全基因组重测序筛选弓背青鳉三亚群体性别遗传标记

【目的】开发弓背青鳉(Oryzias curvinotus)三亚群体(下称“三亚青鳉”)遗传性别鉴定分子标记,为进一步挖掘其性别决定基因奠定基础。【方法】用染色体商(Chromosome quotient,CQ)法比较雌雄两性个体的全基因组重测序覆盖度,筛选潜在的性别特异性序列区域(CQ<0.1)并设计引物,通过PCR扩增验证引物区分三亚青鳉群体及其子代性别的适用性。【结果】经CQ分析筛选,CQ<0.1的特异性区域279个,设计引物279对。随机挑选的60对引物中,29对标记引物在三亚青鳉群体雄鱼中扩增得一个DNA条带,雌鱼无条带,均可鉴定三亚青鳉遗传性别。从29对引物中随机挑选2对引物(命名为Marker1和Marker2)进一步验证,引物Marker1、Marker2在雄鱼中扩增产物分别为791、556 bp,两对引物对三亚青鳉子代群体的扩增结果与亲本一致。用两对性别特异性标记对三亚群体的F2代全同胞家系94个个体进行扩增,结果发现F2群体自然性别比约1∶1。【结论】性别特异性引物Marker1和Marker2均可对三亚青鳉群体进行遗传性别鉴定,在三亚青鳉野生亲本及其子代中均有稳定性和通用性,可用于弓背青鳉三亚群体遗传性别鉴定。

湛江沿海西施舌性腺周年变化的组织学观察

[目的]研究湛江沿海已达性成熟年龄的西施舌性腺周年变化。[方法]通过组织学切片和显微观察,对湛江沿海达性成熟年龄的西施舌性腺进行了周年变化研究。[结果]以滤泡的发育程度、生殖细胞发育状态及其在滤泡中数量的多少为标准,对西施舌性腺的组织学观察发现,卵巢及精巢发育过程均可分为增殖期、生长期、成熟期、排放期和休止期5个时期。卵细胞的发生及其发育时期分为卵原细胞期、生长初期、生长中期、生长后期以及成熟期,精子的发生分别经历了精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精细胞和精子5个时期。根据肥满度和相对重量的周年变化规律并结合性腺组织切片观察结果,湛江地区的西施舌性腺发育为一年有2~3个排放期。该地区西施舌肥满度和相对总重最低值都出现在12月,为26.79%和25.54%;最高值出现在9月和7月,分别为46.16%和49.42%。[结论]西施舌雌雄性腺发育基本同步,雄性发育略快。

西施舌代谢物对单细胞藻类的促生长作用研究

在实验室条件下,按规格将西施舌分为A[(2.67±0.12)cm]、B[(4.43±0.24)cm]、C[(6.42±0.27)cm]、D[(8.38±0.18)cm]和E[(10.16±0.27)cm]5组,研究了西施舌代谢物对湛江等鞭金藻、牟氏角毛藻、亚心形扁藻及波吉卵囊藻4种单胞藻生长的影响。结果表明:西施舌代谢物对4种单胞藻的生长具有明显的促进作用,对不同种类单胞藻的促生长效果也存在较大差异。西施舌代谢物对湛江等鞭金藻、牟氏角毛藻的促生长作用明显优于亚心形扁藻和波吉卵囊藻;由于不同规格的西施舌排泄量不同,因而其对单胞藻的促生长效果差异极显著(P<0.01)。藻细胞的增长量随着西施舌规格的增大而增大,且D、E组单胞藻的生长维持时间较长,168 h还处于生长期。西施舌的规格与藻细胞的增长量呈正相关,其关系曲线可用Y=aln X+b表示。

微卫星DNA标记评估湛江光裸星虫养殖群体的遗传多样性

为评估湛江地区光裸星虫养殖群体的种质现状,利用11对荧光标记微卫星引物对光裸星虫的1个野生群体和2个养殖群体,每个群体取30~31个样本进行遗传多样性分析。结果表明,11个微卫星位点在不同群体呈现出不同程度的多态性,野生群体和2个养殖群体的平均等位基因数(Na)在4.182~4.636,平均有效等位基因数(Ne)在2.447~2.632,平均观测杂合度(Ho)、期望杂合度(He)分别在0.442~0.471、0.525~0.536,平均多态信息含量(PIC)为0.461~0.475。Hardy-Weinber平衡分析显示,3个群体的大部分位点未偏离平衡。在每个群体中进行连锁不平衡分析,发现有4对位点间显著(P<0.05)或者极显著(P<0.01)偏离连锁平衡。分子方差分析(AMOVA)显示,光裸星虫大部分的变异来自于群体内而非群体间。综合分析认为,本研究采集的2个光裸星虫养殖群体遗传多样性丰富,暂未出现近交衰退现象。