野葛块根总RNA的不同提取方法比较研究

以块根膨大与块根不膨大突变型的野葛块根为材料,比较Trizol、CTAB、SDS及改良SDS法提取野葛块根总RNA的效果,通过RNA产量、纯度及电泳图谱分析等,初步确立了一种有效提取野葛块根总RNA的改良SDS法。该方法提取的RNA OD260/OD280值介于1.7～1.9,电泳图谱清晰完整,产量高,成本低,完全适用于RT-PCR、cDNA-AFLP及Northern杂交等分子生物学后续试验。

早期子宫颈癌术后复发的不同治疗方法的肿瘤学结局:一项多中心回顾性研究

目的比较不同治疗方法治疗早期子宫颈癌广泛性子宫切除术后复发患者的肿瘤学结局差异。方法基于中国子宫颈癌临床诊疗大数据库,筛选纳入早期子宫颈癌根治术后复发患者,根据转移部位分为单纯盆腔转移组、远处转移组及盆腔转移合并远处转移组,再比较不同治疗方法,如放疗、单纯化疗或手术综合治疗的肿瘤学结局。结果①从数据库63926例子宫颈癌患者中,共纳入893例广泛性子宫切除术后复发患者,其中单纯盆腔转移组共398例,远处转移组共190例,盆腔转移和远处转移组共305例。②其中单纯盆腔转移398例,放疗组(n=248)5年总生存期高于单纯化疗组(n=93)(61.90%vs 44.40%,χ^(2)=15.292,P<0.001),手术综合治疗组(n=57)5年总生存期高于单纯化疗组(68.50%vs 44.40%,χ^(2)=6.089,P=0.014),但放疗组和手术综合治疗组5年总生存期比较差异无统计学意义(61.90%vs 68.50%,χ^(2)=0.244,P=0.621)。③远处转移190例,其中放疗组(n=67)、单纯化疗组(n=92)及手术综合治疗组(n=31)的5年总生存期比较差异无统计学意义(51.50%vs 59.20%vs 53.50%,χ^(2)=2.305,P=0.316)。④盆腔转移和远处转移305例,放疗组(n=160)、单纯化疗组(n=125)和手术综合治疗组(n=20)的5年总生存期无差异。(38.10%vs 44.50%vs 36.10%,χ^(2)=0.785,P=0.675)。结论早期宫颈癌广泛性子宫切除术后单纯盆腔转移的患者,接受手术综合治疗及放疗的肿瘤结局均优于单纯化疗。远处转移病例或盆腔转移合并远处转移病例中,放疗组、单纯化疗组和手术综合治疗组患者的肿瘤学结局均无明显差异。

白菜总RNA的高效提取方法及常见问题分析

[目的]建立从白菜叶片组织中快速提取高质量RNA的方法，为进行LD—PCR、AnP、SRAP及其他分子生物学试验奠定基础。[方法]通过增加高速离心时间，用3％H2O2处理试验器皿等措施对Trizol试剂法进行优化，建立了一种简单、快捷、经济、高效的RNA提取方法。[结果]在1．5h左右可得到高质量的总RNA，经琼脂糖凝胶电泳、蛋白核酸分析仪检测，提取的总RNA具有清晰的28S、18S、5S3条带，且28S的宽度是18S的2倍左右，0D260／DD280比值为1．90—2．16。进一步以提取的总RNA为模板成功进行了单链cDNA的合成和LD—PCR。[结论]改良的Trizol试剂法所提取的RNA纯度和完整度极高，可用于LD—PCR、SRAP、基因克隆及表达分析等后续分子生物学试验。

盆底功能正常的未育青年女性静息状态下膀胱尿道的三维解剖

目的研究正常青年未育女性静息状态膀胱尿道的三维精细解剖结构。方法收集2015年1月至2016年10月于本院妇科就诊患者的MRI影像及一般资料,选取满足入选要求的45例青年未育女性静息状态下MRI数据集,利用Mimics 10.01软件进行三维重建,联合UG软件对膀胱尿道与耻骨联合间的精细解剖参数进行三维测量和分析。结果45个数据集均可构建盆底器官三维模型,含骨盆、膀胱、尿道、子宫、阴道和直肠。测得膀胱尿道相关精细解剖参数如下:膀胱尿道后角(146.3±16.6)°,β角(144.5±14.1)°,尿道耻骨角(47.9±15.2)°,尿道倾斜角(18.5±9.2)°,α角(87.2±15.1)°。尿道横纹肌厚度(2.58±0.60)mm。耻骨后间隙(15.96±3.52)mm,膀胱颈距耻骨联合下缘中点连线距离(23.66±3.97)mm。结论计算机三维重建技术能够直观再现人体膀胱尿道三维解剖形态,提供膀胱尿道精细解剖的三维研究平台,通过多项径线和角度的测量,反映正常状态下膀胱尿道及周围支持结构的功能。

基于MRI和CT数据的女性泌尿系统三维建模

目的探索女性泌尿系统三维模型的构建方法及意义。方法收集2018年于南方医科大学南方医院妇科就诊患者的MRI及CT影像数据,选取采用妇科常用扫描序列进行扫描的MRI及CT数据集各10套,利用Mimics19.0软件对不同数据集的女性泌尿系统进行三维重建,并联合工程学软件,探索对膀胱尿道可进行测量的指标。结果10套MRI数据集均成功构建膀胱及尿道,而10套CT数据集成功构建双肾、输尿管及膀胱。联合工程学软件,诸多膀胱尿道相关的几何参数可被测量,本研究中膀胱尿道后角:151.1±17.9°、β角:137.3±14.0°、尿道耻骨角:47.8±12.1°、尿道倾斜角:21.5±7.3°、α角:83.8±13.8°、耻骨后间隙:15.3±3.0 mm、尿道横纹肌厚度:2.6±0.6 mm。结论计算机三维重建技术能够直观再现人体泌尿系统三维解剖形态,提供女性泌尿系统精细解剖的三维研究的平台,通过多项径线和角度的测量,可为将来研究不同人群泌尿系统精细解剖及功能的差异提供技术基础。

基于UPLC法测定离体大鼠及人源肠道菌对三七中人参皂苷代谢的差异

为探究人与大鼠肠道菌群对三七水煎液中三醇型人参皂苷Rg1、Re及二醇型人参皂苷Rb1、Rd体外代谢的差异性及发现其代谢产物原人参二醇PPD与原人参三醇PPT,实验利用UPLC方法测定三七水煎液分别与人、大鼠肠道菌群在厌氧条件下共培养24h后的孵育液中4种皂苷的含量及代谢产物PPD与PPT的含量。结果表明三七中含有三醇型人参皂苷Rg19.4500mg/g、Re1.8872mg/g,二醇型人参皂苷Rb18.5816mg/g、Rd1.9456mg/g。与人源肠道菌共培养后,三七中含有的二醇型、三醇型人参皂苷含量显著降低,重要的是,在培养液中检测到代谢产物PPD和PPT的存在,含量分别为0.2136mg/g及0.0344mg/g,与大鼠肠道菌共培养后,三七中含有的二醇型皂苷含量有轻微降低,而三醇型皂苷含量未见明显变化,但有少量PPT(0.0184mg/g)的生成。由此可见:在体外条件下,三七水煎液中人参皂苷会被人肠道菌群降解生成代谢产物PPD和PPT,而大鼠肠道菌群的降解产物却仅有PPT生成,二者存在种属差异。

基于磁共振成像的女性盆腔脏器数字化三维模型的构建

目的探讨利用磁共振二维影像数据构建女性盆腔脏器数字化三维模型的方法及意义。方法从2018年1月至2018年10月在南方医科大学南方医院因疾病需要行盆腔磁共振成像检查的患者中随机挑选10例,获取其原始Dicom 3. 0数据集并导入Mimics 19. 0软件,通过手动勾画盆腔各脏器轮廓线,再经三维计算和光滑处理即可完成三维模型重构。结果成功构建女性盆腔脏器精细三维解剖模型,包括子宫、子宫内膜、阴道、双侧附件、膀胱、尿道、直肠等脏器组织,具有表面光滑、层次分明、形态逼真、多角度观察等特点。利用软件自带测量工具可快速测量各脏器的几何形态参数。结论女性盆腔脏器数字化三维模型可作为手术模拟、规划、培训教学的载体,具有广阔的临床应用前景。

一种基于深度学习的实体消歧技术

传统的命名实体消歧技术通常依靠丰富的上下文语境和外部实体知识库,而很多新兴实体缺乏知识库且包含实体的文本长度较短,这些局限性使得传统算法不能够充分利用上下文的语义信息。另外,由于受有效样本数量的限制,算法最终应用的场景十分有限。基于上述问题,提出一种基于深度学习的结合BERT(bidirectional encoder representation from transformers)模型和长短期记忆神经网络的实体消歧方法。该方法主要包含以下几个部分:1)设计了一种基于BERT模型的词向量,通过较少的数据样本仍然可以获取较多的信息;2)为了让长短期记忆神经网络保留较多的有用信息和验证短文本以适用该方法,对句子样本进行切分;3)结合微软公司提出的NNI(neural network intelligence)技术,高效地获取较优的神经网络超参数。通过与其他不同类型的词向量和神经网络技术进行比较,验证了使用文中基于深度学习的实体消歧技术在F-Measure值评测指标上效果更好。

女性盆底功能障碍性疾病的影像学评估

随着计算机图像处理水平的快速提升,影像学技术也随着临床工作需求而发展。选择合适的影像学技术了解盆底解剖结构及盆底疾病的发病机制是临床医生进行诊治的基础。本文对超声及核磁共振成像技术在盆底功能障碍性疾病中的应用进行综述,旨在为选择合适的影像学技术评估盆底功能障碍性疾病提供参考。

黏液性低级别子宫内膜间质肉瘤术后8 年升结肠旁转移一例

病例资料患者27岁,因“子宫内膜间质肉瘤Ⅱ期术后8年,检查发现腹部占位半月”入南方医科大学南方医院妇产科治疗。患者2010年2月曾因“月经期延长,月经淋漓不尽并突然出现阴道大量流血”于外院行2次宫腔镜子宫黏膜下肌瘤切除术,术后病理提示“黏液性子宫平滑肌瘤”,术后定期复查B超。

ⅡA1期子宫颈癌腹腔镜手术安全性评估

目的探讨ⅡA1期子宫颈癌腹腔镜对比开腹手术的肿瘤学结局及严重并发症。方法该研究是基于真实世界数据的多中心回顾性队列研究,纳入2004年至2016年在中国内地37家医院行腹腔镜或开腹QM-B或QM-C型子宫切除的ⅡA1期子宫颈癌患者,比较腹腔镜与开腹组的肿瘤学结局及严重并发症。结果从46313例中国子宫颈癌临床诊疗大数据库中按入组和排除标准纳入4689例ⅡA1期子宫颈癌患者,其中有生存结局的3595例。真实世界数据分析显示腹腔镜组(n=936)5年总体生存率及无瘤生存率均低于开腹组(n=2659)(总体生存率:80.8%vs 88.2%,P=0.022;无瘤生存率:77.8%vs 81.8%,P=0.009),两组1∶2倾向评分匹配后的结果与真实世界数据相符。严重并发症分析时纳入4689例ⅡA1期子宫颈癌,真实世界数据分析显示腹腔镜组(n=1187)的总严重并发症(5.6%vs 2.5%,P<0.001)明显多于开腹组(n=3502)。分类分析显示腹腔镜组术中严重并发症(P<0.001)及术后严重并发症(P<0.001)明显多于开腹组,两组手术部位并发症无差异(P>0.05)。二分类logistic回归分析显示,ⅡA1期子宫颈癌腹腔镜广泛性子宫切除是术中及术后严重并发症发生的独立危险因素(HR=2.079,95%CI 1.131~3.819,P=0.018;HR=2.019,95%CI 1.156~3.526,P=0.014),但腹腔镜不影响手术部位严重并发症的发生(P>0.05)。结论在ⅡA1期子宫颈癌手术治疗中,无论是从肿瘤学结局还是从手术严重并发症角度来看,腹腔镜手术都不是一个好的选择。

结核病患者对膳食营养需求调查分析

目的:了解结核病患者对膳食的营养需求,针对存在的问题及需求进行整改,以提高结核患者对膳食营养的满意度,增加其免疫系统功能。方法:采用护患沟通,对结核病患者的膳食营养需求进行宣传指导。结果:不同年龄、职业、文化程度及经济收入患者对饮食营养的认知及需求等经问卷调查有显著统计学意义。60%的患者认可饮食营养能促进健康,40%的患者认为营养可任意选择。结论:增强服务意识,加强健康教育,搞好护患沟通,以满足不同患者的饮食需求是提高服务质量的关键。

子宫托的临床应用研究进展

子宫托治疗是一种古老而保守的治疗方式,因其有花费低、损伤小、适用人群广、安全有效、操作简单等诸多优点,在盆腔器官脱垂(pelvic organ prolapse,POP)治疗中得到广泛应用。既往有关子宫托应用的研究主要针对体弱者或老年人POP的保守治疗,现在已拓展应用到压力性尿失禁(stress urinary incontinence,SUI)、宫颈机能不全(cervical incompetence,CI)等与盆底功能障碍(pelvic floor dysfunction,PFD)相关的一些疾病,以及作为诊断隐匿性尿失禁(occult stress urinary incontinence,OSUI)、术前缓解脱垂症状等的辅助手段。随着人口老龄化的加速,PFD患者数量将逐渐增加,子宫托的应用也将更加广泛。现将子宫托的临床应用研究进展综述如下。

广泛性子宫切除术后盆腔器官位置改变的静动态MRI评估

目的采用静动态MRI及三维重建方法探讨广泛性子宫切除术前后盆腔器官位置及移动度的改变特点。方法选取2017年9月至2019年9月就诊于南方医科大学南方医院的Ⅰa2~Ⅱa2期子宫颈鳞癌或腺癌并行开腹广泛性子宫切除术患者30例,收集患者术前2周和术后6~12个月的静、动态MRI检查原始数据。使用Mimics 10.01软件三维重建骨盆及盆腔器官,测量术前和术后骨盆参考线长度以及静、动态器官指示点(膀胱颈、阴道顶端及肛直肠连接处)至耻骨-骶尾关节线头尾侧、耻棘线内外侧、坐骨棘连线腹背侧的投影距离,对比术前和术后盆腔器官自身静、动态位置的差异及垂直、水平、前后方向移动度的差异。结果手术前、后动态下,膀胱、阴道顶端及直肠均发生向下、向后位移;术前和术后膀胱、阴道顶端垂直方向移动度的差异均有统计学意义(P<0.05),直肠垂直方向移动度的差异无统计学意义(P>0.05);术前和术后膀胱、阴道顶端及直肠水平方向移动度均较小,仅1~3 mm;术前和术后膀胱、阴道顶端前后方向移动度的差异均有统计学意义(P<0.05),直肠前后方向移动度的差异无统计学意义(P>0.05)。结论广泛性子宫切除术前后,屏气用力可使盆腔器官发生向下、向后移动。术前膀胱向下、向后移动度为6~7 mm,术后向下、向后移动度为3~4 mm;术前阴道顶端向下、向后移动度约5 mm,术后向下、向后移动度约1 mm。膀胱和阴道顶端于术后移动度下降,直肠在术前和术后移动度无明显改变。

基于大数据探讨ⅠB2期子宫颈癌腹腔镜与开腹手术长期肿瘤学结局研究

目的应用大数据探讨中国ⅠB2期子宫颈癌患者腹腔镜与开腹手术的长期肿瘤学结局差异。方法基于中国子宫颈癌临床诊疗大数据库,回顾性分析2009—2016年国内部分地区ⅠB2期子宫颈癌腹腔镜与开腹手术病例,通过真实世界研究(RWS)和倾向评分匹配(PSM)的方法,分析2种手术途径5年总体生存率(OS)和无病生存率(DFS)的差异。结果(1)初始入组共纳入2176例病例,其中腹腔镜组646例,开腹组1530例。匹配前两组5年OS差异无统计学意义(82.5%vs.88.4%,P=0.060),但5年DFS腹腔镜组低于开腹组(77.6%vs.83.9%,P=0.001),Cox比例风险模型分析显示腹腔镜手术是患者5年死亡和复发/死亡的独立危险因素(OS:HR=1.398,95%CI 1.029~1.898,P=0.032;DFS:HR=1.540,95%CI 1.220~1.943,P<0.001)。1∶2 PSM匹配后共纳入1575例病例,其中腹腔镜组525例,开腹组1050例;腹腔镜组的5年OS和DFS均低于开腹组(OS:82.4%vs.89.2%,P=0.042;DFS:77.6%vs.85.0%,P=0.001),Cox比例风险模型分析显示腹腔镜手术是患者5年死亡和复发/死亡的独立危险因素(OS:HR=1.457,95%CI 1.022~2.077,P=0.037;DFS:HR=1.569,95%CI 1.198~2.054,P=0.001)。(2)进一步限定手术类型为QM-B型或QM-C型子宫切除为纳入条件,共入组2066例病例,其中腹腔镜组627例,开腹组1439例;匹配前两组的5年OS差异无统计学意义(82.1%vs.88.2%,P=0.056),但5年DFS腹腔镜组低于开腹组(77.5%vs.83.6%,P=0.001),Cox比例风险模型分析显示腹腔镜手术是患者5年死亡和复发/死亡的独立危险因素(OS:HR=1.421,95%CI 1.044~1.935,P=0.025;DFS:HR=1.529,95%CI 1.207~1.938,P<0.001)。1∶2 PSM匹配后共纳入1470例病例,其中腹腔镜组490例,开腹组980例;两组的5年OS差异无统计学意义(83.2%vs.88.8%,P=0.126),但5年DFS腹腔镜组低于开腹组(77.5%vs.84.7%,P=0.001),Cox比例风险模型显示腹腔镜手术仅是患者5年复发/死亡的独立危险因素(HR=1.575,95%CI 1.191~2.081,P=0.001)。结论ⅠB2期子宫颈癌患者腹腔镜手术与开腹手术相比,接受腹腔镜手术的患者具有更低的DFS,腹腔镜手术是该期患者复发/死亡的独立危险因素。

中国大陆部分地区局部晚期宫颈癌术前静脉化疗和术前动脉化疗对比研究

目的探讨局部晚期宫颈癌术前静脉化疗和术前动脉化疗两种途径化疗方案、疗程及近期疗效的差异。方法回顾性分析2004—2016年中国大陆地区34家医院30 665例宫颈癌病例,选择术前行静脉化疗或动脉化疗的患者1000例,其中静脉组893例,动脉组107例,以妇科检查结合影像学检查评价新辅助化疗前后病灶大小变化,分析两组在化疗方案、疗程及近期疗效的差异。结果 (1)两组化疗方案可归纳为紫杉醇类+顺铂组、紫杉醇类+非顺铂铂类组、非紫杉醇类+顺铂类组、非紫杉醇类+非顺铂铂类组、铂类单药组、非铂类药物组6组。(2)两组化疗方案差异:静脉组6种方案占比分别为44.12%、31.69%、19.04%、4.82%、0、0.34%;动脉组分别为6.54%、1.87%、66.36%、16.82%、7.48%、0.93%,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)两组化疗疗程差异:静脉组1、2、≥3疗程占比分别为37.96%、55.99%、6.05%,平均为(1.68±0.58)疗程;动脉组分别为90.65%、9.35%、0,平均为(1.09±0.29)疗程,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)两组化疗疗程与近期疗效差异:(1)分别以化疗1疗程及2疗程为截点,静脉组和动脉组近期总体有效率相近(52.07%vs. 50.47%,79.42%vs. 80.00%),差异无显著性意义(P>0.05);(2)以最后一次化疗结束为截点,静脉组有628例(70.32%)达到有效标准,化疗1、2、≥3疗程分别为183例(29.14%)、404例(64.33%)和41例(6.53%),平均疗程为(1.77±0.55)个;动脉组有57例(53.27%)达到有效标准,化疗1、2、≥3疗程分别为49例(85.96%)、8例(14.04%)和0例(0),平均疗程为(1.14±0.35)个,整个化疗过程中动脉组平均化疗疗程少于静脉组(P<0.05)。结论 (1)ⅠB2期及ⅡA2期局部晚期宫颈癌,术前静脉化疗常使用紫杉醇类+顺铂类方案,以2疗程为主;术前动脉化疗常使用非紫杉醇类+顺铂类方案,以1疗程为主。(2)当使用2疗程以内时,两组化疗有效率相近;当最后一次化疗结束后达到同一疗效时,术前动脉化疗平均疗程数少于术前静脉化疗。

盆腔器官脱垂患者宫骶韧带与输尿管、直肠解剖关系的MRI三维重建研究

目的采用MRI三维重建模型研究盆腔器官脱垂(POP)患者宫骶韧带与输尿管、直肠的解剖关系。方法按照研究标准纳入2015年5月至2020年3月就诊于南方医科大学南方医院并行手术前盆腔MRI检查的POP患者67例;以中盆腔Ⅰ~Ⅱ度脱垂为轻度POP(37例),中盆腔Ⅲ~Ⅳ度脱垂为重度POP(30例)。三维重建形成三维模型,并在宫骶韧带的拟合曲线与坐骨棘连线平面的交点标记为P0点,向骶骨方向每增加1 cm分别标记P1、P2、P3点;分别在P0~P3点水平测量直肠和输尿管到宫骶韧带的最短距离。结果(1)左侧输尿管到左侧宫骶韧带的距离为(15.45±7.46)~(19.31±11.38)mm,右侧输尿管到右侧宫骶韧带的距离为(13.77±8.16)~(14.78±9.18)mm;P1点水平输尿管距离宫骶韧带最近,重度POP患者右侧输尿管在P2点水平距离右侧宫骶韧带最近,为(13.45±9.34)mm;双侧输尿管距离同侧宫骶韧带的最远距离均位于P3点水平。(2)直肠在P0点水平距离双侧宫骶韧带最近,左侧为(20.62±9.99)mm,右侧为(16.82±9.63)mm,左右两侧比较,差异有统计学意义(P=0.026);直肠与右侧宫骶韧带更靠近;轻度POP患者直肠到双侧宫骶韧带的距离在各标记点均无差异(P均>0.05),重度POP患者直肠更靠近右侧宫骶韧带,最近在P0点水平为(15.64±10.31)mm。结论与左侧宫骶韧带相比,输尿管和直肠与右侧宫骶韧带的关系更密切,POP患者在行右侧宫骶韧带手术操作时需更注意勿损伤输尿管和直肠。

两种全子宫切除术后阴道三维轴向及承受腹压力学应变改变情况可视化研究

目的通过磁共振成像(MRI)可视化探究广泛性全子宫切除术(RH)与普通全子宫切除术(TH)后阴道三维轴向及承受腹压力学应变改变情况。方法按纳入标准选择2019年5月至2020年9月就诊于南方医科大学南方医院行RH的子宫颈鳞癌或腺癌患者50例,同期行TH的良性疾病或Ⅰ期子宫内膜癌患者30例,分别于术前、术后1年行盆腔MRI检查。在矢状面以耻骨联合下缘为坐标原点建立坐标系统,将耻尾线(pubococcygeal line,PCL)设为X轴、与该线垂直方向为Y轴,利用MRI三维重建技术分别重建出骨盆、阴道。定义术前、术后阴道拐点为受力点P1、P2,P1点在术后阴道对应点为P1’点,分别测量P1、P1’、P2点坐标位置,阴道上下段角度及该点阴道下段/阴道总长度比值。结果(1)RH组受力点位置及力学应变改变情况:术后P2相对术前P1向下0.75cm更靠近阴道外口、向前0.63cm更靠近耻骨联合;术后P2阴道上下夹角均较术前P1更钝,角度增加17.62°;P1、P2点处阴道下段长度与阴道总长度的比值分别为0.47±0.06和0.54±0.09(P<0.001)。(2)TH组受力点位置及力学应变改变情况:术后P2位置较术前P1向下0.35cm更靠近阴道外口、向前0.50cm更靠近耻骨联合;术后P2阴道上下夹角均较术前P1更钝,角度增加15.91°;P1、P2点处阴道下段长度与阴道总长度的比值分别为0.43±0.59和0.48±0.84(P=0.072)。(3)两组术前、术后阴道下段长度差值RH组大于TH组(P=0.002),阴道角度变化及阴道下段长度与阴道总长度的比值的差值对比差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论术后早期RH及TH均可导致阴道前倾、变直,阴道受力点位置下移,RH后阴道受力点位置较TH后更向前靠近耻骨联合,向下靠近阴道外口,术后受力点P2处阴道上下段角度更钝。