化学发光法检测低水平HBsAg性能及临床应用评价

目的评估化学发光法检测低水平乙型肝炎病毒表面抗原性能及临床价值。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测西安市中心医院2010年5月～2012年6月间门诊及住院的8408例患者的乙型肝炎病毒表面抗原患者，初筛出少见模式标本438例。再次对初筛标本进行化学发光法检测，化学发光检测过程中采用乙型肝炎表面抗原低水平标准物质进行质量控制和性能评估，检出的低水平乙型肝炎表面抗原标本再进行中和确认试验。结果438例初筛标本经化学发光法分23次不同批次检测出27例低水平HBsAg分布于4种乙型肝炎模式中，其中包含21例原ELISA检测为HB—sAg阴性标本。测定中标准物质阳性符合率和阴性参考品符合率均为100％，化学发光法与ELISA法两者符合率为94．7％，化学发光法和ELISA法检测HBsAg的最低灵敏度分别为0．1μg／L，0．4μg／L。结论化学发光法产品性能指标符合临床要求。灵敏度高、特异性好的化学发光法联合酶联免疫吸附试验有助于低水平HBsAg的检出，对低水平HBsAg的人群的诊断、治疗、流行病学研究有重要意义。

免疫印迹法检测儿童幽门螺杆菌感染及其分型

目的回顾性分析2011年11月至2012年12月本院469例儿童幽门螺杆菌感染及其分型结果。方法采用免疫印迹法进行血清学分析,检测结果采用χ2检验。结果 469例共检测出阳性结果86例,阳性率为18.3%(86/469),其中Ⅰ型62例,占总阳性72.1%(62/86);Ⅱ型24例,占总阳性27.9%(24/86)。男37例,女49例,按年龄分三组,年龄组间阳性率和分型进行χ2检验,P<0.05。结论免疫印迹方法特别适用于检测儿童幽门螺杆菌感染及其分型。

促凝剂对乙型肝炎病毒实时荧光定量检测影响的评估

目的评估促凝剂对乙型肝炎病毒实时荧光定量检测的影响。方法随机采集2011年10月至2012年3月到西安市中心医院门诊的41例患者每人2管血样,分别为无添加剂普通管和促凝剂管,检测分离血清时间及效果。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒DNA,结果对数值采用SPSS11.5统计软件进行处理,并对促凝剂管标本进行精密度和抗干扰性能评价。结果促凝剂管分离血清平均时间为(4.73±0.86)min,普通管为(14.46±2.27)min,两组数据经配对t检验,差异有统计学意义(P<0.01);促凝剂管乙型肝炎病毒DNA结果对数平均值为(3.86±2.99),普通管组对数平均值为(3.85±2.96),两组经配对t检验,差异无统计学意义(P>0.05),促凝剂管具有高精密度和抗干扰性能。结论促凝剂对乙型肝炎病毒实时荧光定量检测结果准确性没有影响,可减少报告周转时间,值得临床推广和应用。

低水平乙型肝炎病毒表面抗原S区序列分析

目的对低水平乙型肝炎病毒表面抗原进行病毒S区基因分析。方法利用套式PCR法(Nested PCR)特异性扩增乙型肝炎病毒DNA的S区,对PCR扩增产物直接进行DNA序列分析,测序结果经Genotyping软件分型并与美国GeneBank中基因序列进行BLAST比对。结果 37例低水平乙型肝炎病毒表面抗原标本中,成功扩增并测序32份,其余5份扩增产物因不满足测序要求无法进行S区序列分析,32份成功测序标本经Genotyping分型,B型20例,C型12例,分别与GeneBank中收录的AF100309、AB014381同源性最高;血清学分型18例为adr,10例为adw,3例为ayw,1例为ayr,并发现21例S区核酸序列发生点突变,其中15例突变不会引起编码抗原决定簇氨基酸突变,为无义突变,而其他6例点突变均可引起抗原决定族编码的氨基酸的改变,从而导致表面抗原结构改变。结论对低水平乙型肝炎病毒表面抗原患者S区序列研究将为低水平乙型肝炎发病机制、流行病学以及个体化治疗奠定理论基础。