基于核壳结构微囊构建三维牙髓细胞球及初步体外研究

目的:利用同轴静电液滴技术设计并制备一种用于牙髓干细胞(DPSCs)三维细胞球体构建、培养的核壳微囊。方法:获取临床收集DPSCs并通过流式细胞仪进行细胞鉴定;构建核壳微囊,调节内外相溶液浓度、流速和细胞密度等参数,对比微囊形貌及尺寸筛选最佳制备条件;活/死染色和CCK-8实验检测微囊内的细胞球的细胞活性,免疫荧光染色观察细胞骨架。结果:成功分离培养DPSCs,构建以海藻酸钠(Alg)为壳层和羧甲基纤维素(CMC)为核层的载细胞微囊。当细胞密度为1×108个/mL时,微囊内的DPSCs在24 h内能自发形成直径为(101.93±10.11)μm的单一球体。活/死染色显示培养7 d内细胞存活率未明显降低(P>0.05),CCK-8显示培养4 d时细胞增殖率增加至(114.91±7.70)%(P<0.05),7 d时增长至(169.05±5.29)%(P<0.001)。细胞在微囊内形成致密结构。结论:该方法制备的核壳微囊可以促进DPSCs形成三维细胞球并长期存活。

EPC模式固定总价的风险责任分配实证研究

固定总价是与EPC工程总承包配套的合同价款结算方式。针对EPC固定总价的风险责任分配问题,实证研究可以提炼出四种主要样本:新增工程价款如何处理、未完工的工程价款是否扣减、结算依据是否为固定总价、实际施工时工程发生其他变化如何处理,以及相应的裁判规则。由于相关法律规定尚不完善,建设单位与施工单位也尚未摆脱传统施工总承包的观念,因此在固定总价的法律适用中存在工程实践现状与法律提倡的固定总价不相适应、发包人缺少主动补偿总承包人的法律通道、发包人招标文件不详细时缺少法律责任进行规制等问题。基于此,EPC风险责任分配上应当结合我国工程实践的现状,采用固定总价与固定单价相结合的计价方式,再将设计优化所产生的利益明确归属于总承包人,并明确招标文件编制不合格时发包人的法律责任,以形成我国独特的EPC风险责任分配模式。

蜘蛛香中的环烯醚萜类化合物在巨噬细胞中的抗炎活性研究

蜘蛛香(Valeriana jatamansi Jones)作为我国多个民族常用的传统草药具有广泛的药用价值,从蜘蛛香中筛选有效化合物并研究其作用机制,对蜘蛛香的综合开发和利用具有重要的意义。本研究采用脂多糖(LPS)处理RAW264.7细胞作为炎症细胞模型,对从蜘蛛香干燥根及根茎中分离得到的14个环烯醚萜类化合物进行抗炎活性研究。结果显示,化合物1、2、3、5、8、9均可以明显抑制NO的产生,其中化合物1和2的抑制效果最为显著,IC_(50)值分别为0.88和0.62μmol/L。进一步实验研究结果显示,化合物1和2可抑制LPS诱导的RAW264.7细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌,下调iNOS、COX-2、NLRP3蛋白表达及IκBα、STAT3和mTOR的磷酸化水平,但是对MAPKs蛋白家族无明显影响。综上说明化合物1和2可能通过下调NF-κB及mTOR/STAT3信号通路,减少炎症相关蛋白的表达以及炎症因子的分泌,从而降低LPS诱导的巨噬细胞的炎性反应。

以问题为基础的教学模式联合以团队为基础的教学模式在骨肿瘤临床见习中的应用

目的比较以问题为基础的教学模式(problem-based learning,PBL)联合以团队为基础的教学模式(team-based learning,TBL)与传统教学法在骨肿瘤临床见习中的作用,探索较为适合骨肿瘤临床见习的带教方法。方法将2017年4月在四川大学华西医院骨科骨肿瘤亚专业进行临床见习的四川大学华西临床医学院2013级临床医学五年制专业60例学生随机分为2组,试验组采用PBL联合TBL模式教学法,对照组采用传统教学法,比较两组学生的一般情况,并于见习结束后比较两组学生的知识掌握情况、综合能力和满意度。结果两组学生的性别构成和上一学期“诊断学”课程考核成绩差异无统计学意义(P>0.05)。见习结束后,对于知识掌握情况,试验组的理论考试成绩[(89.13±3.47)vs.(87.03±2.99)分;t=2.511,P=0.015]、教师评价[(88.33±4.48)vs.(85.90±3.96)分;t=2.231,P=0.030]和学生评价[(89.83±2.97)vs.(87.47±2.91)分;t=3.117,P=0.003]均优于对照组;综合能力方面,试验组的推理归纳、信息管理、目标完成、沟通交流能力[(17.90±1.09)、(18.00±0.91)、(18.00±1.02)、(17.90±1.13)分]均优于对照组[(17.20±1.13)、(17.13±1.20)、(17.10±1.24)、(16.83±1.29)分],差异有统计学意义(P<0.05);两组学生的满意度差异无统计学意义(P>0.05)。结论PBL联合TBL模式可以增强学生在骨肿瘤临床见习中的效果,加深学生对专业知识的掌握,提高学生的综合能力,进而提高教学质量。