下同);病情指数明显降低,病情明显好转;价值果产量下降较缓,平均损失率分别为17.71%和14.52%;但处理2的温度过高,在治疗的同时易对树体造成伤害,树冠部分出现萎蔫、焦黄等现象。处理4的最高温度仅为37.3℃,未达到治疗柑橘黄龙病的有效温度,其病情指数上升,病情加重,病菌含量也有所上升,价值果平均损失率为41.18%。对照组病情持续加重,树势明显衰退,病菌含量显著升高;价值果产量下降最明显,平均损失率为72.22%。【结论】经过5次热处理后,处理3的柑橘黄龙病树病情指数显著降低,症状明显减轻,树体病菌含量明显下降,树势明显好转,对柑橘黄龙病的治疗效果最佳。在发病严重的柑橘园可通过该方式延长果树的挂果周期,从而减少经济损失。

3种提取单头柑桔木虱体内黄龙病菌DNA方法的比较

为找出较优的单头柑桔木虱黄龙病菌核酸提取方法,以饲养于温室内感染柑桔黄龙病的甜橙树上的柑桔木虱为试材,采用3种方法提取单头柑桔木虱的总核酸,对提取的核酸样品进行质量检测,并利用柑桔黄龙病菌特异性引物OI1/OI2c以及r-rplLAs/f-rplLAs分别进行了常规PCR和qPCR检测。结果表明,3种方法均可以成功提取到单头柑桔木虱总核酸且均能检测到黄龙病菌。3种方法各有优缺点:李菁的方法步骤简单、历时短,提取的核酸浓度较高,但核酸质量较低;氯仿-异戊醇法步骤较多、历时长,提取核酸浓度较低,但核酸质量较高;动物组织直接PCR试剂盒法简便快速,提取的核酸浓度高,核酸质量一般,成本较高。

赣南柑桔黄龙病菌16S rDNA、16S/23S rDNA间隔区和核糖体蛋白基因的遗传多样性

为探究赣南地区柑桔黄龙病菌的遗传多样性,从赣南16个县(市、区)采集32份具典型柑桔黄龙病症状的脐橙叶片样品,运用PCR-RFLP(聚合酶链式反应-限制性长度多态性分析)技术研究柑桔黄龙病菌16SrDNA序列、16S/23SrDNA间隔区序列和核糖体蛋白基因的多态性,并对3个基因片段进行测序,分析序列的碱基含量、碱基转换率与颠换率、相似性、核苷酸遗传距离和系统进化特征。结果表明,供试赣南柑桔黄龙病菌样品在3个基因片段上的RFLP指纹图谱均一致,未表现出多态性,且序列相似性均在98%~100%;序列碱基中的GC含量以16SrDNA最大,序列碱基的转换率/颠换率以16SrDNA最小;赣南柑桔黄龙病菌样品与亚洲种Candidatus Liberibacter asiaticus之间的序列相似性最大、核苷酸遗传距离最小,在系统进化中归属亚洲种。

光谱检测技术在柑橘黄龙病诊断中的研究进展

柑橘黄龙病严重危害柑橘产业的发展,且目前没有特效药可治愈.光谱检测技术的开发,其快速、安全、无损的优点广受研究者的关注.本文就目前国内外关于近红外光谱技术与高光谱技术在柑橘黄龙病诊断方面的最新应用进行综述,着重介绍光谱检测技术的物理机制以及在柑橘黄龙病检测中的研究进展,提出光谱检测技术是实现柑橘黄龙病准确、快速且无损检测的发展趋势.