基因芯片技术在中药研究中的应用

基因芯片技术作为现代分子生物学研究的重要手段之一,在中药机制研究、不良反应研究、有效成分筛选及质量控制方面有着广泛的应用前景。本文针对近年基因芯片技术在中药研究方面的应用作一综述。

乙醇灭活法对结核分枝杆菌灭活及DNA提取的影响

目的探讨乙醇和热灭活对结核分枝杆菌的灭活效果以及对后续提取DNA质量的影响。方法分别采用100℃处理10 min和70%乙醇处理2 h两种方法对结核分枝杆菌培养物进行灭活,灭活处理后和未经灭活的对照培养物重新接种到L-J培养基,连续6周观察细菌是否生长;采用酚/氯仿抽提法提取结核分枝杆菌基因组DNA。结果两种方法灭活的菌株重新接种后均未见细菌生长。乙醇灭活后成功提取结核分枝杆菌基因组DNA,获得单一基因组DNA条带。结论乙醇灭活能有效杀灭结核分枝杆菌,对后续提取基因组DNA无明显影响。

黄芪、人参、西洋参提取物对心肌缺血犬心脏血流动力学的影响

目的:观察黄芪、人参、西洋参三味补气中药提取物对急性心肌缺血模型犬心脏血流动力学的影响。方法:将Beagle犬随机分为假手术组、模型组、对照组、黄芪组、人参组、西洋参组。采用结扎冠状动脉前降支法复制Beagle犬急性心肌缺血模型,经右颈总动脉逆行插管依法测量左心室功能。经十二指肠各组给予相应药物。于冠脉结扎15 min(药前)及药后60、90、120、180 min检测心肌收缩功能指标[左心室收缩期压力(LVP)、最大压力上升速度(+dp/dtmax)]、心肌舒张功能指标[左心室舒张期压力(LVEDP)、最大压力下降速度(-dp/dtmax)]、心脏泵血功能指标[心输出量(CO)、总外周阻力(TPR)]。结果:冠状动脉结扎后,模型组犬的LVP、±dp/dtmax、CO明显下降,LVEDP、TPR增加。三种中药提取物均可改善心肌缺血犬心肌舒缩功能,其中增加LVP、+dp/dtmax以黄芪、人参效果较好;降低心肌缺血犬的LVEDP,增加-dp/dtmax以西洋参效果较好;黄芪可增加心肌缺血犬的CO。结论:三味补气中药均可不同程度改善缺血心肌舒缩功能及心脏的泵血功能,但黄芪、人参长于改善缺血心肌的舒缩功能,西洋参长于改善心肌的舒张功能。

三味辛温归肺经中药对复合因素致肺阳虚大鼠肺功能的影响

目的观察豆蔻、紫苏叶、白芷3味辛温归肺经中药对复合因素致肺阳虚大鼠肺功能的影响。方法采用烟熏(外邪犯肺)+常温及冰水游泳(形寒劳倦)+服用冰水(内饮生冷)多因素复合造成肺阳虚大鼠模型。造模的同时ig给予豆蔻、紫苏叶、白芷水提取物,连续24 d。末次给药后,大鼠气管插管测量肺功能指标;取血测定血清内皮素(ET)、血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的量。结果豆蔻、紫苏叶及白芷水提取物均能在一定程度上减少呼气时间、一次呼吸周期时间、气道阻力,增加呼吸频率、每分通气量(VE)、呼气峰值流速(PEF)、呼气至最大流速时间与呼气时间之比(TPEF/TE)、吸入75%潮气量时吸气速度(IF75)、吸入75%潮气量时吸气速度与峰值流速之比(IF75/PIF)、呼出75%潮气量时呼气速度(EF75)、呼出50%潮气量时呼气速度(EF50)、呼出75%潮气量时呼气速度与峰值流速之比(EF75/PEF)、呼出50%潮气量时呼气速度与峰值流速之比(EF50/PEF),减少血清TXB2水平。结论豆蔻、紫苏叶、白芷水提取物均能不同程度调节肺功能指标,降低血清TXB2水平。

4组造模复合因素致肺阳虚小鼠模型的比较研究

目的:根据"形寒饮冷则伤肺""劳倦内伤而耗阳气",对烟熏、冰水游泳、服用冰水、服用冰他巴唑溶液等造模因素进行组合,比较4组造模复合因素对肺阳虚证小鼠模型的影响。方法:ICR小鼠,随机分为4个造模组,造模10 d。观测小鼠一般体征、抓力、自主活动,测定肺组织和血清丙二醛(MDA),、超氧化物歧化酶(SOD),计算心、肝、脾、肺、肾等脏器指数。结果:4个模型组小鼠均出现体重增长缓慢,自主活动减少,抓力降低,心、肺指数增加。其中3因素组合对体征以及肺组织和血清MDA,SOD的影响,优于2因素组合;复合造模因素中,增加冰泳(烟熏+冰泳、烟熏+冰泳+服用冰水、烟熏+冰泳+服冰他巴唑)优于服用冰水(烟熏+服用冰水),抓力下降、心肺指数升高更明显;烟熏+冰泳+服用冰水可能是最佳造模复合因素。结论:采用烟熏、冰水游泳、服用冰水、服冰他巴唑等2因素或3因素组合造模,小鼠均表现出不同程度的肺阳虚症状。其中3因素(烟熏+冰泳+服用冰水)造模更接近中医临床,这可能是形寒、劳倦与饮冷共同使然。