血红素加氧酶-1基因转染对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察腺病毒介导的血红素加氧酶-1基因(rHO-1)转染后,HO-1在大鼠心肌的表达及其对缺血再灌注损伤心肌的保护作用。方法:雄性SD大鼠随机分为4组:假手术对照组(SH)、生理盐水组(NS)、空载体组(Ad)和Ad-HO-1转染组(HO),各组12只。后3组分别于心尖部分别注射1ml生理盐水、含空载体腺病毒(5.0×109PFU)和重组HO-1腺病毒50μl(7.5×109PFU)。在基因转染3d后,采用左冠状动脉前降支结扎开放建立心肌缺血再灌注模型。每组大鼠测定心功能后取心腔内血,做心肌酶检测,处死大鼠并取左心室标本,测定左心室心肌梗死面积,于荧光显微镜下观察心肌组织荧光蛋白的表达情况,RT-PCR、Western blot检测心肌组织HO-1mRNA、蛋白的表达。结果:HO组中HO-1表达量明显高于Ad组和NS组,Ad和HO组左室心肌均见有荧光蛋白表达,其转染率为(55.5±3.5)%。各时相点HO组的SBP、DBP、MAP、+dp/dtmax和-dp/dtmax等指标恢复率均显著高于Ad组和NS组(P<0.01)。与SH组比较,NS组、Ad组血清LDH和CK-MB水平、梗死心肌重量、心肌梗死面积升高(P<0.01)。与NS组或Ad组比较,HO组血清LDH和CK-MB水平、梗死心肌重量、心肌梗死面积减少(P<0.01)。结论:腺病毒携带的HO-1基因能有效的转染心肌组织,并在体内稳定表达;HO-1基因转染对缺血再灌注的心肌有明显的保护作用。

阿托伐他汀治疗支架植入术后高原冠心病患者的临床观察

目的观察高剂量阿托伐他汀治疗高原冠心病(CAD)患者行冠状动脉支架植入术后的疗效及安全性。方法将75例在高原世居的CAD患者按就诊顺序以1∶1的比例分为阿托伐他汀低剂量组(n=37)和高剂量组(n=38),两组患者分别接受每晚20 mg和40 mg的阿托伐他汀口服治疗,其余基础治疗相同。观察1年内心血管事件、支架内再狭窄、肌酶异常和横纹肌溶解的发生率。结果低剂量组1年内心血管事件的发生率为21.6%,高剂量组为5.3%,两组间有显著差异(χ2=4.34,P<0.05);低剂量组1年时支架内再狭窄的发生率为18.9%,高剂量组为2.6%,两组间有显著差异(χ2=5.22,P<0.05);两组患者均未观察到肌酶升高和横纹肌溶解。结论高剂量阿托伐他汀可降低高原CAD患者行冠状动脉支架植入术后心血管事件和再狭窄的发生率,且不增加肌酶异常和横纹肌溶解的发生率。

高原青年冠心病患者血脂特点及其与冠脉病变程度的关系

目的探讨高原青年冠心病(CAD)患者的血脂特点及其对冠状动脉病变的影响。方法纳入25例高原青年CAD患者和15例平原青年CAD患者,检测血脂水平,对冠状动脉造影结果进行分析和Gensini评分。结果与平原青年CAD患者比较,高原青年CAD患者血浆甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平显著升高(P<0.01或P<0.05),而高密度脂蛋白水平(HDL-C)显著降低(P<0.05)。在高原青年CAD患者中,血浆TG水平与冠脉Gensini评分呈正相关(r=0.66,95%CI:0.37～0.84,P<0.05),而血浆TC、LDL-C和HDL-C与冠脉Gensini评分无显著相关性(P>0.05)。结论高原青年CAD患者血脂异常更加严重,且血浆TG水平与冠状动脉病变程度相关。

新生SD大鼠心肌细胞分离培养的快速简单方法及鉴定

目的:探讨心肌组织块体外原代培养新生大鼠心肌细胞的方法。方法:将剪成1mm3左右小块心肌组织,采用体外贴块种植原代培养新生大鼠心肌细胞。结果:成功地培养出原代心肌细胞,并能够传代;倒置相差显微镜下证实培养的细胞为心肌细胞,免疫组化染色鉴定为心肌细胞特异性蛋白cTnT表达阳性,同时具有心肌细胞节律收缩特性。结论:心肌组织块体外原代培养操作简单,可以获得较多单个心肌细胞,所获得的细胞具有良好的功能状态。

携带人血红素氧合酶-1基因重组腺病毒的构建及鉴定

目的:构建人血红素氧合酶-1(hHO-1)重组腺病毒,为基因治疗心肌细胞缺氧性损伤提供可能。方法:将hHO-1 cDNA克隆于腺病毒穿梭质粒pSGCMV,得到重组质粒pSGCMV-hHO-1。采用位点特异性重组系统(Cre/Loxp)将pSGCMV-hHO-1与腺病毒骨架载体pBHGloxP△ E3通过Lipofectamine 2000共转染至293细胞,生成带有hHO-1基因的重组腺病毒载体Ad-hHO-1。重组腺病毒质粒在293细胞中扩增,氯化铯梯度离心纯化。结果:经酶切鉴定和测序证实载体构建的正确性,病毒滴度为2.0×1010pfu/ml。结论:成功构建带有hHO-1 cDNA的重组腺病毒,可用于对心肌细胞缺氧性损伤的基因治疗研究。

上调HIF-1对球囊损伤后大鼠颈动脉舒张反应的影响

目的探讨上调缺氧诱导因子-1(HIF-1)对大鼠球囊损伤后颈动脉舒张反应的影响。方法 30只雄性健康Sprague Dawley大鼠随机分为假手术组、模型组和L-Mim组。模型组和L-Mim组均采用1.5F球囊导管建立颈动脉球囊损伤模型,于术后第1 d开始,L-Mim组给予含羞草素100 mg/(kg.d)灌胃,假手术组和模型组给予等量生理盐水代替。干预14 d后,取颈动脉损伤段,检测乙酰胆碱和硝酸甘油诱导的血管舒张反应。结果与假手术组比较,模型组血管对乙酰胆碱的舒张反应显著受损,最大舒张反应显著降低(P<0.01),而L-Mim组最大舒张反应较模型组显著增加(P<0.01)。3组血管对硝酸甘油的舒张反应无显著差异。结论采用L-Mim上调HIF-1可部分对抗球囊损伤对血管内皮功能的损害。

缬沙坦与苯那普利对腹主动脉缩窄兔左室重塑影响的实验研究

目的:探讨缬沙坦与苯那普利对腹主动脉缩窄兔左室重塑的影响.方法:以新西兰雄性大耳白兔60只,随机分为六组,每组10只;按Doering等方法行肾动脉上方腹主动脉部分结扎.苯拉普利组、缬沙坦组和联合组兔于术后2周开始给药,将药品溶于蒸镏水中,以灌胃法喂兔,持续6周;假手术组、手术对照组和正常组则以均等体积的蒸镏水灌胃,标准饲养方法喂养.结果:发现手术对照组(AB-C)颈内动脉压高于假手术组(S)、苯那普利组(AB-B)、缬沙坦组(AB-V)和联合组(AB-BV),P＜0.01;AB-C组右室重量指数(LVM1)亦高于S组、AB-B组、ABV组和AB-BV组,P＜0.05;AB-C组CVF及Ⅰ、Ⅲ型CVF高于S组,P＜0.05;AB-B组CVF及Ⅰ、Ⅲ型CVF明显低于AB-C组,P＜0.01;AB-C组左室含量指数(CVM1)亦高于δ(δ,AB-B组,ABV组和AB-BV组,P＜0.05;AB-V组CVF及Ⅰ、Ⅲ型CVF亦明显低于AB-C组,P＜0.01;AB-BV组与S组相似,P＞0.05.结论:苯那普利和缬沙坦均可显著降低血压、逆转压力负荷增高兔左室肥厚和心肌纤维化,两者无明显差别,但二者半剂量合用时在逆转左室肥厚和心肌纤维化方面效果更明显.

上调缺氧诱导因子-1对大鼠球囊损伤后内膜增生的影响

目的探讨上调缺氧诱导因子-1(HIF-1)对大鼠球囊损伤后内膜增生的影响。方法 30只雄性健康SD大鼠随机分为假手术组、模型组和干预组,模型组和干预组均采用1.5F球囊导管建立颈动脉球囊损伤模型。于术后第1 d开始,干预组给予含羞草素(L-Mim)100 mg/(kg.d)灌胃,假手术组和模型组给予等量生理盐水灌胃。干预14 d后取损伤血管段,测定内膜增生情况,并用Western blotting法检测HIF-1的蛋白表达。结果术后14 d,模型组和干预组均发生明显内膜增生,内膜面积和内膜与中膜面积比均显著高于假手术组(P<0.01),而干预组上述指标均低于模型组(P<0.01)。与模型组比较,干预组损伤血管中HIF-1的蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论采用L-Mim上调HIF-1可显著削弱球囊损伤导致的内膜增生。

反流性食管炎的阶段性治疗

近年来,胃食管反流性疾病(GERD)发病日趋增多。经过24h食管PH监测发现,正常健康者均有胃食管反流(GER)现象,但无任何临床症状,称之为生理性GER。其特点为白天常发作,夜间罕见;餐时或餐后反流较多,其反流总时间每24h少于1h。由于反流物可即刻被清除到胃内,一般并不致病。但是当食管下段括约肌(LES)抵抗GER的屏障功能削弱时,会导致频繁GER,反流物量多且较持久,从而损伤食管下段粘膜,形成反流性食管炎,并能引起食管溃疡和狭窄,这些统称GERD。Sandmark在内镜下把食管炎分为5级:0级,正常食管粘膜;1级,食管粘膜充血,水肿;2级,粘膜点状糜烂;3级,糜烂融合或溃疡形成;4级,食管四周糜烂及形成深部溃疡,狭窄和/或Barret食管形成。目前临床上对GERD的治疗方法很多,但最佳方案是以内镜改变为基础,进行阶段性治疗。

三七总皂苷对心肌缺血再灌注中中性粒细胞核因子-κB活化及其粘附的影响

目的 研究三七总皂苷对心肌缺血 -再灌注时中性粒细胞 (PMN)内核因子 κB(NF κB)活性变化、细胞间粘附分子 (ICAM 1)表达及中性粒细胞粘附的影响。方法 新西兰兔 2 4只分为①缺血 -再灌注组 (I R) :结扎兔左冠状动脉前降支造成心肌缺血 4 5min后再开放 ;②三七总皂苷 (PNS)预处理组 (IR +PNS) :在心肌缺血前 10min静脉注射PNS(10 0mg·kg-1) ;③假手术对照组 (Sham) ;每组又分缺血前(0 )、再灌注后 30、6 0、90、12 0、2 4 0、36 0min时相点。用流式细胞仪检测中性粒细胞ICAM 1的表达 ,凝胶电泳迁移率分析检测NF κB的活性 ,测定中性粒细胞与脐静脉内皮细胞(EC 340 )的粘附率。结果 在缺血 -再灌注组中心肌再灌注 30min后NF κB活性开始增高 ,12 0min达到高峰 ,之后活性下降 ;中性粒细胞ICAM 1的表达在心肌再灌注 12 0min开始增高 ,并与并与中性粒细胞粘附率升高有相关性 ;在三七总皂苷预处理组 ,PNS能抑制NF κB的活化及中性粒细胞ICAM 1的表达和中性粒细胞粘附。结论 心肌缺血 -再灌注时刺激NF κB的活化 ,启动中性粒细胞ICAM 1的表达而参与缺血 -再灌注损伤的发生过程 ;三七总皂苷能抑制中性粒细胞内核因子 κB的活化 。

血管紧张素Ⅱ受体及其拮抗剂的研究进展

血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)是体内产生的强有力升压物质，具有促进醛固酮和儿茶酚胺分泌、刺激血管平滑肌细胞增殖及调节肾脏水铺排泄作用。血管紧张索转换酶抑制剂(ACEI)部分阻断AngⅡ的形成，对高血压、心脏肥大、心力衰竭及糖尿病肾病等疾病产生了显著的治疗效应，但它们也参与缓激肽、脑啡呔和其他生物活性物质的活化，从而导致诸如干咳、气管反应性增高、血管神经性水肿等副作用。随着具有高度选择性而无激动剂活性的非肽类AngⅡ拮抗剂(ATIA)的成功制备，

三七总皂甙对心肌缺血一再灌注损伤的影响

目的:研究心肌缺血—再灌注时中性粒细胞(PMN)核因子—kB(NF—kB)活性、细胞间粘附分子(ICAM—1)表达、中性粒细胞粘附浸润的变化及三七总皂甙的心肌保护作用。方法:新西兰兔124只分为:(1)缺血—再灌注组;(2)三七总皂甙预处理组(PNS预处理组);(3)假手术对照组;每组又分缺血前(0)、再灌注后30、60、90、120、240、360分钟时相点。用流式细胞仪检测中性粒细胞ICAM—1的表达,凝胶电泳迁移率分析检测NF—kB的活性,测定中性粒细胞与脐静脉内皮细胞(EC—340)的粘附率,用髓过氧化酶法(MPO)定量测定心肌组织中浸润的中性粒细胞。结果:在缺血—再灌注组中心肌再灌注30分钟后NF—kB活性开始增高,120分钟达到高峰,之后活性下降;中性粒细胞ICAM—1的表达在心肌再灌注120分钟开始增高,并与中性粒细胞的粘附率升高及心肌浸润增加有相关性;在PNS预处理组,PNS能抑制NF—kB的活化、中性粒细胞ICAM—1的表达和中性粒细胞的粘附及心肌浸润。结论:心肌缺血—再灌注时刺激NF—kB的活化,启动中性粒细胞ICAM—1的表达而参与缺血—再灌注损伤的发生过程:三七总皂甙能抑制中性粒细胞NF—kB的活化,减少细胞间粘附分子表达及中性粒细胞粘附浸润而起到心肌保护的作用。

中性粒细胞在心肌缺血再灌注中ICAM-1表达及核转录调控的实验研究

目的 :研究心肌缺血再灌注时中性粒细胞 (PMN)内核因子 -kB活性变化与中性粒细胞细胞间粘附分子 (ICAM -1)表达及中性粒细胞心肌浸润的关系。方法 :新西兰兔 2 4只分为 :(1)缺血再灌注组 (IR) ,(2 )IR +RDTC组 ,(3)假手术对照组 ,并分缺血前 ,再灌注后 30、 6 0、 90、 12 0、 2 4 0、 36 0min时相点。用流式细胞仪检测PMNsICAM - 1的表达 ,凝胶电泳迁移率分析检测NF -kB的活性 ,酶法测定PMNs浸润数。结果 ,心肌再灌注 30nin后NF kB活性开始增高 ,12 0min达到高峰 ,之后活性下降 ;PMNsICAM - 1的表达在心肌再灌注 12 0min开始增高 ,并与PMNs浸润数升高有相关性 ;PDTC能抑制NF -kB的活化及PMNsICAM - 1的表达和PMNs浸润。结论 :心肌缺血再灌注时刺激NF -kB的活化 ,启动PMNsICAM - 1的表达而参与缺血再灌注损伤的发生过程。

高原冠心病患者冠状动脉支架内再狭窄的危险因素分析

目的探讨高原冠心病患者冠状动脉支架内再狭窄的发生率与相关的危险因素。方法纳入经冠状动脉造影并行冠状动脉内支架植入术的高原冠心病患者387例,随访6～12个月并复查冠状动脉造影,按有无发生支架内再狭窄将患者分为再狭窄组和无狭窄组,总结分析支架内再狭窄发生的危险因素。结果再狭窄组糖尿病的发病率显著高于无狭窄组(P<0.01),术后规律服用阿司匹林肠溶片、氯吡格雷片和他汀类药物的百分比显著低于无狭窄组(P<0.01);再狭窄组和无狭窄组在年龄、性别、吸烟、高血压和高血脂的发病率方面比较,无统计学差异(P>0.05)。术后移居平原居住组的再狭窄率显著低于未移居组(16.1%vs 35.4%,P<0.01)。结论高原冠心病患者冠状动脉支架内再狭窄发生与糖尿病、术后规律服用抗血小板药物和他汀类药物密切相关,术后移居平原可能降低冠状动脉支架内再狭窄的发生率。