正交试验优选罗汉果组培苗生根壮苗生产工艺

目的:优化罗汉果(Siraitia grosuenorii)的组培苗生根壮苗技术体系,为大量生产优质种苗提供基础。方法:采用正交试验设计,以培养基(A)、NAA(B)、蔗糖(C)、活性炭(D)为因素,以罗汉果组培苗的株高(cm)、茎粗(cm)、新增叶片数、新增最大叶面积(cm2)、根数、根长(cm)、根粗(mm)、单株鲜重(g)等各个性状为考察指标。结果:培养基和活性炭对组培苗生根壮苗产生显著影响,其影响程度为:培养基>活性炭>NAA>蔗糖。由此正交试验筛选出罗汉果组培苗生根壮苗较优的组合为A2B3C3D2,即1/2 MS培养基+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+活性炭0.5 g/L。结论:优选出的生根壮苗工艺经济、简便,适宜工厂化生产。

广西道地药材山豆根的适宜气候条件分析

从广西道地药材山豆根(Sophora tonkinensis Gapnep.)产区7个气候条件差异明显的样地选取21份山豆根样品,测定其生物碱含量,结合相应地点30a气候因子平均值数据,采用逐步回归分析、偏相关分析和通径分析方法,对山豆根生物碱含量与气候因子的数量关系进行分析。结果表明,年平均气温、6、7、8月平均极端高温和年平均降水量是影响山豆根生物碱含量的主导气候因子,共同决定了生物碱含量变化的95.24%,其中年平均降水量是最主要的促进因子,8月平均极端高温是最主要的限制因素。年平均气温<20℃、月平均极端高温<35℃和年降水量>1500mm是优质山豆根产出的适宜气候条件,该指标可作为选择山豆根适种基地的参考指标,为科学合理选择山豆根规范化种植基地,保证中成药生产原料质量提供参考。

药用唇柱苣苔叶片分化及植株再生研究

目的:建立濒危药用植物药用唇柱苣苔叶片分化及植株再生体系。方法:以药用唇柱苣苔(Chirita medica D.Fangex W.T.Wang)叶片为外植体,灭菌后接种到附加不同激素配比的培养基中培养,筛选各阶段合适的培养基。结果:不定芽诱导的最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,pH=6.0,诱导率为100%;最佳继代增殖培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,pH 6.0,增殖系数为12.6/30 d;最适合的生根培养基为1/2 MS+0.2 mg/L NAA,pH=6.0,生根率高达100%,移栽成活率为95.0%。结论:本繁殖体系可在短时间内提供大量种苗,并为种质资源的保护和可持续利用提供技术指导。

海南冬青组培快繁体系的建立

建立海南冬青(Ilex hainanensis Merr.)的组培快繁技术体系。以海南冬青成熟种子为材料,以MS、1/2MS为基本培养基,采用正交试验设计法研究不同植物生长调节剂组合对海南冬青种子萌发、初代诱导、增殖培养、生根培养的影响,筛选出组培快繁各环节的最佳培养基配方。研究结果,海南冬青种子萌发的最佳培养基为MS+6-BA0.5 mg/L+GA30.5 mg/L,萌发率达90%以上;丛生芽诱导的最适培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+KT 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,诱导不定芽数为28.56个;最佳继代增殖培养基为MS+6-BA 2.5 mg/L+KT 0.75 mg/L+NAA0.1 mg/L,20 d增殖系数为7.30;最适的生根培养基为1/2MS+IBA 0.75 mg/L+NAA 0.5 mg/L,生根率为91.33%,在菜园土-细河沙(3∶1)中移栽成活率为90%。表明本组培快繁技术体系不但增殖系数高,而且组培苗质量好,可为海南冬青的规模化生产提供优质种苗与技术指导。

山豆根组培快繁技术优化的研究

以药用植物山豆根为材料,通过探讨不同部位、基本培养基、6-BA浓度和继代代数对有效繁殖系数和成苗质量的影响,以优化山豆根的组培快繁技术。结果表明：顶芽茎段为诱导的最佳部位;改良B5低氮盐,为最适基本培养基;6-BA 2.0 mg/L对芽分化和苗的质量较优;较为合适的继代代数为10~15代。

鹤顶兰种子萌发及原球茎增殖培养研究

以鹤顶兰成熟蒴果的种子为实验材料,研究影响种子非共生萌发的因素和种胚发育途径,并采用正交设计研究了原球茎增殖的影响因素。结果表明:冷藏影响种子的活力且其萌发率随冷藏时间延长而降低;0.5%NaClO溶液浸泡种子可提高萌发率,缩短初始萌发时间;种胚发育途径为种胚转绿后从种子侧面突破种皮而形成原球茎,随后分化出具根芽结构的完整植株;6-BA对原球茎增殖作用显著,原球茎增殖的最适培养基为1/2MS+3.0mg/L6-BA+1.0mg/L KT+1.0mg/L NAA,增殖倍数为6.67。

亚洲百合花丝离体培养器官形成的细胞形态学研究

对亚洲百合的花丝进行离体培养,并利用常规石蜡制片技术对诱导效果最好的材料进行细胞形态学观察,研究花丝在离体培养过程中器官形成的细胞形态学变化。结果表明:花丝在MS+BA0.5 mg/L+NAA0.5 mg/L的培养基上诱导效果最好。离体培养后其形态学下端切口内方的1～3层细胞首先启动脱分化,然后是内方的10～12层细胞,而其他部位的细胞自始至终未启动脱分化。亚洲百合的再生方式为器官发生型,器官通过胚性愈伤组织间接产生,在胚性愈伤组织团表面附近形成芽原基,或在胚性愈伤组织团内部形成根原基,有时同时分别在内、外形成根原基和芽原基后再通过维管组织连接成完整的植株。本研究为亚洲百合的人工调控提供基础理论依据。

亚洲百合花器官组织培养再生植株研究

[目的]对亚洲百合杂种系的栽培品种"米丽拉"的花器官进行组织培养研究,探讨其快速繁殖技术。[方法]以"米丽拉"的花器官为外植体,通过比较花器官不同部位和不同激素配比的诱导效果,筛选出最适合该品种花器官的培养基。[结果]不同部位的分化率存在差异,从高到低依次为花丝、花柱、子房、花托、花瓣、花药;在不同激素配比培养基中,MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L的诱导效果最佳,其次是MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L。[结论]可为亚洲百合杂种系的"米丽拉"百合提供大量优质种苗。

牛大力种子萌发特性研究

目的:研究牛大力种子萌发特性,找到种子萌发的最佳条件,为牛大力规范化、规模化种植提供种苗繁育途径和方法。方法:测定牛大力种子形态、千粒重和含水量,研究在不同浸种时间、不同光照、不同温度条件下的发芽率,并进一步比较它们之间的相关性,同时比较在不同发芽床培养下的发芽率、发芽指数、始发芽粒数和发芽天数的差异。结果:牛大力种子平均长度为1 042.24 mm,宽度为925.34 mm,长宽比为1.13,百粒重平均为45.00 g,含水量为2.51%。在光照、温度等因素相同的条件下,种子浸种24 h发芽率最高;在较适宜的浸种时间和温度条件下,种子在光照下培养的发芽率极显著高于在黑暗下培养的发芽率;随着温度的增加,种子发芽率先升后降,25～30℃最适合种子萌发;不同发芽床对牛大力种子发芽率有影响,纸上发芽率(92.00%)和发芽指数(15.78)均最高,且始发芽粒数最多(9粒),发芽所需天数最短(14.67 d)。结论:在双层纸床上,浸种24 h,25℃,光照条件,最适宜牛大力种子的萌发。

广西五种绞股蓝属植物离体快繁与种质保存研究

以绞股蓝属植物的带芽茎段为材料,研究不同6-BA浓度与NAA 0.02mg·L-1组合对其诱导、分化和增殖的影响,并建立离体快繁体系。结果表明:MS+6-BA 2.0mg·L-1+NAA 0.02mg·L-1最适宜初代诱导,MS+6-BA 2.0mg·L-1+NAA 0.02mg·L-1最适合扁果绞股蓝的增殖培养,而MS+6-BA 1.5mg·L-1+NAA0.02mg·L-1是其它四种植物增殖的最佳培养基,在1/2MS+NAA 1.0mg·L-1上的生根率均达100%。1/2MS与蔗糖40g·L-1对五种植物的保存效果均最好;添加生长抑制剂能有效减缓生长速度,最佳生长抑制剂为ABA和CCC,浓度均为1.0mg·L-1,其中CCC能适合多个物种,连续保存360d的存活率均在94.5%以上;PP333不适合五种植物的保存。活力检测表明,各种质经保存后增殖、生根能力均未下降。

广西肿节风药材有效成分含量与土壤因子关系研究

研究测定了广西区内18个肿节风主要分布区的土壤因子中化学性状和矿质元素含量与相应肿节风药材中的有效成分含量,并对之进行相关性分析,探讨了土壤因子对肿节风有效成分的影响,筛选出主导因子。结果显示,异嗪皮啶与有机质呈极显著正相关,与速效磷和速效钾呈显著正相关;迷迭香酸与速效磷呈显著正相关,速效氮、Ca对异嗪皮啶和迷迭香酸均呈显著负相关。研究表明土壤中丰富的有机质、速效磷和速效钾供应有利于提高药材中的有效成分含量。

滇桂艾纳香组培快繁技术体系的研究

目的:探索滇桂艾纳香组培快繁技术体系的最佳培养条件。方法:以滇桂艾纳香的嫩茎段为外植体,采用正交试验设计方法优化增殖培养基,建立组培快繁体系。结果:0.1%Hg Cl2溶液灭菌10 min效果最佳;茎段丛生芽诱导培养基以MS+6-BA 2.0 mg/L+KT 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L最佳,诱导率达90%;6-BA是影响增殖的主要因素,达显著水平,NAA与KT效应不显著;芽增殖的最适培养基为MS+6-BA 2.5 mg/L+KT 1.5 mg/L+NAA0.2 mg/L,增殖系数为7.12;生根培养基用1/2MS+NAA 0.5 mg/L最好,生根率100%,移栽成活率93.33%。结论:该试验得到的组培快繁技术体系可在短时间内提供大量种苗,并为规模化生产种苗提供技术指导。

山绿茶种子萌发特性研究

目的:研究山绿茶种子萌发特性,找到种子萌发的最佳条件,为山绿茶规范化、规模化种植提供种苗繁育途径和方法。方法:测定山绿茶种子形态、千粒重和含水量,研究在不同浸种时间、不同光照、不同温度条件下的发芽率,并进一步比较它们之间的相关性,同时比较不同贮藏时间下的发芽率、发芽指数、始发芽粒数和发芽天数的差异。结果:山绿茶种子平均长度为2.84 mm,宽度为1.11 mm,长宽比为2.50,千粒重平均为0.716 9 g,平均含水量为12.36%。在光照、温度等因素相同的条件下,种子浸种24 h发芽率最高;在较适宜的浸种时间和温度条件下,种子在光照下培养的发芽率极显著高于在黑暗下培养的发芽率;随着温度的增加,种子发芽率先升后降,30℃最适合种子萌发;不同的贮藏时间对山绿茶种子发芽率、发芽指数、始发芽粒数和发芽天数均有影响,4℃低温贮藏3个月的发芽率(96.33%)和发芽指数(13.78)均最高,且始发芽粒数最多(24粒),发芽所需天数最短(28 d)。结论:低温贮藏3个月,浸种24 h,30℃,光照条件,最适宜山绿茶种子的萌发。

广西大明山地区山绿茶种质资源及开发利用现状调查

目的掌握广西大明山地区的山绿茶种质资源分布情况及开发利用状况。方法采用实地踏查、标本采集、文献资料查阅与当地向导咨询相结合的方法对广西大明山地区山绿茶种质资源的地理分布及生境条件、生物学特性、群落特征及伴生植物、开发利用现状等进行调查研究。结果山绿茶喜生长于海拔600~800 m、坡度20°~40°、靠近水源、光照适中的黄壤林下或林缘。其基源植物海南冬青与同属几种植物类似,它们的形态特征主要区别在于幼枝的被毛情况和种子背部分核情况。由于生境破坏和不合理采收,大明山地区的山绿茶资源量正在逐年减少,资源短缺十分明显。结论采取各种积极的办法保护山绿茶野生种质资源,以保证山绿茶资源的可持续利用已刻不容缓。

线柱苣苔无菌萌发及快速繁殖研究

为了通过组织培养方法建立线柱苣苔高效再生体系,以线柱苣苔种子为外植体,在MS培养基中添加6-BA与NAA不同浓度激素配比,筛选初代培养、继代增殖与生根培养等各阶段最适的培养基。结果表明,用0.1%HgCl2溶液对线柱苣苔蒴果与种子灭菌10 min可有效抑菌。种子萌发及不定芽诱导的最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。最佳的继代增殖培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,生根培养基为1/2 MS+0.2 mg/L NAA。利用本试验所得出的结果,增殖系数为13.5/20天,可实现线柱苣苔种苗的快速繁殖,为种质资源的保护和可持续利用提供技术指导。

铁炮百合组培中不定芽形成的细胞学观察

以铁炮百合鳞片诱导的无菌苗叶段作外植体,在MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L培养基上诱导不定芽,效果较好。诱导过程中定期取样进行石蜡制片,观察不定芽分化过程中的细胞组织学变化。结果表明,脱分化始于切口周围的细胞;形态发生的主要方式是由愈伤组织分化出不定芽,不定芽通常起源于愈伤组织团从外到内第2～7层细胞的分生细胞团。

牛大力毛状根生长及培养液中碳源、氮源与磷源利用研究

目的探讨牛大力毛状根的生长曲线研究,研究不同培养基对其生物量积累的影响,以及在其生长过程中对培养液中碳源(蔗糖)、氮源(NH_4^+与NO_3^-)与磷源(PO_4^(3-))的吸收利用情况。方法在1/2 MS培养基中,每5 d取样称量鲜重与干重考察毛状根的生长曲线。使用5种培养基(MS、1/2MS、1/4 MS、B_5、WPM)培养毛状根,30 d后统计生物量。利用离子色谱分析方法检测培养液中蔗糖、NH_4^+、NO_3^-与PO_4^(3-)含量。结果毛状根的生长表现为"慢-快-慢"的趋势,呈"S"型曲线,生长30d进入稳定期。不同培养基对牛大力毛状根生物量的积累具有显著差异,1/2 MS培养基的营养成分及比例最有利于毛状根生物量的积累。在毛状根生长过程中,1/2 MS培养基中的碳源、氮源与磷源均被毛状根充分吸收利用,呈"快-慢"或"慢-快-慢"规律。当毛状根进入稳定期时,蔗糖、NO_3^-与PO_4^(3-)均被全部消耗殆尽,仅检测到少量的葡萄糖、果糖与NH_4^+。结论牛大力毛状根的生长周期为30 d,在1/2 MS培养基中最有利于生物量积累,能充分吸收代谢培养液中的蔗糖、氮源与磷源等营养成分。

不同脱水条件对草珊瑚种子萌发及生理指标的影响

[目的]对不同时间梯度脱水条件下的草珊瑚种子进行萌发试验及生理生化指标测定。[方法]用硅胶脱水(快速脱水)和30℃恒温培养箱脱水(慢速脱水)2种方法获取不同含水量的草珊瑚种子。对不同含水量种子进行萌发测试,并采用紫外分光光度法对种子中各项理化指标进行测定,综合判断种子的脱水耐性及其生理基础。[结果]随着脱水时间的延长,草珊瑚种子含水量呈逐渐下降趋势。在慢速脱水24 h条件下,草珊瑚种子平均含水量为5.28%,导致种子丧失萌发能力。而快速脱水8 h的草珊瑚种子含水量已低于10%,其萌发率仅为16.67%,亦较大程度地丧失萌发能力,因此慢速脱水24 h和快速脱水8 h可作为草珊瑚种子脱水的最终梯度。快速脱水的草珊瑚种子比慢速脱水具有更高的萌发率。当种子含水量接近且低于10%时,快速脱水种子中的过氧化氢酶(CAT)活性比慢速脱水高,而过氧化氢(H 2O 2)含量和超氧阴离子含量比慢速脱水低。脯氨酸含量在慢速脱水条件下并未发现增加趋势,但快速脱水后期(24 h)显著增加。慢速脱水后期(4~24 h)种子可溶性糖含量增加,而快速脱水期间可溶性糖含量基本保持不变。在快速脱水16 h、慢速脱水24 h的淀粉含量均增加,但当种子含水量接近且低于10%时,快速脱水种子的淀粉含量比慢速脱水低。草珊瑚种子内β淀粉酶活性高于α淀粉酶。[结论]该研究为草珊瑚种子萌发条件和萌发机理提供一定的参考依据。

罗汉果花芽分化过程中形态及其激素水平变化特征

采用石蜡切片和酶联免疫法（ELISA）对罗汉果雄性、雌性、两性花芽分化过程的形态和激素水平变化进行观测,为罗汉果开花调控和品种选育提供科学依据。结果表明：（1）罗汉果雄性、雌性、两性花的花芽分化过程均可分为花芽未分化期、花芽分化初期、花序分化期、萼片原基分化期、花瓣原基分化期、雄蕊原基分化期和雌蕊原基分化期7个阶段。雄蕊原基分化期前,3种花芽分化过程无明显差异,各时期形态特征均依次为：茎端呈圆锥状（花芽未分化期）→茎端经半球形变成扁平状（花芽分化初期）→距茎端5~7节位处分化出穗状花序（花序分化期）→小花原基周围形成5个萼片原基（萼片原基分化期）→萼片原基内侧形成5个花瓣原基（花瓣原基分化期）。雄蕊和雌蕊原基分化期,3种花芽分化过程存在明显差异,雄蕊原基内侧出现雌蕊原基后,雄花芽雄蕊原基继续发育成雄蕊,雌蕊原基停滞生长,退为一个小突起;雌花芽雌蕊原基继续发育成雌蕊,雄蕊原基生长缓慢,退化为小花丝;两性花芽雌蕊和雄蕊原基均继续发育,形成外观正常的雌蕊和雄蕊。（2）内源激素脱落酸（ABA）、赤霉素（GAs）和玉米素核苷（ZR）含量在3种花芽分化过程中变化规律相似,即ABA含量在花芽生理分化期降低,花芽形态分化期升高,而GAs和ZR含量则基本保持不变;吲哚乙酸（IAA）含量在3种花芽分化过程中变化存在明显差异,雌花芽IAA含量在花芽生理分化期升高,花芽形态分化期逐渐降低,而雄性和两性花芽的IAA含量则基本保持不变。ABA/GAs、ABA/IAA、ZR/IAA和ZR/GAs激素含量比值在3种花芽分化过程中变化规律相似,ABA/GAs在花芽生理分化期降低,花芽形态分化期升高,而BA/IAA、ZR/IAA和ZR/GAs则基本保持不变。研究认为,罗汉果花芽分化过程经历一个＂两性期＂,高ABA含量和ABA/GAs比值有利于罗汉果花芽分化,IAA可能对罗汉果花性分化具有重要作用。

多效唑对珐菲亚的叶绿素含量、抗逆性及活性成分的影响

用四种不同浓度的多效唑(PP_(333))对引种药用植物珐菲亚进行叶面喷施,研究PP_(333)对珐菲亚的生物学效应。结果表明:各处理均有明显提高珐菲亚叶片叶绿素含量,增强超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)的活性,降低丙二醛(MDA)含量,增加药材产量的作用,而对活性成分皂苷含量影响不明显。该研究为PP_(333)在珐菲亚化学调控上的应用提供理论依据。