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人促红细胞生成素基因在家蚕体中的高效表达
被引量:
7
1
作者
张传溪
姜育蕾
+1 位作者
胡萃
吴祥甫
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第1期46-50,共5页
人促红细胞生成素(EPO)是一种调控红系干细胞增殖、分化和成熟的糖蛋白激素。将合成的EPOcDNA插入杆状病毒转移载体pBlueBacⅢ,使其置于Ph基因强启动子控制之下,获得了转移载体pBlueBacEPO。将pBlueBacEPODNA与野生型BmNPVDNA共转染BmN...
人促红细胞生成素(EPO)是一种调控红系干细胞增殖、分化和成熟的糖蛋白激素。将合成的EPOcDNA插入杆状病毒转移载体pBlueBacⅢ,使其置于Ph基因强启动子控制之下,获得了转移载体pBlueBacEPO。将pBlueBacEPODNA与野生型BmNPVDNA共转染BmN细胞,经空斑纯化,获插入EPOcDNA的重组病毒rBmNPVEPO。经Sonthern杂交和PCR扩增鉴定证明人EPO基因已正确组建于BmNPV的预定位置。将重组病毒rBmNPVEPO穿刺接种5龄幼虫和蛹,收集感染第3~5d的幼虫血淋巴和3~65d蛹血淋巴。用ELISA检测幼虫血淋巴中EPO表达量高达62800u/mL,蛹血淋巴中表达量达74000u/mL。Westernblot结果显示幼虫血淋巴和蛹血淋巴均有一条明显的免疫杂交带,分子量均约为26kD。用TF1细胞对幼虫表达产物进行了生物活性测定,每毫升血淋巴中EPO活性约为63000u。
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关键词
hEPO
杆状病毒-昆虫表达系统
家蚕
基因表达
下载PDF
职称材料
棉铃虫核型多角体病毒Hind III-K片段的核苷酸序列及其分析
2
作者
张传溪
孙建新
+2 位作者
姜育蕾
胡萃
吴祥甫
《中国病毒学》
CSCD
1998年第2期144-149,共6页
测定了棉铃虫(Helicoverpaarmigera)核型多角体病毒(HaSNPV)基因组DNA的HindIIK片段核苷酸序列。该片段全长3255bp,含可编码大于40个氨基酸残基的多肽的开放阅读框(ORF)15个...
测定了棉铃虫(Helicoverpaarmigera)核型多角体病毒(HaSNPV)基因组DNA的HindIIK片段核苷酸序列。该片段全长3255bp,含可编码大于40个氨基酸残基的多肽的开放阅读框(ORF)15个,包括多角体蛋白(ph)基因编码区3′端489bp和蛋白激酶HavPK基因编码区801bp。在ph和HavPK两基因之间鉴定出一个可编码412个氨基酸残基的ORF1236,转录方向与ph和HavPK基因相反。同源分析表明,ORF1236与谷实夜蛾(Helicoverpazea)核型多角体病毒(HzSNPV)的ORF8推导的蛋白氨基酸序列有95.9%同源性,与苜蓿丫纹夜蛾(Autographacalifornia)核型多角体病毒(AcMNPV)ORF1629只有24.8%同源性,但三者均含有二组由多个脯氨酸残基串联而成的特征基序。
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关键词
棉铃虫
核型多角体病毒
片段
核苷酸序列
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职称材料
题名
人促红细胞生成素基因在家蚕体中的高效表达
被引量:
7
1
作者
张传溪
姜育蕾
胡萃
吴祥甫
机构
中国科学院上海生物化学研究所
浙江大学应用昆虫学研究所杭州
浙江大学应用昆虫学研究所
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第1期46-50,共5页
基金
国家高技术研究与发展计划项目部分内容
文摘
人促红细胞生成素(EPO)是一种调控红系干细胞增殖、分化和成熟的糖蛋白激素。将合成的EPOcDNA插入杆状病毒转移载体pBlueBacⅢ,使其置于Ph基因强启动子控制之下,获得了转移载体pBlueBacEPO。将pBlueBacEPODNA与野生型BmNPVDNA共转染BmN细胞,经空斑纯化,获插入EPOcDNA的重组病毒rBmNPVEPO。经Sonthern杂交和PCR扩增鉴定证明人EPO基因已正确组建于BmNPV的预定位置。将重组病毒rBmNPVEPO穿刺接种5龄幼虫和蛹,收集感染第3~5d的幼虫血淋巴和3~65d蛹血淋巴。用ELISA检测幼虫血淋巴中EPO表达量高达62800u/mL,蛹血淋巴中表达量达74000u/mL。Westernblot结果显示幼虫血淋巴和蛹血淋巴均有一条明显的免疫杂交带,分子量均约为26kD。用TF1细胞对幼虫表达产物进行了生物活性测定,每毫升血淋巴中EPO活性约为63000u。
关键词
hEPO
杆状病毒-昆虫表达系统
家蚕
基因表达
Keywords
Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus,human erythropoietin gene,expression,Insect cells,silkworm larvae and pupae
分类号
TQ92 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
棉铃虫核型多角体病毒Hind III-K片段的核苷酸序列及其分析
2
作者
张传溪
孙建新
姜育蕾
胡萃
吴祥甫
机构
浙江农业大学应用昆虫学研究所
中国科学院上海生物化学研究所
出处
《中国病毒学》
CSCD
1998年第2期144-149,共6页
基金
国家自然科学基金
文摘
测定了棉铃虫(Helicoverpaarmigera)核型多角体病毒(HaSNPV)基因组DNA的HindIIK片段核苷酸序列。该片段全长3255bp,含可编码大于40个氨基酸残基的多肽的开放阅读框(ORF)15个,包括多角体蛋白(ph)基因编码区3′端489bp和蛋白激酶HavPK基因编码区801bp。在ph和HavPK两基因之间鉴定出一个可编码412个氨基酸残基的ORF1236,转录方向与ph和HavPK基因相反。同源分析表明,ORF1236与谷实夜蛾(Helicoverpazea)核型多角体病毒(HzSNPV)的ORF8推导的蛋白氨基酸序列有95.9%同源性,与苜蓿丫纹夜蛾(Autographacalifornia)核型多角体病毒(AcMNPV)ORF1629只有24.8%同源性,但三者均含有二组由多个脯氨酸残基串联而成的特征基序。
关键词
棉铃虫
核型多角体病毒
片段
核苷酸序列
Keywords
Helicoverpa armigera , Nuclear polyhedrosis virus, 3255bp HindIII K fragment, Nucleotide sequence, ORF1236
分类号
S476.14 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人促红细胞生成素基因在家蚕体中的高效表达
张传溪
姜育蕾
胡萃
吴祥甫
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2000
7
下载PDF
职称材料
2
棉铃虫核型多角体病毒Hind III-K片段的核苷酸序列及其分析
张传溪
孙建新
姜育蕾
胡萃
吴祥甫
《中国病毒学》
CSCD
1998
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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