黄海黄杆菌YS-9412-130低温碱性蛋白酶的制备工艺研究

对黄海黄杆菌所产低温碱性蛋白酶的工业生产技术和电泳纯级试剂酶的分离纯化工艺进行了实验。按照设计的中试生产技术 ,每吨发酵液可得酶粉 2 0 kg,粗酶比活大于 2 0× 10 4 U/ g;同时运用一系列纯化手段和条件 ,制备出电泳纯级试剂酶 ,纯化过程蛋白回收率在 7%左右 ,活性回收率在60 %以上 ,比活性也稳定在 1.9× 10 3U/ mg以上 ,激光灰度扫描结果试剂酶纯度大于 99% ,可以作为试剂酶满足进一步生物学研究和实际应用。其产品质量和制造工艺均达到了中试放大规模的要求。

黄海黄杆菌YS-9412-130产酶发酵条件的优化

以产低温碱性蛋白酶的黄海黄杆菌 YS- 94 12 - 130突变株 SW2 - 10 4为培养菌株 ,进行碳源、氮源、无机盐、起始 p H值、培养时间、接种量和接种龄等发酵条件的优化实验。实验结果证明 ,在以1%葡萄糖为碳源 ,以 3.5%豆饼粉为氮源 ,无机盐 :0 .4 % Na2 HPO4 、0 .0 3% KH2 P0 4 、0 .0 2 % Mg SO4 、0 .1% Na2 CO3、0 .2 % Ca Cl2 ,起始 p H值 7.0 ,接种 12 h种龄的种子 4 % ,2 0℃、2 50 r/ min的条件下在旋转摇床中培养 36h,菌株产酶活性最高。