猪胚胎胰岛移植治疗实验性糖尿病的研究

采用胶原酶消化和体外培养的方法，成功获得大量猪胚胎胰岛，将胰岛移植到裸鼠肾包膜下，3周后静脉注射STZ，诱导实验性糖尿病。自移植起平均75．9±36．6天后，血糖恢复正常。将移植物取出后，裸鼠均复发糖尿病。组织学检查发现，移植物中含大量的胰岛、管型、β细胞团和血管，而胰腺组织切片见β细胞消失，未见胰岛细胞自发性增生。本研究结果显示：猪胚胎胰岛在裸鼠体内能衍化发育成熟，并具有控制血糖稳定的功能。此结果也证实STZ对未成熟的猪胚胎胰岛无毒性作用。

逐瘀清宫冲剂药效学研究

采用动物实验方法对逐瘀清宫冲剂的药效学进行了观察，结果表明该冲剂有明显的缩短小白鼠凝血和止血时间，显著增强大鼠离体子宫收缩幅度和活动力，增强Ｒｕ－４８６药物流产后子宫腔内蜕膜组织、滋养细胞等妊娠物的排出，及有明显促进子宫内膜的恢复作用。

微囊化新生猪胰岛异种移植治疗小鼠实验性糖尿病的研究

用一步法微囊包膜技术包裹新生猪胰岛，移植于８只糖尿病小鼠腹腔后约１周，小鼠血糖由移植前的＞１６．６７ｍｍｏｌ／Ｌ降至＜８．３３ｍｍｏｌ／Ｌ。然后将维持疗效１３０天以上小鼠的移植物取出作组织学检查。结果显示微囊内仍见边缘清晰的完整胰岛，且微囊胰岛无纤维包绕；而移植无微囊胰岛的对照组，正常血糖仅维持２周，移植物即被排斥。提示采用微囊化的胰岛异种移植，能有效地纠正糖尿病模型动物的高血糖，并明显地延长小鼠的存活期。说明此微囊具有免疫隔离作用，且有良好的生物膜性，能有效地避免宿主抗移植物的排异反应。

微囊化胰岛移植与胰岛素注射对实验性糖尿病大鼠血液流变学的影响

采用微囊化胰岛异种移植治疗实验性糖尿病大鼠，同时观察与常规胰岛素皮下注射在存活率、降血糖、血流变、肝脏超微结构的变化等方面的影响。结果表明，移植组在移植术后７０ｄ 时全部存活，胰岛素治疗组８ 只存活，移植术后１００ｄ 时测得血糖（６．５１±１．０８）ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ，与胰岛素注射组（２１．２９±２．４５）ｍ ｍ ｏｌ／Ｌ相比差异有显著性（Ｐ＜ ０．０１）。血流变指标改变如全血高切粘度、低切粘度、细胞聚集指数、高切还原和低切还原粘度等移植组均比胰岛素组降低（Ｐ＜ ０．０５，Ｐ＜ ０．０１）。移植组肝脏超微结构病理改变显著轻于胰岛素治疗组。表明微囊化胰岛移植治疗实验性糖尿病有效，并能降低血流变指标和减缓肝脏的损害。

微囊化胰岛移植防治实验性糖尿病大鼠心脑微血管病的 …

目的：观察微囊化胰岛移植预防和延缓实验性糖尿病鼠心，脑并发症的作用。方法：利用免疫的隔离膜技术一步法微囊新生猪胰岛，移植于实验性糖尿病大鼠腹腔，对照１组植入末微囊新生猪胰岛对照２组常规胰岛素皮下注射。结果：移植微囊胰岛组第８ｄ测血糖６．４７±０．；９０ｍｍｏｌ／Ｌ，对照１，２组分别为９．１０±２．１５ｍｍｏｌ／Ｌ和２０．３４±２．１６ｍｍｏｌ／Ｌ，相比均有显著差异。

复方水蛭素的药效学研究

目的:探讨复方水蛭素抗肿瘤的作用机理。方法:①对W256肿瘤的影响:于大白鼠左前腋下接种W256瘤种细胞液(0.3 ml/只),次日开始用药。阴性对照组给予生理盐水;阳性对照组给予5-FU;中药组分别给予不同剂量的复方水蛭素;②对胃癌靶细胞(NKM)的影响:将药物稀释成1∶10、1∶20、1∶40、1∶80、1∶160、1∶320、1∶640的浓度,接种于多孔培养板内的人胚胎肺细胞(HEL)和肿瘤靶细胞(NKM)上,37℃、CO2培养,观察细胞病变,计算抑瘤指数;③对超氧化物歧化酶(SOD)和脂质过氧化物(MDA)的影响:取小鼠44只,随机分成四组,给药方法同W256肿瘤实验组,连续用药30 d,次日摘取小鼠眼球取血,用微量快速检测法测定SOD和MDA的含量。结果:复方水蛭素对W256肿瘤具有明显的抑制作用(P<0.01),该药浓度在1∶80(最大抑瘤浓度)时抑制肿瘤靶细胞的效应最大,1∶640(最小抑瘤浓度)时,抑制肿瘤靶细胞的效应最小。同时,复方水蛭素还能明显提高小鼠血中SOD的活性和降低MDA代谢产物的含量(P<0.05)。结论:复方水蛭素具有明显的体内外抗肿瘤作用。

鸡腿蘑发酵液与钒酸钠协同抑制小鼠血糖升高作用的研究

研究了鸡腿蘑发酵液与钒酸钠混合液对肾上腺素造成高血糖小鼠的血糖水平的影响。研究表明

少量多次异基因骨髓移植的实验研究

目的：探讨少量多次异基因骨髓移植的ＧＶＨＤ反应。方法：采用不同少量异基因骨髓细胞的多次尾静脉注射。观察大小便，皮毛，体位及死亡率等ＧＶＨＤ反应一般表现。移植后不同天数进行体内混合淋巴细胞反应及嵌合体测定。外周血象及骨髓有核细胞按常规方法计数。半固体琼脂法进行骨髓ＣＦＵ－ＧＭ测定。肝、脾、小肠及皮肤病理学检查判断ＧＶＨＤ反应程度。外周血Ｌ６１５细胞及脾脏Ｌ６１５细胞比例判断ＧＶＬ作用。结果：一次性大剂量组ＧＭＨＤ反应表现明显，单纯多次异基因骨髓细胞移植的ＧＶＨＤ反应不明显，而少量多次骨髓移植组则ＧＶＨＤ反应强度界于两者之间，并且具有较好的造血恢复作用。在ＧＶＬ作用方面，一次性大剂量骨髓移植组产生较强的近期抗白血病作用，但多死于ＧＶＨＤ反应。少量多次骨髓移植１×１０６骨髓细胞及 １×１０６脾单个核细胞组抗白血病作用较强，３０ ｄ生存率达 ６０％，死亡原因主要为白血病。结论：少量多次骨髓移植可以减轻ＧＶＨＤ反应，保留部分ＧＶＬ作用。

干扰素对HL-60细胞与维甲酸耐药HL-60细胞作用的研究

目的 :探讨干扰素α对HL 6 0细胞增殖分化与凋亡的作用及特点。方法 :MTT法测定细胞增殖性变化。NBT方法测定细胞分化程度。流式细胞仪测定凋亡的发生程度。浓度递增法诱导HL 6 0细胞的维甲酸耐药性。结果 :IFNα体外抑制HL 6 0细胞增殖 ,并与维甲酸产生协同抑制作用。IFNα可单独诱导HL 6 0细胞分化 ,又能增加维甲酸诱导分化作用。单独IFNα无明显的诱导HL 6 0细胞凋亡作用。维甲酸耐药HL 6 0细胞经IFNα作用 3d后 ,可明显恢复其对维甲酸的反应性。结论 :IFNα既能促进维甲酸对HL 6 0细胞的诱导分化作用 ,又可逆转HL 6 0的维甲酸耐药性。

肝脾细胞输注在异种移植中的耐受诱导

目的 :观察肝脾细胞输注诱导异种胰岛移植的免疫耐受性。方法 :采用STZ制备BALB C小鼠糖尿病模型 ,经尾静脉注射供体猪肝细胞和 或脾细胞 3次后 ,腹腔内注射法进行猪胰腺细胞移植。测定血糖浓度变化 ,观察小鼠移植物有功能存活时间。选择常规方法测定小鼠移植后NK细胞活性变化 ,T细胞亚群和B细胞体外抗体形成实验。结果 :肝脾细胞联合胰岛移植组血糖在移植后 2 0d内均处于较低水平 ,并与同期其他各实验组的血糖有明显差异 (P <0 0 5 )。于 35～ 4 5d内出现移植物功能丧失。NK细胞杀伤活性移植后肝脾细胞联合胰岛移植组没有明显变化 (P >0 0 5 )。其他各实验组的NK细胞杀伤活性均明显升高 (P<0 0 5 ) ,T细胞亚群亦与NK细胞杀伤活性一样出现同样变化。脾脏B细胞体外溶血功能均增强 (P<0 0 5 )。结论

桑银降糖胶囊对链脲霉素致糖尿病大鼠的降糖作用

目的观察桑银降糖胶囊对链脲霉素(STZ)致糖尿病大鼠的降糖疗效。方法采用STZ制备糖尿病大鼠模型,随机分为糖尿病模型组、桑银降糖胶囊大剂量组(1.2 g/kg)、桑银降糖胶囊小剂量组(0.3 g/kg)、桑枝颗粒组各10只,另设对照组10只。采用微量血糖测试仪检测各组糖尿病大鼠血糖,125I-胰岛素放射免疫试剂盒测血清胰岛素水平,同时进行HE染色观察各组大鼠的胰腺病理变化,电镜观察肾脏、肝脏超微结构的变化。结果与模型组比较,桑银降糖胶囊大剂量、小剂量组大鼠血糖降低、血清胰岛素水平升高(P均<0.01),其中桑银大剂量组的降糖作用较桑枝颗粒组明显(P<0.01)。HE染色显示桑银大剂量组较模型组胰腺组织结构完好,细胞溶解、碎裂、浊肿、空泡样变等病理变化明显减少,胰岛数量及岛内细胞数量较多,结构清晰,淋巴细胞浸润减少。电镜结果显示桑银降糖胶囊可减轻糖尿病大鼠的肾脏、肝脏损伤。结论桑银降糖胶囊对STZ糖尿病大鼠有显著的降血糖作用,并对胰腺、肾脏、肝脏损伤具有一定的保护作用。

中药抗肿瘤的实验研究与临床治疗

实验研究证实，中药三龙丹对小鼠Ｓ－１８０肿瘤及肝癌实体瘤具有显著的抑制作用（Ｐ〈０．０２～０．０１）。Ｓ－１８０肿瘤及肝癌实体瘤抑瘤率平均分别为：环磷酰胺组５９．４５％与５４．８６％，三龙丹大剂量组６６．７４％与５３．６２％，三龙丹小剂组５６．０５％与４８．７２％，三次实验结果基本一致，重复效果稳定，病理组织检验提示，阴性对照组癌细胞生长活跃，呈片状分布，浸及脂肪结缔组织深达肌层。

桑银降糖胶囊对实验性糖尿病大鼠脂质过氧化物酶水平的影响

目的观察桑银降糖胶囊对实验性糖尿病大鼠脂质过氧化物酶水平的影响。方法用微量血糖测定法测定链脲霉素(STZ)实验性糖尿病大鼠实验前后各组空腹血糖浓度。用放免法测定血清胰岛素和C肽。用黄嘌呤—鲁米诺化学发光法测定血液超氧化物歧化酶(SOD)的活性。用硫化巴比妥酸(TBA)比色法测定血清丙二醛(MDA)的含量。用HE染色方法观察桑银降糖胶囊治疗前后胰腺、肝脏、肾脏的组织学变化。结果桑银降糖胶囊可升高糖尿病动物模型SD大鼠胰岛素(36.08±11.40μIU/ml)和C肽(0.10±0.04μIU/ml)的浓度,具有明显降糖(6.33±1.66)mmol/L作用,对糖尿病动物模型SD大鼠具有提高血液SOD的活性(591.00±53.03ug/g.HB),降低MDA水平的功效(6.3±0.85umol/L)。对糖尿病动物模型SD大鼠的胰腺、肝脏、肾脏等组织有改善作用。结论桑银降糖胶囊减少自由基对糖尿病动物模型SD大鼠的胰腺、肝脏、肾脏等组织的损伤并具有保护作用,纠正糖尿病动物模型SD大鼠的糖代谢紊乱,减少并发症的发生。

二苯硫酰卡巴腙胰岛染色法

胰岛移植是治疗Ⅰ型糖尿病的有效方法,获得大量纯净的胰岛是移植成功的前提。因成人胰腺来源困难,故多采用胚胎胰岛。我们参阅有关文献,将胰腺组织的胶原酶消化液,用二苯硫酰卡巴腙做胰岛染色,显微镜下分离胰岛,效果良好,报告如下。1 材料和方法1.1 材料二苯硫酰卡巴腙(DTZ)、胶原酶V型、RPMI1640培养液均为Sigma公司产。

链脲霉素对猪胚胎前胰岛作用的研究

将体外分离培养的猪胚胎前胰岛和大白鼠胚胎胰岛,分别放入含2.2mmol/L,4.4mol/L链脲霉素和无链脲霉素对照培养液中作用30min后,放入新鲜培养液中培养1周。经光镜检查证明,链脲霉素组大白鼠胚胎胰岛全部消失,对照组大白鼠胚胎胰岛保持半透明桔黄色完整结构。处理组和对照组猪胚胎前胰岛的形态学无显著变化,均呈半透明桔黄色,且对高浓度葡萄糖加氨茶碱的刺激有释放胰岛素的反应,体内试验证明,链脲霉素不影响移植在裸鼠体内的猪胚胎前胰岛的衍化发育及其逆转糖尿病的功能。本研究证明了链脲霉素对猪胚胎前胰岛无毒性作用,为胚胎前胰岛移植研究提供了新的实验模型。

桑银降糖胶囊在体外对猪胰岛细胞增殖及分泌功能的影响

目的观察桑银降糖胶囊对体外培养猪胰岛细胞分泌功能的影响。方法体外分离纯化猪胰岛细胞进行单层细胞培养,链脲霉素(STZ)处理后分别与桑银降糖胶囊及其组分桑叶多糖、牛磺酸、银杏黄酮等共同孵育24、48 h,用放射免疫法检测培养液中胰岛素、C肽水平;光镜下观察细胞形态变化;MTT法检测胰岛细胞增殖情况。结果与其他组分比较,桑银降糖胶囊可明显提高培养液中胰岛素、C肽水平,胰岛β细胞数目明显增多。结论桑银降糖胶囊可减轻STZ对胰岛β细胞的损伤,促进胰岛细胞增殖,并使损伤的胰腺恢复正常功能,增强胰岛素的分泌功能。

微囊胰岛移植对实验性糖尿病大鼠脂质过氧化物水平的影响

目的观察微囊化胰岛移植对实验性糖尿病大鼠脂质过氧化物水平的影响。方法设立正常对照组、模型组和移植组。移植组接受激囊化胰岛移植。结果移植组血糖降至711±1．28mmol／L．SOD活力为547．7±55．28μg／g．Hb，MDA含量为4．31±0．41μmol／L，模型组血糖仍大于16．67mmol／L以上，SOD活力为420±42．88μg／g．Hb，MDA水平为5.33±1．4μmol／L，两组相比有显著性差异（P＜0．01）。结论提示微囊保护异种移植胰岛免受排斥，使胰岛在受体内长期生存，受血糖调控释放胰岛素起治疗作用，而且也能减少自由基对组织的损伤，纠正受体的精代谢紊乱。

糖克丸降糖机理的实验研究

目的 :探讨中药糖克丸的降糖机理。方法 :手术切除胰腺法制备糖尿病实验犬模型。糖克丸为纯中药制剂。血糖测定用微量血糖测试仪。血清胰岛素水平和C肽测定均为实验室常规方法。结果 :胰腺完全切除组与大部切除组的犬血清胰岛素均降至敏感值以下 ,实验组用糖克丸灌喂后可使胰岛素水平恢复至 5 .9～ 9.19μIU/ml,血清C肽不随胰岛素的升高而升高 ,反而有降低趋势。结论 :糖克丸在ATP的辅助下 ,有可能促使外分泌腺和 /或导管细胞转分化成胰岛素表达的 β细胞。

中药三龙丹的药理研究

目的 探讨中药三龙丹抗肿瘤的药理作用及其机理研究。方法 体内抑瘤实验 :取大白鼠左前腋下接种W 2 5 6瘤种 0 .3ml/只 ,次日开始给药。阴性对照组给予生理盐水 ;阳性对照组给予环磷酰胺 ;中药组分别给予不同剂量的三龙丹药物。体外抑瘤实验 :将受试药物三龙丹稀释成 1∶10、1∶2 0、1∶40、1∶80、1∶16 0、1∶32 0、1∶6 40、1∶12 80的浓度 ,然后接种于多孔培养板内的HEL和NKM上 ,37℃、CO2 培养 ,观察细胞病变 ,计算抑瘤指数。三龙丹对SOD和MDA的影响 :取小鼠 30只 ,随机分成 3组 ,给药方法同体内抑瘤实验 ,连续给药 30天 ,然后每只小鼠摘眼球取血 ,用微量快速检测法测定SOD和MDA的含量。结果 实验表明 ,中药三龙丹对W 2 5 6肿瘤具有显著的抑制作用 ;该药在 1∶80药物浓度时 (最大抑瘤浓度 )抑制肿瘤靶细胞的效应最大 ;同时 ,还能明显提高小鼠血中SOD的活性和降低MDA低谢产物。结论 实验证实 ,中药三龙丹无论在体内还是体外均具有明显的抑瘤作用。

复方运舒擦剂药效学研究

目的 :探讨复方运舒擦剂对动物的药效作用。方法 :应用中药药理研究方法学 ,观察复方运舒擦剂对动物微循环、血液乳酸代谢、抗疲劳等影响。结果 :复方运舒擦剂具有改善微循环、消炎止痛、促进血液乳酸代谢、抗疲劳等功效。结论 :该药用于运动后保健和治疗 。