小麦抗叶锈病Lr35基因同源序列RGA1侧翼序列的扩增与分析

利用小麦抗叶锈病近等基因系材料TcLr35,根据已扩增出的Lr35相关基因组DNA片段RGA1设计3对特异性引物,通过热不对称交错PCR技术获得2个有效扩增片段,将目的片段回收纯化,连接到pGEM-TEasy载体,转化EcoliDH5α感受态细胞中,经EcoRⅠ酶切,验证插入片段,选择合适菌液测序。获得了2条侧翼序列,长度分别为511bp和614bp,与RGA1重叠区分别为293bp和509bp,分别向3'端和5'端延长了208bp和100bp,拼接后序列为915bp。经BLASTn同源性比较与小麦抗叶锈病基因Lr21同源性为93%(score值为674,E值为0.0),与含有Lr10基因的450Kb大片段重叠群同源性为90%(score值为260,E值为7e-66),该研究为克隆Lr35目的基因奠定了基础。

长叶皇冠的组织培养与快速繁殖技术研究

以长叶皇冠短缩茎为外植体进行离体培养,对外植体灭菌方法以及培养基中不同种类和浓度生长调节剂对增殖、生根的影响等进行研究。结果表明:以0.1%的HgCl2为灭菌剂,采用8min+(6～8)min、间歇时间为24h的间歇灭菌法,可获得20%以上的成活无菌外植体;试管苗茎纵切成4份后,接种在1/2MS+6-BA6.0mg·L-1增殖培养基上培养42d,增殖系数可达9.3;在1/2MS+NAA0.2mg·L-1培养基上培养28d后,生根率达100%,平均每株约生根18条;炼苗后移植成活率100%。

蝴蝶兰组织培养与快速繁殖技术研究

以残败花梗为外植体进行组织培养,建立了蝴蝶兰的无菌繁殖体系,研究了培养基中不同种类植物生长调节物质及其浓度比例对休眠芽的萌发、丛生芽的诱导以及试管苗生根的影响,筛选出了最佳培养基组成;研究了活性炭、PVP、温度、暗培养对培养基褐化的影响。结果表明:在1/2 MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+10%香蕉汁+3%蔗糖+0.6%琼脂的培养基上休眠芽的诱导效果最好,诱导率可达87.5%;在1/2 MS+6-BA 6.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+10%香蕉汁+3%蔗糖+0.6%琼脂的培养基上丛生芽的诱导效果最好,增殖系数可达3.15;在1/2 MS+NAA 0.5 mg/L+活性炭1 000 mg/L+3%蔗糖+0.6%琼脂的培养基上生根效果最好,生根率可达95%,平均每株生根3.11条左右,炼苗后移植成活率可达90%。

彩叶草组织培养与快速繁殖技术研究

以彩叶草节段为外植体进行离体培养,对外植体灭菌方法以及培养基中不同种类外源激素的浓度对试管苗增殖、生根的影响等进行了研究。结果表明:以0.1%HgCl2灭菌8 min,无菌外植体成活率可以达到70%;在MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.20 mg/L的增殖培养基上培养30 d,试管苗的增殖系数可达8.8;在1/2MS+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.5 mg/L的生根培养基上培养21 d后,生根率为100.0%,生根5.6条/株;炼苗后移植成活率达95%。