新时代“大思政课”建设的内在逻辑和实践进路

思想政治理论课是落实立德树人的根本任务关键课程,“大思政课”理念的提出是新时代思政课建设守正创新的内在要求。新时代“大思政课”建设需要厘清其内在逻辑,掌握“思政小课堂”与“大思政课”的辩证关系。而“大思政课”建设中存在的教学内容拓展性有待增强、教学效果有待提升、课程群建设有待加强等现实问题需要通过优化教学内容、创新教学方法、建强思政课课程群、加强基地平台建设把思政小课堂和社会大课堂真正结合起来,更好地发挥“大思政课”铸魂育人的关键作用。

放线菌分类学研究进展

放线菌分类学研究进展姜成林（云南大学，云南省微生物研究所，昆明６５００９１）伯杰手册是世界公认的细菌（包括放线菌）分类鉴定的权威著作。１９８９年出版了《伯杰系统细菌学手册》第４卷［１］。这一卷全是放线菌，由英国著名放线菌学家Ｗｉｌｌｉａｍｓ主编。与１...

微波法快速提取放线菌基因组DNA

原有的放线菌基因组DNA提取方法费时、费力、费用高 ,且对极端环境放线菌成功率较低。利用微波热振惊提取固体培养基表面放线菌菌落基因组DNA ,具有快速、简便、费用低廉等优点。所得的基因组DNA可作为PCR反应的模板进行 1 6SrRNA基因有效扩增。

具抗肿瘤活性放线菌菌株YIM 90022的分离和系统发育分析

从青海盐碱土壤样品中分离到一株兼性嗜碱放线菌YIM 90022，该菌株的发酵产物具有很强的体外抗胃癌、肺癌、乳腺癌、皮肤癌、肾癌和子宫癌肿瘤细胞株活性。基于16S rRNA基因序列的系统发育分析表明，菌株YIM 90022属于拟诺卡氏属（Nocardiopsis）的成员，与该属的4个有效发表种N．exhalans DSM 44407^T，N．prasina DSM 43845^T，N．metallicus DSM 44598^T和N．listeri DSM 40297^T系统发育关系最密切，与其分别以98．8％，98．5％，98．4％和97．8％的16S rRNA基因核苷酸序列相似性聚为一簇。但菌株YIM 90022不与这4个有效种中任何一个单独相聚，形成了一个独立亚分枝。结合形态特征、生理生化特性、细胞化学分类特征，以及rep-PCR基因指纹分析等方面的研究结果，菌株YIM 90022可能为拟诺卡氏菌属的一个潜在新种。菌株YIM 90022在大多数培养基上生长良好，气生菌丝和基内菌丝丰富，在酵母膏麦芽膏琼脂、燕麦片琼脂等培养基中产生可溶性色素。生长pH范围6．0．12．0，最适pH8．5；能在含0—15％NaCl（W／V）的培养基上生长。

产生大环聚酮类天然产物放线菌的分子筛选研究

目的 建立一套简便、快速、高效的大环聚酮类化合物产生菌基因筛选体系 ,为聚酮类药物筛选搭建一个新的技术平台 ;认识 PKS- I基因在不同环境放线菌群中的分布规律 ,为新药筛选中微生物资源的定向分离提供依据。方法 通过对大环聚酮类化合物生物合成途径所用的 I型聚酮合成酶氨基酸和核苷酸序列的同源性比较分析 ,设计了一对引物用于扩增 KS/ AT功能域约 1.6 kb目的基因片段 ,依据放线菌基因组中 I型 PKS合成酶基因的存在与否标定可能的大环聚酮类天然产物产生菌。结果 利用建立的大环聚酮类化合物产生菌基因筛选体系对 98株嗜碱放线菌、99株链霉菌、46株嗜盐放线菌和 75 7株稀有放线菌进行了筛选 ,研究表明嗜碱放线菌、链霉菌、嗜盐放线菌和稀有放线菌 I型聚酮合成酶基因的阳性率分别为 2 6 .5 %、2 0 .4%、15 .2 %和 9.35 %。结论 利用组合放线菌基因组 DNA快速提取技术和 PKS- I基因兼并引物 PCR扩增技术建立了快速、简便、高效的大环聚酮类化合物产生菌基因筛选体系 ,并对不同环境条件的放线菌菌群的PKS- I基因分布进行了研究 ,结果不仅表明了放线菌 PKS I聚酮合成酶分布的广泛性 ,而且表明极端环境放线菌 ,尤其是嗜碱放线菌是大环聚酮类化合物潜在的丰富资源 ,为新药筛选有效菌源的确定提供了?

新疆青海中度嗜盐放线菌生物多样性初步研究

从我国新疆、青海等地采集数份盐碱土样或泥样 ,采用淀粉 -酪素琼脂培养基、甘油天门冬酰胺琼脂培养基、土壤浸汁琼脂培养基分别从中分离到 8株、32株中度嗜盐放线菌菌株。经形态、生理学特性与全细胞壁氨基酸组分分析结果比较 ,选取其中的 1 4株进行 1 6SrDNA序列分析。就物种多样性而言 ,新疆、青海分离到中度嗜盐放线菌分布至少有 3个科 ,5个属。其中有拟诺卡氏菌科 (Nocardiopsaceae)的拟诺卡氏菌属 (Nocardiopsis)和链单孢菌属 (Streptomonospora) ;假诺卡氏菌科 (Pseudonocardiaceae)的普氏菌属 (Prauserella)和糖单孢菌属 (Saccharomonospora) ;链霉菌科 (Streptomycetaceae)的链霉菌属 (Streptomyces)。就地区分布来讲 。

应用DGGE法对青海相邻两盐湖中细菌多样性的快速检测

分别对青海相邻两盐湖柯柯盐湖、茶卡盐湖土样、泥样进行富集培养后 ,从中提取的DNA用两套不同的细菌通用引物进行扩增 ,分别得到包含V8和V9高变区的 16SrDNA片断。经变性梯度凝胶电泳 (DGGE)分析 ,结果显示这两个盐湖富集样品中细菌多样性具有较大的差异 ,而且同一盐湖不同性质样品中的细菌多样性差异也较大 ,两湖的泥样富集样品中均表现出了稍丰富的多样性。

青海盐碱环境中具抗肿瘤活性放线菌的筛选和多样性研究

从我国青海省采集盐碱土样或泥样,用添加1.0~3.0mol/L NaCl的GPY琼脂培养基和ISP2琼脂培养基分离到145株典型放线菌菌株。采用6种肿瘤细胞株对分离菌株的发酵产物进行体外筛选,得到26株抗肿瘤活性阳性菌株（17.9%）,19株为拟诺卡氏属（Nocardiopsis）菌株,7株为链霉菌属（Streptomyces）菌株。在抗肿瘤活性、形态特征、生理生化特性和全细胞水解物氨基酸组分分析等实验结果的基础上,选取差异较大的8株抗肿瘤活性阳性菌株进行16S rRNA基因序列测定和系统发育多样性分析。结果表明,2株属于链霉菌属（Streptomyces）的1个已知物种和1个潜在新种;6株属于拟诺卡氏菌属（Nocardiopsis）,可能代表该属的4个新种。研究表明青海盐碱环境中存在产生抗肿瘤活性物质的重要放线菌资源,也提示其中蕴藏着较丰富的微生物多样性。

青海两盐湖细菌多样性研究

用DGGE法和纯培养法 ,对青海柯柯盐湖、茶卡盐湖底泥及周边土壤样品的细菌多样性进行了研究。结果显示 ,两个盐湖存在大量的未知细菌 ,分离到的纯培养仅占实有细菌的小部分。采用多相分类方法 ,鉴定了 1 2株纯培养细菌 ,属 5个可能的新种 ,另有一株菌可能成立一个新属。认为提出新思路、设计新程序 ,从自然极端环境取样 ,分离未知菌 。

三株杀粘虫放线菌的分类鉴定

菌株YIM31331、YIM31333、YIM3135 5是从云南省丽江、中甸采集的土壤样品中分离得到的具有产杀粘虫活性物质菌株。根据其形态学特征、生理生化特性及 16SrDNA序列分析结果 ,认为菌株YIM 31331属于链霉菌属的Streptomycessubrutilus,YIM31333属于指孢囊菌属Dactylosporangiumaurantiacum ,YIM3135 5属于链孢囊菌属Streptospor angiumvulgare。

聚酮类化合物生物合成途径基因阳性菌株生物多样性研究

从中国云南省采集土样,采用GPY培养基、淀粉_酪素琼脂培养基和甘油天门冬酰胺琼脂培养基分离得到了876株细菌放线菌菌株。经聚酮类化合物基因筛选得到75株Ⅰ型和Ⅱ型聚酮类化合物生物合成基因双阳性的菌株,经抗菌活性、形态、生理等结果分析比较,选取其中的10株进行了16SrDNA序列分析。在物种多样性方面,分离到的菌分布至少有7个科,8个属。其中有链霉菌科的链霉菌属,分枝杆菌科的分枝杆菌属,链孢囊菌科的链孢囊菌属和野野村菌属,诺卡氏菌科的诺卡氏菌属,微球菌亚目的一新属、产碱杆菌科的无色杆菌属和β_亚纲中与紫色杆菌属紧邻的一革兰氏阴性菌新属。综合其表型、基因型特征,初步确定其中8株为新物种。研究表明利用新的思路和程序从自然环境分离、鉴定未知菌是微生物资源开发利用的关键。

产生芳香环聚酮类天然产物放线菌的分子筛选研究

目的建立一套简便、快速、高效的芳香环聚酮类化合物产生菌基因筛选体系,为聚酮类药物筛选搭建一个新的技术平台;认识PKS-II基因在不同环境放线菌群中的分布规律,为新药筛选中微生物资源的定向分离提供依据。方法通过对芳香环聚酮类化合物生物合成途径所用的II型聚酮合酶氨基酸和核苷酸序列的同源性比较分析,设计一对简并引物且以微波炉法提取的基因组DNA为模板扩增KS/CLF功能域约0.8kb目的基因片段,依据放线菌基因组中II型PKS合酶基因的存在与否标定可能的芳香环聚酮类天然产物产生菌。结果利用建立的芳香环聚酮类化合物产生菌基因筛选体系对99株嗜碱放线菌、100株链霉菌、47株嗜盐放线菌和776株一般放线菌进行了筛选,研究表明链霉菌、嗜碱放线菌、嗜盐放线菌和一般放线菌II型聚酮合酶基因的阳性率分别为54%、29.3%、25.5%和24.1%。结论组合放线菌基因组DNA快速提取技术和PKSII基因简并引物PCR扩增技术建立了快速、简便、高效的芳香环聚酮类化合物产生菌基因筛选体系并对不同环境条件的放线菌菌群的PKSII基因分布进行了研究。结果表明放线菌PKSII聚酮合酶分布具有广泛性;而且同时表明链霉菌是芳香环聚酮类化合物的最丰富来源;在极端环境放线菌中,嗜盐放线菌的PKSII基因在中度嗜盐放线菌分布的频率远高?

极端环境中的放线菌资源

由于极端微生物具有独特的基因类型 ,特殊的生理机制及特殊的代谢产物 ,因此是一类新型的且具有很大开发潜力的生物资源。重点介绍了国内外在极端环境下的微生物尤其是放线菌资源的研究状况。

嗜盐放线菌生物学特性初步研究

通过对从新疆 ,青海等地采集的盐碱土样中分离获得的 43株嗜盐或耐盐放线菌以及4株典型菌株的NaCl耐受实验 ,对不同浓度的Na+ ,K+ ,Mg2 + ,Ca2 + 的选择性实验及pH耐受实验进行了研究。发现耐盐放线菌对Na+ ,K+ ,Mg2 + 有广泛的适应性 ,只有少数耐盐放线菌能在较低浓度的CaCl2 条件下生长 ;嗜盐放线菌对Na+ 有广泛的适应性 ,多数嗜盐放线菌生长所需的Na+ 可被K+ ,Mg2 + 所替代 ,而不能被Ca2 + 所替代 ,少数嗜盐放线菌的生长离不开Na+ ,对Na+ 有高度的专一性 ,是专嗜Na+ 的嗜盐放线菌 ,说明不同嗜盐放线菌对Na+ ,K+ ,Mg2 + ,Ca2 + 的适应有选择性。因此 ,提出自然环境中是否也存在类似的专嗜K+ 或专嗜Mg2 + 的嗜盐放线菌的推测。无论是嗜盐还是耐盐放线菌其pH生长范围都在 6 0～1 0之间 ,生长最适pH7 0～ 8 0。另外 。

云南腾冲热海两热泉菌藻席细菌多样性的研究

应用显微形态观察和变性梯度凝胶电泳 (DGGE)对云南腾冲热海两热泉菌藻席的细菌多样性进行了比较分析。直接从环境样品中提取总DNA ,用两套细菌通用引物进行PCR扩增 ,得到包含V8和V9高变区的 1 6SrDNA片段 ,进行DGGE分析 ,结合形态观察 ,结果显示 ,热泉菌藻席中存在丰富的细菌多样性 。

免培养法对一热泉细菌多样性的初步研究

应用免培养法 (Culture independent)对云南腾冲热海大滚锅高温热泉中细菌的多样性进行初步的分析。经过克隆筛选 ,测定了 5个克隆的 1 6SrDNA插入片段的近全序列 ,系统发育分析的结果表明 ,它们分属于Bacillus、Hydrogenobacter和Pseudomonas,有一个克隆尚难确定其分类地位 ,它属于Thermodesulfobacteriaceae科 ,介于Geothermbacterium属和Thermodesulfo bacteria属之间。经PCR扩增出上述 5个克隆 1 6SrDNA插入序列中及环境样品总DNA中的1 6SrDNAV8高变区约 60 0bp片段 ,进行变性梯度电泳 (DGGE)。所得电泳图谱和 5个序列的系统发育树不仅表明该高温热泉存在着丰富的细菌多样性 。

涅斯捷连科氏菌属菌株的分离及系统学研究

从我国新疆及埃及东部高盐环境中分离到 4株形态上类似于涅斯捷连科氏菌属的革兰氏阳性菌株。以该属的 2个典型菌株 (NesterenkoniahalobiaDSM 2 0 5 4 1T和NesterenkonialacusekhoensisDSM 12 5 4 4 T)为对照 ,对 4个分离菌株进行了包括形态学 ,生长pH范围 ,温度范围 ,耐NaCl,KCl,MgCl2 ·6H2 O ,CaCl2 实验及酶学特性以及细胞化学组份、(G +C)mol%含量测定 ,16SrDNA分析及DNA DNA杂交在内的多相分类研究。结果显示 ,4个分离菌株属于涅斯捷连科氏菌属 ,但与涅斯捷连科氏菌属的 2个有效发表种有显著差异 ,因此

未培养微生物资源

简要介绍未培养微生物的概念、多样性、研究的理论基础和方法,并就未培养微生物资源的存在形式、开发利用途径和应用前景进行了讨论。

建立放线菌门的证据

放线菌是细菌域中的一个重要类群,其分类地位一直受到人们的关注。《伯杰氏细菌系统学手册》第二版,把放线菌从厚壁菌门中的一个纲提升为放线菌门。目前的研究发现,在细胞色素C氧化酶1亚基(Cox1)、CTP合成酶以及谷氨酰tRNA合成酶(GluRS) 3个蛋白中存在着放线菌特异的插入或缺失序列,可以将放线菌与其它细菌区分开,为放线菌门的建立提供了新的有力证据。简述了国内外的研究信息,并提出了自己的一些观点,供国内学者参考。