LC-MS/MS测定氨苄西林原料及制剂的杂质谱

目的 建立LC-MS/MS法测定并比较氨苄西林/氨苄西林钠原料及制剂的杂质谱。方法 采用ACE C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以10 mmol/L醋酸铵水溶液(用甲酸调节pH值至5.2)-乙腈(98:2, V/V)为流动相A,以10 mmol/L醋酸铵水溶液(用甲酸调节pH值至5.2)-乙腈(50:50, V/V)为流动相B,流速0.3 mL/min,梯度洗脱,柱温30℃,自动进样器6℃;分别以光二极管阵列检测器(PDA)与电喷雾离子化质谱法,采集杂质谱的PDA数据、质谱的母离子及子离子数据,结合杂质的色谱行为,比较氨苄西林/氨苄西林钠原料及制剂的杂质谱。结果 该方法对氨苄西林及其杂质具有良好的分离能力,可以检测19个主要杂质,其中13个已知杂质准分子离子峰与EP杂质对照品一致,推测了6个未知杂质结构。厂家B与厂家C氨苄西林胶囊(均尚未通过一致性评价)杂质谱与日本参比制剂基本一致;厂家D(尚未通过一致性评价)检出杂质谱与厂家E(通过一致性评价)略有差异,厂家E未检出杂质F和杂质14号。结论 建立的LC-MS/MS法能有效地洗脱、分离氨苄西林降解杂质与工艺杂质,并全面分析杂质谱,为氨苄西林/氨苄西林钠制剂一致性评价工艺研究及质量评价提供参考依据。

复方倍他米松注射液粒度及粒度分布测定方法研究

目的建立激光粒度仪测定复方倍他米松注射液中微晶形态的二丙酸倍他米松粒度分布的方法,并评价微粉工艺及灭菌工艺对制剂中二丙酸倍他米松粒度的影响。方法采用Malvern Mastersizer 2000型激光粒度仪,表面活性剂为0.04%(W/W)吐温80,分散剂为水800 m L,遮光度界限为5%~10%,泵转速为2000 r/min,超声能量为12.5,超声时间为120 s,背景测量时间为10 s,背景测量快照为10000,样品测量时间为10 s,样品测量快照为10000。测定灭菌前的微粉化二丙酸倍他米松原料药及灭菌后的复方倍他米松注射液的粒度及其分布。结果微粉工艺中,通过调整气流粉碎工艺参数,可制备出不同粒径的微粉化二丙酸倍他米松,并用于热压灭菌工艺研究;灭菌工艺中,激光粒度仪器系统环形腔喷嘴压力为4~5 bar、文氏管压力为5~6 bar时,自制复方倍他米松注射液样品可获得与原研产品近似的粒度分布。不同粒度微粉化二丙酸倍他米松灭菌后,粒度均有增加。结论灭菌过程会引起二丙酸倍他米松的晶体微小增长,从而导致粒度增加。通过控制灭菌前的微粉化二丙酸倍他米松原料药的粒度,可有效控制灭菌后的二丙酸倍他米松制剂的粒度,从而与原研产品保持质量一致。

山东省诸城市石门顶矿区长石矿矿床地质特征及利用前景

石门顶长石矿区位于诸城市林家村镇,矿区内主要发育有新元古代荣成超单元宝山单元片麻状黑云二长花岗岩,矿床赋存于花岗伟晶岩脉中,由大小不等的10条长石矿脉组成,矿石自然类型为长石花岗伟晶岩,主要由钾长石、钠长石、石英及少量黑云母等矿物组成,矿体围岩为宝山单元片麻状黑云二长花岗岩。该矿是由岩浆作用形成的,其形成经过4个成矿阶段,属弱分异型矿床,其矿石主要用于玻璃、陶瓷、化工、磨料磨具、玻璃纤维、电焊条等行业,开发前景较好。

高效液相色谱法同时测定复方倍他米松注射液两主成分含量

目的建立同时测定复方倍他米松注射液中倍他米松磷酸钠及二丙酸倍他米松含量的高效液相色谱(HPLC)法。方法流动相为甲醇-乙腈-0.01 mol/L磷酸二氢铵(取磷酸二氢铵1.15 g,用水1 000 mL溶解后,加20%四丁基氢氧化铵28 mL,用磷酸调pH至7.0)溶液(34∶30∶36),检测波长为242 nm,柱温为35℃,流速为1.0 mL/min,进样量为10μL。结果倍他米松磷酸钠及二丙酸倍他米松相邻色谱峰之间的分离度大于1.5,质量浓度分别在0.052 6~1.316 0 g/L(r=0.999 9)和0.115 2~2.879 7 g/L(r=1.000 0)范围内与峰面积线性关系良好,平均回收率分别为99.54%和99.78%,RSD分别为0.94%和0.70%(n=9);倍他米松磷酸钠在光照条件下含量急剧下降。结论该方法可同时测定复方倍他米松注射液中倍他米松磷酸钠、二丙酸倍他米松的含量,可用于其质量控制。

热灭活疫苗HID39免疫小鼠可抵抗肺炎链球菌感染

目的研制一种安全、有效且易于生产的肺炎链球菌疫苗,探讨其在BALB/c小鼠中的有效性。方法通过热灭活肺炎链球菌标准菌株D39,得到无毒的、失去感染致病的能力的HID39,用HID39作为疫苗对随机分为阴性对照组(NC)、皮下免疫组(SC)和鼻内免疫组(IN)的小鼠进行免疫,ELISA法检测各组小鼠血清和唾液中的抗体及抗体亚型,并用不同菌株攻毒来评价HID39疫苗的效果。结果 HID39免疫小鼠后,SC组血清中IgG效价高达(12 800±8744),IN组的效价为(4032±1652),而SC组唾液中未检测到IgA,IN组却有(400±197)。抗体亚型以IgG1,IgG2a,IgG2b为主,未检测到IgG3。TIGR4在小鼠鼻内、肺和脑的定植显著下降,其中鼻内免疫的定植量最少。HID39鼻内免疫和皮下免疫都可显著提高致死剂量肺炎链球菌D39、血清型3和6B型感染小鼠的生存率,其中鼻内免疫的小鼠生存率均可达50%,抗血清的被动保护的生存率在50%以上。结论 HID39是一种较成功的肺炎链球菌疫苗,用它免疫小鼠可抵抗肺炎链球菌的感染。

阿莫西林/克拉维酸钾干混悬剂有关物质测定方法的比较研究

目的比较不同标准中阿莫西林/克拉维酸钾干混悬剂有关物质的测定方法。方法采用2015年版《中国药典》(以下简称Ch P 2015)、2014版《英国药典》(以下简称BP2014)、同品种进口注册标准(JX20040226)所收载的阿莫西林/克拉维酸钾干混悬剂质量标准中有关物质的方法,分别测定其有关物质,对色谱行为、已知杂质系统适用性、有关物质测定结果等进行比较。结果阿莫西林/克拉维酸钾干混悬剂有关物质的测定方法存在较大差异,BP2014中有关物质的色谱条件对阿莫西林/克拉维酸钾杂质的分离效能更好。结论建议在以后的标准制定中利用系统适用性中各杂质的色谱信息,参照BP2014色谱条件,提高本品有关物质的测定方法。

阿莫西林胶囊溶出度测定方法研究

目的考察紫外-可见分光光度(UV-Vis)法与高效液相色谱(HPLC)法测定阿莫西林胶囊溶出度的差异。方法 UV-Vis法测定波长为272 nm;HPLC法色谱柱为Inertsil ODS C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(用2 mol/L氢氧化钾溶液调节pH至5.0)-乙腈(97.5∶2.5,V/V),检测波长为254 nm,进样量为20μL,流速为1.0 m L/min。分别以水、pH 1.2的盐酸氯化钠溶液、pH 4.0的醋酸盐缓冲液、pH 6.8的磷酸盐缓冲液为溶出介质,采用篮法(转速为100 r/min)测定原研产品(参比制剂)的体外溶出量。结果测定参比制剂在以上4种溶出介质中120 min时的溶出度,UV-Vis法分别为109.53%,115.64%,110.02%,114.72%,HPLC法分别为102.54%,77.11%,101.09%,102.24%。结论 HPLC法简单、准确,可用于阿莫西林胶囊溶出度的定量测定,且消除了空胶囊壳的干扰,更能真实地反映产品在溶出介质中的溶出度,可用于阿莫西林胶囊的一致性评价。

曲安奈德益康唑乳膏处方及微观结构特性评价的比较研究

目的为曲安奈德益康唑乳膏一致性评价参比制剂(reference listed drug,RLD)的选择及质量等同性评价提供依据。方法采用逆向工程解析不同产地上市的原研产品、地产化产品派瑞松®和国产仿制药产品邦力®处方,比较处方(Q_(1))和关键功能性辅料的处方用量(Q_(2))的差异;并采用光学显微镜和冷镜露点法考察微观结构特性(Q_(3))差异。结果地产化产品派瑞松®与法国上市产品Pevisone®Q_(1)相同但Q_(2)不同;国产仿制药产品邦力®与地产化产品派瑞松®Q_(1)、Q_(2)及Q_(3)均不一致,两者产品Q_(3)的差异可能是由于Q_(1)和Q_(2)不同引起的。结论地产化产品派瑞松®不适宜作为本品一致性评价的RLD,建议国内生产企业选择Pevisone®为RLD,实现与参比制剂的Q_(1)、Q_(2)及Q_(3)一致,从而豁免生物等效性研究。

高效液相色谱法测定盐酸黄酮哌酯原料和制剂中有关物质

目的建立测定盐酸黄酮哌酯原料及制剂中有关物质的高效液相色谱(HPLC)法,考察6个厂家产品的真实杂质水平。方法色谱柱采用Phenomenex Luna C_18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为缓冲液(取1 g己烷磺酸钠,加水适量使溶解,加三乙胺1 mL和磷酸1 mL,加水稀释至650 mL,摇匀)-乙腈(65∶35),梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为293 nm,柱温为30℃。结果盐酸黄酮哌酯、杂质A、杂质B、杂质C、杂质D依次出峰,各峰间分离度均大于1.5;杂质A,B,C,D及盐酸黄酮哌酯质量浓度分别在0.292 2~5.844 0,0.306 3~6.126 0,0.308 7~6.173 8,0.321 2~6.423 2,0.108 1~2.162 0μg/m L范围内与峰面积线性关系良好;杂质A,B,C,D平均回收率分别为98.92%,99.11%,100.04%,99.48%,RSD分别为0.62%,1.34%,1.02%,1.43%(n=6),校正因子分别为1.5,1.4,1.3,1.2。结论该方法灵敏度高,分离效果好,能同时测定盐酸黄酮哌酯中几种工艺杂质和降解杂质。

盐酸氨基葡萄糖原料及制剂的药学影响因素研究

目的考察盐酸氨基葡萄糖原料及不同剂型的影响因素,为处方工艺研究及质量控制提供依据。方法样品经过破坏试验和高温、高湿处理后,用反相高效液相色谱法测定有关物质。通过考察盐酸氨基葡萄糖的有关物质变化,作为影响因素的评价指标。结果盐酸氨基葡萄糖原料比较稳定。在高温高湿条件下,原料与硬脂酸镁和羧甲基淀粉钠辅料分别发生了相容性反应,产生杂质2,5-脱氧果糖嗪或果糖嗪。在高温及高湿条件下,盐酸氨基葡萄糖片剂A厂和颗粒剂D厂有关物质均增加明显,A厂总杂质分别为9.95%和9.22%(未破坏总杂质为5.20%),D厂总杂质分别为8.74%和7.92%(未破坏总杂质为2.82%)。结论盐酸氨基葡萄糖制剂中处方工艺的差异可能是影响有关物质出现较大差异的重要因素。

高效液相色谱法检测环索奈德鼻喷雾剂的防腐剂

目的建立同时测定环索奈德鼻喷雾剂中防腐剂山梨酸钾和依地酸二钠含量的高效液相色谱(HPLC)法。方法色谱柱为InertsilODS-3 C18柱(250 mm×4. 6 mm,5μm),流动相为乙腈-0. 02 mol/L硼砂溶液(10∶90),流速为1. 0 m L/min,检测波长为288 nm,柱温为30℃。结果依地酸二钠和山梨酸钾色谱峰之间的分离度大于1. 5,依地酸二钠及山梨酸钾质量浓度分别在3. 209 6～12. 838 4μg/m L(r=0. 999 9),38. 46～153. 82μg/m L(r=0. 999 8)范围内与峰面积线性关系良好,平均回收率分别为99. 84%和96. 96%,RSD分别为0. 96%和2. 17%(n=9);山梨酸钾在光照条件下含量下降。结论该方法可用于环索奈德鼻喷雾剂中防腐剂的质量控制。

一种溶菌酶样蛋白对肺炎链球菌毒力及荚膜多糖合成的影响

【目的】为了研究肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)的一种假想的溶菌酶样蛋白在细菌生物学性状及其致病中的作用。【方法】利用长臂同源PCR对该基因进行敲出,并同时构建带有拯救质粒的缺失菌株,观察D39野生菌、缺失菌与带有拯救质粒的缺失菌株在相关生物学性状及其致病力改变,从而鉴定这种假想溶菌酶样蛋白的功能。【结果】缺失菌与野生菌相比,细菌生长减缓,毒力下降,荚膜多糖合成明显减少。而将拯救质粒转入缺失菌株后,该溶菌酶样蛋白的mRNA表达水平较野生菌高,其毒力及荚膜合成较缺失菌显著增高,但未达到野生菌水平。【结论】这种溶菌酶样蛋白是肺炎链球菌的一种新毒力因子,可能通过参与调控肺炎链球菌增殖及荚膜多糖的表达而影响毒力。