浙江省在蜱中检测到斑点热群——立克次体DNA片段

目的了解蜱、鼠中自然感染斑点热群立克次体的状况。方法用聚合酶链反应(PCR)检测鼠类脾脏和蜱类中的斑点热DNA片段。结果在金华市金东区捕获社鼠2只,黄毛鼠10只,黑线姬鼠4只,用PCR检测结果均为阴性。用PCR检测49只中华硬蜱,阳性8只,阳性率16.33%。结论初步认定浙江省存在斑点热病原,尚需进一步调查。

浙江省2002至2003年钩端螺旋体病预防和控制工作分析

目的探讨浙江省钩端螺旋体病(钩体病)流行规律,分析防制工作中存在的问题。方法用显微镜凝集实验(MAT)检测病人血清抗体。采集鼠肾、猪肾、牛中段尿、蛙肾、鸭肾分离培养病原体。结果2002年全省共发生钩体病59例,死亡1例,病例分布全省17个市(县),主要集中在衢州、丽水、台州(地)市,发病率为0.13/10万。2003年全省共发生钩体病20例,病例分布在金华、衢州、台州、丽水4个(地)市的8个县,发病率为0.04/10万。2002年解剖分离培养鼠肾299对、蛙肾620对、猪肾80对、鸭肾28对、牛中段尿54份,结果鼠肾阳性率为2.01%,蛙肾为1.61%,猪肾为1.25%。2003年共解剖分离培养鼠肾577对、蛙肾1070对、牛中段尿110份、猪肾127对、鸭肾40对,结果蛙肾阳性率为0.47%,其他均为阴性。结论钩体病防治工作仍然不能放松,尤其在洪涝灾害后应列为防制重点。

浙江省钩端螺旋体PCR检测方法建立与应用

目的:为更好的进行钩端螺旋体病监测,为预防措施提供依据。方法:建立PCR检测方法,进行灵敏度、特异性研究。探索钩端螺旋体PCR扩增DNA条件。对浙江省2006年分离菌11株进行PCR鉴定,对龙游、常山捕获的一百只鼠和一百只蛙肝、脾、肾标本在提取其DNA后进行PCR检测。结果:所建立PCR检测方法具备较高灵敏度和较好特异性。对2006年分离的钩体菌株进行的PCR鉴定结果与血清学鉴定结果相符。鼠和蛙肝、脾、肾标本进行PCR检测,PCR检测阳性率10%,钩体菌株培养分离率仅为1%。2χ=15.58,P<0.05有显著差异。测序及培养均能证实PCR检测结果具有特异性。结论:钩体PCR检测方法的建立能更加准确的反映野生动物自然带毒率。钩体PCR检测方法可推广应用。

浙江省在鼠中检测到埃立克体及无形体DNA片段并测序分析

目的:了解鼠中自然感染埃立克体及无形体的状况。方法:用巢式PCR扩增鼠中埃立克体属及嗜粒细胞无形体属16S rDNA的5′末端片段,对阳性产物克隆后测序。结果:在浙江省金华市金东区捕到鼠128只。在黄毛鼠中检到阳性4份,阳性率为3.125%,并对其进行克隆后测序。与Genbank上比对分析,三份与牛埃立克体相同基因区最为接近,属无形体科,无形体属。一份与反刍动物埃立克体相同基因区最为接近,属无形体科,埃立克体属。均为国内首次报道。结论:初步认为浙江省存在埃立克体及无形体病原。黄毛鼠可能为埃立克体及无形体宿主,尚需进一步调查。

浙江省在鼠形动物中检测到伯氏疏螺旋体

目的了解鼠形动物中自然感染伯氏疏螺旋体的状况。方法用巢式聚合酶链反应扩增鼠中的伯氏疏螺旋体5S^23S rRNA间隔区片段,对阳性产物进行测序。结果在浙江省金华市金东区捕获鼠形动物128只,在黄毛鼠、姬鼠、臭(鼠青)中共检测到阳性12份,阳性率分别为9.68%、14.28%和25.00%,并对其中2份进行测序分析,与伯氏疏螺旋体的法雷斯疏螺旋体相同,基因区间序列号分别为AB091447BvalaiOS115和DQ188933BvalaiQX13P25,相似率达100%。结论初步认为浙江省存在伯氏疏螺旋体病原。黄毛鼠、姬鼠、臭(鼠青)可能为伯氏疏螺旋体的法雷斯疏螺旋体宿主,尚需进一步调查。

金东区鼠类检出埃立克体及无形体DNA片段

目的了解金华市金东区某地鼠类自然感染埃立克体及无形体的状况。方法对当地监测捕获的多种鼠类取肝、脾脏器标本,用巢式PCR扩增无形体科16SrDNA的5’端片段。结果在184只鼠中,检出阳性6只,总阳性率为3.26%;其中黄毛鼠阳性率为4.12%(4/97),社鼠阳性率为4.17%(1/24),黑线姬鼠阳性率为4.35%(1/23)。经序列比对分析,4份与牛埃立克体相应片段最为接近,属无形体科,无形体属;1份与反刍动物埃立克体相应片段区最为接近,属无形体科,埃立克体属;1份与无形科新成员Ehrlichiasp.‘Ratusstrain’最为接近。结论在当地鼠类检出埃立克体及无形体DNA片段,提示可能存在埃立克体病自然瘦源地。

浙江省首次在蜱中检测到莱姆病螺旋体DNA片段

目的:了解蜱、鼠中自然感染莱姆病螺旋体的状况。方法:用PCR法检测鼠类脾脏和蜱类中莱姆病DNA片段。结果:在浙江省金华市金东区及丽水市青田县捕到蜱215只。分别在微小牛蜱和长角血蜱中各检到阳性1份,阳性率为0.93%。结论:初步认为浙江省存在莱姆病病原,尚需进一步调查和病原分离加以证实。

间接免疫荧光技术应用于狂犬病抗体IgG检测研究

目的 研究间接免疫荧光技术在狂犬病抗体中的应用。方法 由本中心研制狂犬抗原片和荧光血清,比较间接免疫荧光技术与酶标方法的效果。结果 间接免疫荧光技术检测狂犬病抗体特异性、稳定性良好、变异系数CV=4.9％。间接免疫荧光技术与ELISA同时检测,间接免疫荧光法阳性率为82.89％,ELISA法阳性率为40.48％。结论 间接免疫荧光法测定狂犬病抗体特异性、稳定性好。狂犬疫苗免疫后应用该技术检测抗体,确保免疫效果。

间接免疫荧光法检测浙江省输入性登革热疫情

目的检测浙江省登革热疫情,为预防措施的及时实施提供依据。方法用间接免疫荧光法(IFA)检测浙江省2003～2004年疑似登革热病人血清。结果在浙江省首次用IFA证实了输入性登革热的存在,发现了3次输入性登革热,其中包括一次暴发疫情。结论经IFA法检测,浙江省2003～2004年出现了登革热疫情。

间接免疫荧光技术检测狂犬病抗体IgG

目的:研究间接免疫荧光技术在检测狂犬病抗体IgG中的应用。方法:研制狂犬病抗原片和生产荧光血清,研究间接免疫荧光技术检测狂犬病抗体IgG的灵敏度、稳定性及实际应用效果。用研制的狂犬抗原片和荧光血清,比较间接免疫荧光技术与酶标检测狂犬病抗体的效果。结果:间接免疫荧光技术检测狂犬病抗体IgG是特异、稳定的,变异系数CV=4.9%。间接免疫荧光技术与ELISA同时检测狂犬病抗体,间接免疫荧光法阳性率为92.89%,ELISA法阳性率为40.48%。结论:间接免疫荧光法测定狂犬病抗体IgG特异性、稳定性好。狂犬疫苗免疫后应用该技术检测抗体,保证免疫效果。

2000年浙江省钩端螺旋体病预防和控制工作分析

目的 :探讨钩端螺旋体病 (简称钩体病 )流行规律 ,分析其存在问题。方法 :用MAT法检测病人、水鸭和蛙血清抗体 ;同时分离培养病原体。用夹夜法捕鼠 ,采集鼠肾、猪肾、牛中段尿、蛙肾和水鸭肾分离培养病原体。结果 :2 0 0 0年 1～ 12月 ,全省共发生钩体病 77例 ,死亡 3例 ,发病率为 0 .17/ 10万 ,病死率为 3 .90 % ,发病率比 1999年下降69.11% ,而病死率却比 1999年上升 14 1.5 6%。病例主要分布在衢州、丽水和台州市 (地 )的江山、三门、丽水、龙游、常山、遂昌等市 (县 )。衢州 (发病率为 1.45 / 10万 )、丽水 (0 .92 / 10万 )和台州市 (0 .2 6/ 10万 )的发病数占全省发病总数的93 .5 1%。病例主要分布在 7～ 10月 ,占全年总病例数的 84.42 % ,特别是 7～ 8月 ,占 5 4.93 % ,但是季节分布有分散趋势。职业以农民为主 ,占 88.3 1% ,其次为学生 ;年龄以 15～ 5 0岁为主 ,占 75 .3 2 % ;男女之比为 3 .0 5∶1。监测点共检测病人血清 2 3份 ,阳性 15份 ,阳性率为 65 .2 2 %。病人血培养 16份 ,全部阴性。全省鼠密度为 1.64 % ,鼠种构成以黑线姬鼠为优势种 ,占 3 6.11% ,其次为小家鼠 (占 2 7.0 8% )和褐家鼠 (占 2 0 .14 % )。解剖培养鼠肾 14 4对 ,阳性 3对 ,鼠带菌率为2 .0 8% ,菌株分别为爪哇群。

浙江省蜱媒疾病检验方法建立应用

目的建立开展莱姆病、埃利希体病、斑点热常规监测的有效手段,达到初步掌握当地病原分布情况。方法建立了伯氏疏螺旋体病原分离枝术,埃利希体、莱姆病间接免疫荧光技术,和埃利希体、莱姆病、斑点热PCR技术,在山区农民中开展莱姆病螺旋体检测,收集蜱标本开展莱姆病DNA片段检测。结果首次用间接免疫荧光在山区农民中检测到莱姆病抗体,阳性率4.1%(6/148);用PCR的方法在蜱标本中检测到莱姆病DNA片段,阳性率0.93%(2/215)。结论浙江省可能存在有莱姆病疫源地。需进一步调查。

间接免疫荧光技术在狂犬病抗体检测中的应用

狂犬病是一种严重危害人民生命安全的传染病。狂犬病疫苗(下称狂苗)对狂犬病暴露者的保护作用是显著的,但并非完全。朱智勇等首次在省内用免疫荧光法作狂苗免疫后的抗体测定。我们以此法观察了海盐129例狂犬病暴露者狂苗免疫后抗体水平,取得了较满意的结果。材料1.抗原片:由省站疫源科制备。用 CVS 国际标准固定毒感染 Vero 细胞,灭活点片而成。2.羊抗人

东阳市钩端螺旋体病暴发流行期间病人的血清学检测

1989年8月上旬,东阳市发生钩端螺旋体病大规模流行,至8月21日共上报钩端螺旋体病863例,同时又上报有流行性出血热141例。由于该市是出血热疫源地区域之一,故这次究竟是一种疾病流行?还是两种疾病同时流行?我们从8月13日开始,在现场对这些病例采用了一系列实验室手段,进行了血清学检测,结果确定了本次流行的疾病是钩端螺旋体病,排除了兼有出血热流行。

MICRO-IFA技术应用于斑疹伤寒抗体IgG检测

我省尚未见右实验方法证实的斑疹伤寒病例报道。为此,我们把微量间接免疫荧光试验(MICROIFA)应用于斑疹伤寒特异性抗体IgG测定,证实了浙江省宁海市有斑疹伤寒病人,现将结果报告如下。