小分子阿胶抗疲劳、抗氧化及止血作用研究

目的探讨小分子阿胶的抗疲劳、抗氧化及止血作用。方法建立大鼠复合血虚模型,检测游泳力竭时间、血液学指标及血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(maleic dialdehyde,MDA)、脂质过氧化物(lipid peroxide,LPO)水平,考察小分子阿胶的抗疲劳、抗氧化作用。测定ICR小鼠出血时间(bleeding time,BT)、凝血时间(clotting time,CT)。建立大鼠血热出血模型和肝素化出血模型,考察小分子阿胶在止血方面的作用及可能的机制。结果与模型组比较,小分子阿胶各剂量均明显延长大鼠游泳力竭时间(P<0.05,P<0.01),明显降低血清MDA、LPO含量(P<0.05,P<0.01);小分子阿胶1.500、0.375 g·kg^(-1)明显升高大鼠血中淋巴细胞数量(P<0.05);3.00、1.50 g·kg^(-1)明显缩短小鼠BT和CT(P<0.05);1.500 g·kg^(-1)逆转延长的凝血酶原时间(P<0.05,P<0.01),逆转血细胞的不良改变。结论小分子阿胶具有抗疲劳、抗氧化、增强耐力的作用,并有止血的功效。

多柔比星、二甲双胍对干细胞心肌样分化的代谢组分研究

目的结合代谢组学技术和胚胎干细胞心肌定向诱导分化方法,对多柔比星和二甲双胍造成代谢组分的变化进行研究。方法以小鼠胚胎干细胞体外心肌定向诱导分化为模型,分化培养液中添加不同剂量的多柔比星(3.40、0.17μmol·L^(-1))以及二甲双胍(905.7μmol·L^(-1))。通过对诱导形成拟胚体的一般观察,统计自主节律跳动、拟胚体的数量、频率等;免疫细胞化学法检测心肌特异性蛋白—心肌肌钙蛋白T(cTnT)的表达;应用代谢组学技术初步筛选差异代谢图谱,以多柔比星和二甲双胍共同影响的代谢组分为目标,尝试寻找心脏毒性敏感标志物。结果一般观察和免疫细胞化学结果显示,多柔比星高浓度明显抑制向心肌细胞分化,cTnT表达明显增加,低浓度组拟胚体自主节律明显增快,cTnT表达变化不明显;二甲双胍未见明显变化。代谢组学结果显示,多柔比星和二甲双胍可致细胞内同型半胱氨酸(Hcy)、铁卟啉(FeTMPyP)、叶酸、半胱氨酸(Cys)、cAMP等组分明显降低。结论氧化应激在心脏分化发育过程中起重要作用,Hcy、FeTMPyP、Cys等具有成为心脏毒性敏感标志物的潜力。

参柏洗液抗菌、抗炎及皮肤刺激性研究

目的评价参柏洗液抗菌、抗炎活性,并对其皮肤给药的局部刺激性进行研究.方法采用琼脂稀释法测定参柏洗液对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、乙型溶血性链球菌、加德纳菌、表皮葡萄球菌和大肠埃希氏菌产生抑菌作用最大稀释倍数.通过测定角叉菜胶致大鼠足拓肿胀度,考察其抗炎作用.通过家兔完整和破损皮肤局部给药刺激性试验,评价参柏洗液的局部刺激作用.结果①参柏洗液最高稀释640、320、40、320、40、20倍即可分别表现出对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、铜绿假单胞菌、乙型溶血性链球菌、加德纳菌、大肠埃希氏菌的抑制作用.②参柏洗液母液、稀释2、4倍均能够显著抑制大鼠足拓肿胀度.③参柏洗液母液持续给药7 d,成年家兔表现轻到中度刺激,停药5~12 d可恢复,幼龄家兔对于刺激更为耐受,且恢复速度更快.④参柏洗液5倍稀释后持续给药7 d,成年家兔仅出现轻度刺激且2~3 d可恢复用药前状态.稀释5倍后对幼龄家兔无明显刺激性.结论参柏洗液稀释5~10倍即可有效抑制湿疹等皮肤瘙痒性疾病以及外阴、阴道炎等妇科疾病常见病原体生长.参柏洗液亦具有良好的抗炎作用,推断日用1~2次即可满足临床抗炎需求.刺激性较小且可耐受,儿童亦可安全应用.

小分子阿胶对小鼠免疫功能的影响

目的研究小分子阿胶对小鼠免疫功能的调节作用。方法将ICR小鼠随机分为对照组、模型组、生血丸3.00 g/kg组和小分子阿胶3.00、1.50、0.75 g/kg组,ig给药14 d,ip环磷酰胺或氢化可的松建立免疫低下模型,用鸡红细胞诱导小鼠溶血素,测定小鼠血清溶血素水平,观察小分子阿胶对体液免疫的影响;采用二硝基氯苯诱导小鼠耳廓肿胀,检测小鼠耳廓肿胀度,观察小分子阿胶对细胞免疫的影响;利用流式细胞术对小鼠淋巴细胞亚群进行分析,观察小分子阿胶对小鼠淋巴细胞分型的影响。结果与模型组比较,小分子阿胶3.00、1.50、0.75 g/kg显著提高免疫功能低下小鼠血清溶血素含量(P<0.01);3.00、1.50 g/kg显著提高小鼠耳廓肿胀度(P<0.01、0.05);3.00 g/kg显著提高小鼠T淋巴细胞(CD3^+)、辅助性T细胞和迟发超敏性T细胞(CD3^+CD4^+)占淋巴细胞的比例(P<0.01)。结论小分子阿胶能提高小鼠体液免疫和细胞免疫功能,对免疫功能有正向调节作用。

萘普替尼靶向表皮生长因子受体不同突变亚型的抗肿瘤作用研究

目的研究萘普替尼对表皮生长因子受体(EGFR)不同突变亚型荷瘤小鼠肿瘤生长的影响。方法建立野生型EGFR人表皮鳞癌A431、L858R/T790M双突变EGFR非小细胞肺癌H1975、Del19突变型EGFR非小细胞肺癌HCC827及HER2高表达的胃癌N87的裸鼠移植瘤模型,待肿瘤长至100 mm^3左右将小鼠分组,A431荷瘤小鼠分组:对照组、阿法替尼12 mg/kg和萘普替尼3.50、1.75、0.87、0.29 mg/kg;H1975荷瘤小鼠分组:对照组、阿法替尼30 mg/kg和萘普替尼7.00、3.50、1.75 mg/kg;HCC827荷瘤小鼠分组:对照组、阿法替尼12 mg/kg和萘普替尼3.50、1.75、0.87、0.60、0.29 mg/kg;N87荷瘤小鼠分组:对照组、阿法替尼12 mg/kg和萘普替尼7.00、3.50、1.75、0.87、0.29 mg/kg,每组10只动物。分组后即开始ig给药,对照组给予同体积去离子水,A431、H1975、HCC827、N87荷瘤小鼠分别给药14、21、7、14 d。观察相对肿瘤体积(RTV)、肿瘤增殖率及对肿瘤质量的抑制率,在体考察萘普替尼的抗肿瘤作用。结果 A431荷瘤小鼠:与对照组比较,萘普替尼各剂量组RTV均显著减小(P<0.01),肿瘤增殖率分别为26.6%、32.5%、34.8%、42.2%;瘤质量均显著降低(P<0.01),抑瘤率范围在48.3%～73.9%;0.87 mg/kg为起效剂量,3.5 mg/kg剂量与阿法替尼12 mg/kg效果相当,3.5mg/kg组小鼠体质量显著降低(P<0.01)。H1975荷瘤小鼠:与对照组比较,萘普替尼各剂量组RTV均显著降低(P<0.05、0.01),肿瘤增殖率分别为14.5%、38.2%、65.3%;3.5 mg/kg为起效剂量,与阿法替尼30 mg/kg作用相当;7.0、3.5 mg/kg组小鼠体质量显著降低(P<0.05、0.01)。HCC827荷瘤小鼠:与对照组比较,萘普替尼3.50、1.75、0.87、0.60 mg/kg组RTV降低极为显著(P<0.01),肿瘤增殖率均小于40%;瘤质量呈不同程度地降低,抑瘤率范围52.9%～89.7%;0.6 mg/kg为起效剂量,1.75 mg/kg剂量与阿法替尼12 mg/kg作用相当,3.5、1.75 mg/kg组小鼠体质量显著降低(P<0.01)。N87荷瘤小鼠:萘普替尼7.00、3.50、1.75 mg/kg组RTV及瘤质量均显著低于对照组(P<0.05、0.01),且肿瘤增殖率均小于40%,抑瘤率范围54.9%～95.00%;1.75 mg/kg为起效剂量,3.5 mg/kg与阿法替尼12 mg/kg作用相当;7.0、3.5 mg/kg组小鼠体质量显著降低(P<0.01)。结论萘普替尼具有明显的抗肿瘤作用,其中对EGFR野生型或单突变型荷瘤抗肿瘤作用较好。

小鼠H22、S180腹水模型临床检查特征研究

目的建立小鼠腹水瘤模型,研究其临床指标的变化情况,探讨小鼠癌性腹水模型的特征。方法制备小鼠肝癌(H22)、骨肉瘤(S180)腹水瘤模型,观察腹水生长及小鼠的体质量、进食、饮水量、自主活动等一般状态;待腹水生长至第12天,眼眶采血、抽取腹水,应用全自动血液分析仪、生化分析仪、电解质分析仪进行血液学、血清生化、腹水常规、生化及电解质检查;取少量腹水涂片后瑞氏染色镜检;使用试剂盒测定血清及腹水中乳酸(LD)水平。结果小鼠腹水形成率为100%,腹部逐渐膨胀明显,活动变得迟缓,毛发不荣,进食及饮水量均减少;与对照组比较,H22和S180组小鼠于腹水接种第4天起体质量显著升高(P<0.01);血中白细胞(WBC)数量显著升高(P<0.01),红细胞(RBC)、血小板(HGB)呈不同程度的降低;腹水中少见血象细胞;丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、尿素氮(BUN)、乳酸脱氢酶(LDH)、LD水平显著升高,肌酐(CREA)、白蛋白(ALB)、血糖(GLU)水平显著降低(P<0.05、0.01);电解质紊乱。结论 H22、S180小鼠腹水瘤模型多种检测指标异常,且与临床表现基本一致,具有典型的恶性腹水特征。