朝天罐总酚对人肺癌细胞增殖抑制及诱导凋亡作用的研究

目的:研究朝天罐总酚对人肺癌细胞株的抑制作用及其抗肺癌作用机制。方法:培养人肺癌细胞,在倒置显微镜下观察朝天罐总酚对肺癌细胞形态学的影响;采用CCK-8法检测10、20、40、80、160μg/mL5个不同浓度朝天罐总酚对三株人肺癌细胞NCI-H1299、A549、NCI-H460的体外增殖抑制率;应用台盼蓝拒染法检测朝天罐总酚作用后的细胞活力;Hoechst 33342检测细胞核染色质的变化;流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染色法检测朝天罐总酚对NCI-H460细胞凋亡的影响;Real-time PCR检测朝天罐总酚对NCI-H460细胞Bcl-2、Bax、Fas、Caspase-3、Caspase-9 mRNA表达的影响。结果:倒置显微镜观察到在朝天罐总酚的作用下肺癌细胞的增殖均受到不同程度的抑制,细胞数量减少;CCK-8实验表明朝天罐总酚能显著抑制NCI-H1299、A549、NCI-H460细胞的增殖活性,台盼蓝拒染结果显示朝天罐总酚能显著降低三种肺癌细胞活力。Hoechst 33342检测NCI-H460细胞凋亡发现细胞核染色质明显改变;流式细胞术结果显示朝天罐总酚可促进NCI-H460细胞凋亡;Real-time PCR显示在朝天罐总酚的作用下NCI-H460细胞Bcl-2 mRNA表达显著降低,Bax、Fas、Caspase-3、Caspase-9 mRNA表达显著升高。结论:朝天罐总酚能抑制肺癌细胞增殖并诱导其凋亡。

朝天罐总酚的提取纯化及其抗氧化活性研究

[目的]优化朝天罐总酚的提取纯化工艺并评价其抗氧化活性。[方法]采用单因素和正交试验方法优化朝天罐总酚回流提取工艺,并使用大孔树脂对朝天罐总酚进行分离纯化。采用清除DPPH、ABTS·及Fe 3+还原能力试验,与维生素C的抗氧化能力进行比较,评价朝天罐总酚的抗氧化活性。[结果]最佳提取工艺条件为乙醇浓度35%,提取温度80℃,料液比1∶50(g∶mL),提取时间3 h,提取次数1次;AB-8型大孔树脂为纯化朝天罐总酚的最佳树脂,最佳动态工艺条件为上样液质量浓度2.0 mg/mL、上样流速2 mL/min、洗脱液乙醇浓度60%、洗脱流速3 mL/min、洗脱用量120 mL。在最佳工艺条件下,纯化后的朝天罐总酚含量为74.26%,对比于粗提物中的总酚含量(15.36%)提高了3.83倍。朝天罐总酚的抗氧化活性随质量浓度的增大而增强,其清除DPPH自由基的能力较维生素C强,对ABTS+自由基和铁离子也有较好的清除能力和还原能力,经AB-8树脂纯化后,其抗氧化能力显著提高(P<0.01)。[结论]优选的提取纯化工艺稳定可行、提取率高,朝天罐总酚抗氧化性能较强,为朝天罐总酚的应用提供了科学依据和理论基础。

广西6种瑶药材重金属含量分析与评价

目的测定广西不同产地野六谷、参亮、杀松涯、冻你美、白饭木和肥心使端中5种重金属含量,并进行安全性评价。方法采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定6种瑶药材样品中铅、砷、镉、汞、铜的含量,并运用单因子污染指数法和内梅罗综合污染指数法对药材重金属污染进行评价。结果 6种瑶药材中5种重金属的单因子污染指数为0~3.0,内梅罗综合污染指数从大到小为野六谷(1.0)>杀松涯(0.8)>冻你美(0.6)>白饭木(0.5)>肥心使端(0.4)>参亮(0.3)。结论广西野六谷和杀松涯的重金属污染处于警戒级,其余药材均为安全级。

基于网络药理学和分子对接技术探讨罗汉果治疗糖尿病的作用机制

目的:运用网络药理学和分子对接技术探讨罗汉果治疗糖尿病的作用机制。方法:通过TCMSP平台和Swiss Target Prediction数据库筛选出罗汉果的活性成分及其靶点;利用GeneCard、TTD、OMIM数据库筛选出糖尿病潜在靶点;采用Cytoscape 3.7.2软件构建药物-活性成分-疾病-靶点的可视化网络;通过STRING数据库对关键靶点构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络;利用Metascape数据库进行基因本体(GO)功能以及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;利用Autodock4和Pymol软件对关键活性成分和关键靶点进行分子对接分析和可视化。结果:筛选出有效成分18种,糖尿病靶点146个。GO功能富集分析得到GO条目572条,KEGG通路富集分析得到信号通路167条。分子对接结果显示β-谷甾醇、山柰酚、罗汉果醇等关键活性成分与原癌基因酪氨酸蛋白激酶(SRC)等关键靶点的亲和力较高。结论:罗汉果通过多靶点、多通路发挥抗糖尿病的作用,其关键活性成分通过与SRC、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)、丝裂原活化蛋白激酶3(MAPK-3)等靶点调节晚期糖基化终末产物-糖基化终末产物受体(AGE-RAGE)、缺氧诱导因子1(HIF-1)、磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶(PI3K-Akt)等信号通路起到治疗糖尿病的作用。