一株耐盐菌GL的分离鉴定及促生特性分析

利用海底的淤泥进行分离挑选得到一株耐盐性较强的菌株,该菌为细长的棒状且菌体较长,菌落发白,用接种针易刮起,发出微臭气息.经过16S rRNA序列比对,该菌株与嗜热脂肪土芽孢杆菌菌株GL(KX254601.1)之间关系可信度达到100%,故将其定名为嗜热脂肪土芽孢杆菌(GL).经过对该菌株在1%~10%盐浓度下生长曲线分析,3%~6%的NaCl浓度内菌株最高OD 600能达到1.5,但是当盐浓度达到10%时菌株生长受到严重影响.菌株GL在1%~9%盐浓度下长势良好,其最佳生长盐浓度为2%.对该菌种的固氮、产铁载体以及促进种子萌发能力进行分析,可以看到在0~2.5%盐浓度下,Ashby无氮培养基上菌落周围均有透明圈,说明该菌株在0~2.50%的盐浓度下具有较好的固氮能力.菌株在0~150 mmol/L的盐浓度下可以产生铁载体,能够促进小白菜种子在盐胁迫条件下萌发和生长,说明该菌株在盐胁迫条件下具有较好的促生特性.

不同品种葡萄皮上细菌的多样性分析

以4种市面常见葡萄品种:黑提(H)、玫瑰香(M)、阳光玫瑰(Y)、红提(D)为研究对象,应用高通量测序技术对4种葡萄果皮上细菌的多样性进行分析研究.试验结果表明,细菌门水平上的优势菌群一般是:拟杆菌门(Bacteroidetes)、厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)这4个门类,细菌属水平的优势菌群一般为乳酸菌(Lactobacillus)、拟球菌(Bacteroides)、另枝菌属(Alistipes)、毛螺旋菌科_NK4A136_group(Lachnospiraceae_NK4A136_group)、链球菌(Streptococcus)、拟普雷沃菌属(Alloprevotella).研究表明:4种葡萄表皮的细菌多样性指数无显著差异,其中玫瑰香与红提的细菌群落相似程度较高.

黄芪提取物对细菌抑制作用的研究

本文以黄芪作为研究对象,利用制得的黄芪提取物对多种细菌进行了抑菌活性实验,结果表明:黄芪提取物抑菌作用因菌种不同而最低抑菌浓度有所不同,大肠杆菌为7.5%、产气杆菌为8%、变形杆菌为4.5%、金黄色葡萄球菌为9.5%、沙门氏菌10%,其抑菌直径分别为:大肠杆菌8.6mm、产气杆菌8.1mm、变形杆菌8.2mm、金黄色葡萄球菌7.7mm、沙门氏菌8.4mm,表明对常见细菌有较好的抑制作用,其抑菌效果与时间有一定关系,在121℃湿热条件下20min后黄芪提取物抑菌效果基本不变,说明制得的黄芪提取物具有良好的热稳定性。此外,黄芪提取物抑菌浓度与时间有关。

不同甜酒曲中可培养真菌的多样性分析

用可培养的方法对6种甜酒曲中的真菌进行分离筛选,共分离得到25株酵母菌和13株霉菌,利用26S r DNA序列分析对酵母菌进行鉴定,结果表明,其分属于酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、扣囊复膜酵母(Saccharomycopsis fibuligera)、东方伊萨酵母(Issatchenkia orientalis)和克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)。利用ITS r DNA序列分析对霉菌菌株进行鉴定,结果表明,13株霉菌分别为米根霉(Rhizopus oryzae)、小孢根霉(Rhizopus microsporus)、小孢根霉华变种(Rhizopus microsporus var.chinesis)、小孢根霉须状变种(Rhizopus microsporus var.rhizopodiformis)、印度毛霉(Mucor indicus)和卷枝毛霉(Mucor circinelloides)。

甜酒酿中酵母菌多样性的研究

从福建酒曲、苏州酒曲和安琪酒曲中分离出6株酵母菌。通过对所分离的酵母菌的18S rDNA进行分析鉴定,同时利用形态、生理生化的分析,最终确定这6株菌属于二个类群,其分别属于酿酒酵母属,复膜酵母属。利用18S rDNA的序列,进行聚类分析,这6株酵母菌其中福建酒曲中有4株酵母菌,分别为FJ-2、FJ-5、FJ-6、FJ-7,其中FJ-2与Saccharomyces cerevisiae strain OC11的相似性达到99%、FJ-5与S.cerevisiae S288c相似性达99%、FJ-6与S.cerevisiae strain OC11相似性达99%,FJ-7与Saccharomycopsis fibuligera strainYW12相似度达到99%。苏州酒曲中有1株,为SZ-2与S.cerevisiae的相似性达99%。安琪酒曲中有1株,该菌株与酿酒酵母的相似度为100%。由此可见,在酒酿中发挥作用的酵母菌是酿酒酵母属和复膜酵母属中的菌株。

应用PCR-DGGE方法研究甜酒曲中真菌多样性

提取6种甜酒酒曲的总DNA,利用真菌18S rRNA基因片段的通用引物NS1、Fung-GC,采用变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)方法,进行不同甜酒酒曲中真菌多样性的分析。结果表明,6种甜酒酒曲中共分离出3属真菌和不可培养真菌,湖南韶山的甜酒曲中主要是扣囊复膜酵母属和根霉属的菌株;湖南湘潭甜酒曲中的真菌为酿酒酵母属、扣囊复膜酵母属和根霉属;湖南祁东、福建福州和浙江丽水甜酒曲中的真菌均为酿酒酵母属、扣囊复膜酵母属、根霉属和不可培养真菌;浙江兰溪甜酒曲中的真菌为根霉属和不可培养真菌。在传统的酒曲中的真菌主要是酿酒酵母属和扣囊复膜酵母属,此外不可培养真菌在甜酒酒曲中也起到非常重要的作用。

β-葡萄糖苷酶在酿酒酵母表面上的展示及酶学性质的研究

根据裂殖酵母的β-葡萄糖苷酶的基因序列和酒精酵母菌表面展示质粒载体pYD1上的多克隆位点设计引物,从裂殖酵母中提取总RNA,然后反转录扩增得到β-葡萄糖苷酶基因(bglA),把该基因连接到表面展示质粒载体pYD1上,成功构建了重组质粒pYD1-bglA,并转化用于表面展示的酵母EBY100菌株中,得到酵母转化子,提取酵母菌的DNA通过PCR扩增证实了β-葡萄糖苷酶基因已整合到酵母基因组中.以不含载体和含空载体的酵母菌为对照,加2%(w/v)的半乳糖诱导48 h后,利用免疫荧光法在荧光显微镜下检测到了来源于裂殖酵母的β-葡萄糖苷酶展示在酵母菌细胞表面,并对其酶学性质进行分析研究.

羽毛角蛋白酶生产菌的选育及产酶条件研究

从长期堆积废羽毛的土壤中分离筛选出 15株对羽毛有降解能力的细菌 ,然后经过摇瓶复筛得到一株对羽毛有较强降解能力的菌株 .该菌内生孢子 ,革兰氏染色阳性 ,为一芽孢杆菌 .摇瓶发酵的最适条件为 :温度 42℃ ,pH为 7.5 ,转速 12 5rpm ,最高酶活力达 2 5 .2 0U/mL .外加其他碳源或氮源对角蛋白酶的产生有一定的影响 .

芦荟提取物抑菌作用的研究

用芦荟提取物对几种常见的微生物进行抑菌活性测定，结果表明芦荟提取物能有效地抑制细菌的生长，对供试菌的最低抑菌浓度金黄色葡萄球菌为１０％，沙门氏菌为８％，大肠杆菌为９％，产气肠杆菌９％，枯草杆菌１１％，芦荟提取物能耐受高温短时的热处理。

PCR-DGGE法分析不同酒曲中细菌多样性

目的:研究不同酒曲中细菌的多样性.方法:利用DNA提取试剂盒,分别提取6种酒曲的总DNA,利用细菌16S rRNA gene V3区通用引物,采用变性梯度凝胶电泳(polymerase chain reaction-denatured gradient gelelectrophoresis,PCR-DGGE)方法,进行不同酒曲中细菌多样性的分析.结果:6种酒曲中共分离出12属的细菌,分别为:湖南韶山的酒曲中主要是Weissella,Streptophyta,Bacillus,Pantoea,Okibacterium这5个属的菌株,湖南湘潭酒曲中主要含有Weissella,Pediococcus,Lactococcus,Sphingomonas,Streptophyta,Pantoea这6属的菌株,湖南祁东酒曲中主要含有Weissella,Pediococcus,Bacillus,Klebsiella,Pantoea 5属的菌株,福建福州酒曲含有Weissella,Pediococcus,Pantoea,Pediococcus,Sphingomonas,Streptophyta 6属的菌株,浙江丽水酒曲含有Weissella,Pantoea,Pediococcus,Klebsiella,Enterobacter,Rhizobium,Sphingomonas,Thauera 8属的菌株,浙江兰溪酒曲含有Weissella,Streptophyta,Pantoea 3属的菌株.结论:这说明不同地区的酒曲中的细菌的种类有所不同,同时也说明酒曲中Weissella属的菌是发酵的常见菌群.

东方伊萨酵母FJ-J-3发酵特性的研究

该实验研究了东方伊萨酵母(Issatchenkia orientalis)FJ-J-3菌株在不同初始葡萄糖含量、培养温度条件下细胞生长、葡萄糖利用及产乙醇情况。结果表明,在培养基中含有50 g/L葡萄糖时菌体生长量较高,生长速率最快;且乙醇产量较高,产率最高。在培养温度为28℃时菌体生长量最高,且乙醇产量最高。菌株FJ-J-3能够耐受16%vol的乙醇,且在72 h时细胞仍能正常存活。

细菌的铁供给研究

在大多数生物机体中,Fe3+的获得都有着特殊的机制.细菌利用载铁颗粒、铁血红素、血红蛋白来运输铁,并且受基因表达的调控.

逆境条件对酵母菌海藻糖含量的影响

酵母菌经过不同浓度的盐溶液、低温等不同方式的逆境处理,不同时间内取样,对海藻糖的含量进行测量,得出酵母菌海藻糖含量积累的最佳单一胁迫条件是:1.2mol/LNaCl溶液处理酵母菌30 min;0.9 mol/L KCl溶液处理酵母菌60 min;0.6 mol/L MgSO_溶液处理酵母菌90 min;1.2 mol/L CaCl_2溶液处理酵母菌90 min;0.8 mol/LAlCl_3溶液处理酵母菌6h;0.4 mol/LFeCl_3溶液处理酵母菌3h;0℃处理酵母菌15 s.

粟酒裂殖酵母麦芽糖酶基因的克隆及在大肠杆菌内的表达

利用PCR的方法,以粟酒裂殖酵母菌的染色体DNA为模板,扩增得到粟酒裂殖酵母的结构基因,其开放阅读框1740 bp的序列,可以编码579氨基酸,分子量为67.7 kD.利用NCBI对它的蛋白序列进行比对,发现这个蛋白序列与Aspergillus oryza、Candida albicans、Hansenula polymorpha、Saccharomycescerevisiae、Saccharomyces pastorianus的麦芽糖酶相比分别具有40.6%、41.6%、37.9%、34.7%、34.5%的相似性.而与粟酒裂殖酵母的α-葡萄糖苷酶具有99.8%的相似性,由此可以得出克隆得到的结构基因应该是粟酒裂殖酵母的麦芽糖酶结构基因.将克隆的粟酒裂殖酵母的麦芽糖酶基因克隆到pQE30表达载体中在大肠杆菌中进行诱导表达,然后测定其麦芽糖酶的活力,其酶的比活力是野生菌株的21倍,诱导条件下麦芽糖酶的比活力是非诱导条件下的10倍.

环境胁迫对东方伊萨酵母FJ-J-3产乙醇的影响

该研究以东方伊萨酵母(Issatchenkia orientalis)FJ-J-3为研究对象,利用分光光度计法和气相色谱(GC)法测定其在不同pH和不同Na_2SO_4含量胁迫下的生长状况和乙醇产量。结果表明,当pH为2.0、不含Na_2SO_4时,OD_(600 nm)值(4.8)和乙醇产量(1.3%vol)最高;当pH为4.0、Na_2SO_4含量为2%时,OD_(600 nm)值(26.5)和乙醇产量(3.0%vol)最高;当pH为6.0、Na_2SO_4含量为6%时,OD_(600 nm)值(27.5)和乙醇产量(2.9%vol)最高;当pH为8.0、Na_2SO_4含量为2%时,OD_(600 nm)值(20.9)和乙醇产量(2.3%vol)最高。菌株FJ-J-3在pH=4.0和pH=6.0培养条件下具有较好的盐耐受性;在pH=2.0和pH=8.0的条件下,菌株FJ-J-3对盐的耐受性减弱。

网络成瘾临床诊断标准的制定

目的针对因过度使用网络而影响社会功能并出现精神行为异常的患者制定网络成瘾临床诊断标准(以下简称"标准"),为该疾病发病机制的研究、治疗及预防提供指导。方法应用标准草案对以"沉溺于网络,明显影响学习、工作或人际交往"为主诉就医的110例患者进行症状调查,根据症状出现率及症状关联情况草拟标准初稿-1。对使用初稿-1诊断为网络成瘾的408例患者于出院后1年内进行随访,统计诊断符合率与复发率,并据此调整初稿-1,草拟初稿-2。由全国多家医院精神科医师采用初稿-2对以上述相同主诉就诊的150例患者进行现场测试。根据测试结果决定是否对初稿-2的语言描述作调整,最后确定诊断标准定稿。结果症状标准共7条,概括为①对使用网络的渴求;②减少或停止使用后的戒断;③耐受;④对网络的使用难以控制;⑤不顾危害性后果;⑥放弃其他活动;⑦逃避问题或缓解不良情绪。确诊须具备①和②2条核心症状及后5条附加症状中的任意1条。病程标准为平均每天非工作学习目的连续上网≥6h、符合症状标准≥3个月。随访观察发现,网络成瘾患者出院1年时复发率为70.6%,诊断符合率96.1%。两评定员间各症状条目一致性为89.3%~98.0%,Kappa值为0.73~0.87(P<0.01)。不同技术职称评定员间症状诊断一致性为96.2%~98.8%,Kappa值为0.89~0.95(P<0.01)。结论本标准制定过程符合循证医学要求、评定者间一致性高、可操作性强,适合临床应用。

广泛性焦虑障碍认知行为治疗技术专家共识的德尔菲法研究

目的:使用德尔菲法(Delphi法)研究国内广泛性焦虑障碍(GAD)的认知行为治疗(CBT)技术的使用情况,为进一步规范CBT技术奠定基础。方法:复习国外关于广泛性焦虑障碍的认知行为治疗的随机对照研究文献,筛选出35个认知行为治疗技术并制定专家咨询表,发放给31名认知行为治疗专家,进行两轮咨询,最后对这些技术进行排序。结果:综合秩次排前4位的依次为,建立治疗关系、心理教育、资料收集与评估和放松练习;而国外常用的技术,如苏格拉底提问、担忧暴露排在第26位和第22位;思维阻止在可操作性维度、使用频率维度和对治疗的贡献维度上的变异系数(CV)分别为0.25、0.36和0.31。结论:在广泛性焦虑障碍的治疗中,专家达成共识的技术为建立治疗关系、心理教育、资料收集与评估和放松练习,而思维阻止是否剔除有待进一步研究。

住院网络成瘾青少年的心理健康状况及其影响因素分析

目的探讨住院网络成瘾(Internet Addiction Disorder,IAD)青少年心理健康状况及其影响因素,为预防和控制青少年网络成瘾提供有效信息。方法采用自编一般情况、家庭情况及与网络成瘾有关的自我意识调查表、艾森克人格问卷(EPQ)、父母养育方式评定量表(EMBU)及症状自评量表(SCL-90),对596名经北京军区总医院诊断为IAD的青少年进行施测,以IAD青少年的SCL-90总分为因变量进行多元逐步回归分析。结果IAD青少年强迫、人际关系敏感、抑郁、焦虑、敌对、偏执因子分、总均分及阳性项目数均高于全国青年常模。进入回归方程的变量有EPQ的N因子、EMBU的父亲拒绝否认因子和父亲情感温暖理解因子、压抑感及对未来目标的认识。结论住院IAD青少年存在广泛的心身症状,其总体心理健康状况与神经质人格、父亲不当教养方式、过度压抑及对未来目标认识不明确有关。

银杏叶提取物抑菌作用的研究

银杏叶提取物对常见的一系列病菌有强烈的抑制作用。其最小抑菌率分别为：金黄色葡萄球菌为8％，变形杆菌为6％，大肠杆菌为6％，枯草芽孢杆菌为6％，产气杆菌为5％，沙门氏菌6％。在相同时间内，浓度越高，抑菌率也越高，同一浓度作用时间越长抑菌率也就越高，并且具有热稳定性。