神经红蛋白突变体Tyr44Phe的制备、表征和稳定性研究

构建了突变体蛋白Tyr44Phe的基因,进行了蛋白的表达、分离纯化、谱学表征和稳定性研究.由电喷雾质谱所得突变体蛋白的分子量与理论值一致;UV-Vis吸收光谱、荧光光谱和圆二色光谱表明,Tyr44Phe的点突变虽没有改变血红素的六配位结构,但对血红素的构象有所影响.突变体蛋白的热、酸稳定性研究表明,定点突变降低了血红素与蛋白肽链之间的结合力,导致血红素易从疏水腔中脱出,说明Tyr44对蛋白的结构稳定性起一定的作用.

内源性超氧阴离子自由基介导的莱茵衣藻光系统Ⅱ蛋白组分损伤

选取野生型莱茵衣藻CC-125和过氧化氢酶缺失突变体CC-2913为研究对象,采用spintrapping-ESR方法通过光照莱茵衣藻类囊体膜捕获到了O2·-,并且在同样条件下也检测到了来源于O2·-歧化产生的H2O2。另据类囊体膜电泳实验结果:莱茵衣藻在生长过程中添加内源SOD抑制剂TCNE后,CC-2913类囊体膜光系统蛋白组分的损伤要比野生型CC-125更为严重。通过对上述O2·-与H2O2信号的对比分析可知,虽然O2·-不是造成类囊体膜光系统Ⅱ蛋白组分损伤的直接因素,但它可借助歧化产物H2O2造成光系统蛋白组分的损伤。