帕金森病脑脊液生物标志物的研究进展

帕金森病是CNS一大常见的慢性退行性疾病,目前帕金森病的诊断主要依赖于临床特征,这阻碍了对帕金森病的早期识别和干预。研究表明CSF中存在与帕金森病病理密切相关的生物标记物。这些生物标志物都是极具潜力的早期诊断预测因子,可用于帕金森病和非典型帕金森综合征的鉴别诊断以及帕金森病相关临床症状的进展监测。本综述结合近几年的研究成果,对帕金森病CSF生物标志物的研究进展进行阐述和讨论。

涤纶织物氧化退浆和染色一浴法工艺研究

采用过碳酸钠和四乙酰乙二胺为氧化退浆剂,优化了涤纶织物的退浆工艺。探讨了氧化退浆和染色的一浴二步法和一浴一步法工艺,研究了过碳酸钠、四乙酰乙二胺用量和pH值对分散红AF-R上染率和K/S值的影响,比较了4种染色工艺染色性能的差异,为涤纶织物短流程加工提供了应用基础。

安吉灾后竹子恢复与重建成效的调研报告

08年雪灾给安吉县竹林业带来了极大损失，为进一步了解当地竹林业灾后恢复重建情况，我调研小队赴安吉县开展了专题调查，通过走访当地竹衣户及企业，对竹林业受灾情况、重建成效、及竹林业的进一步发展情况有了深入了解。

不同激素给药方法对自身免疫性胰腺炎患者的远期疗效观察

目的观察不同激素给药方法对自身免疫性胰腺炎(AIP)患者的远期疗效。方法 60例自身免疫性胰腺炎患者随机分为低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组各20例,三组患者分别给予20,30,40mg/d的强的松初始治疗。比较三组疗效。结果三组患者治疗后的AST、ALT、γ-GT和TB/DB水平均较治疗前降低组间比较,差异无统计学意义(P>0.05);三组患者治疗后血AMY、尿AMY、CAMY-CCR%、Tbg-2、SAA和CRP阳性率均较治疗前下降,组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论低、中、高的起始剂量治疗类固醇类激素对自身免疫性胰腺炎治疗效果无明显影响。考虑到激素的副作用,提示低起始剂量激素更具临床应用价值。

供应链关系与融资约束对我国高端装备制造业生产率的影响

高端装备制造业是国家综合实力的重要指标和未来国际竞争的关键领域,生产率是反映其技术和管理水平的关键指标。文中利用高端装备制造业上市公司2014-2020年的数据,研究供应链关系、融资约束对高端装备制造业生产率的影响,结果显示:供应商集中度对高端装备制造业生产率具有正向促进作用,供应商集中度越高,企业全要素生产率就越高;而客户集中度对高端装备制造业生产率具有显著的抑制作用,客户集中度越高,全要素生产率就越低。融资约束对高端装备制造业生产率具有显著的抑制作用,融资的约束程度越高,全要素生产率越低。研究结论将为推动高端装备制造业产业高质量发展提供政策支持。

“双减”背景下小学英语智慧课堂构建模式研究

在“融慧与创新”时代大背景下,“智慧课堂”活动的开展及其课程活动模式的构建,对于新形势下的教与学双方来说,同时提出了更新挑战和更大考验。在小学启蒙教育这一阶段,教师应努力通过各种方式打造“智慧课堂”学科模式,激励学生全面发展和健康成长。那什么是“智慧课堂”?如何在“双减”背景下开展智慧课堂教学活动呢?本文立足小学英语学科活动视角,简述一些策略性探究之论。

全缘叶绿绒蒿的花内热量来源和温度调节功能

为探究全缘叶绿绒蒿(Meconopsis integrifolia)的花内热量来源和温度调节功能,该研究选择在全缘叶绿绒蒿的巴朗山居群,对其进行遮阴及去瓣处理,并采用红外热像仪监测全缘叶绿绒蒿的花内微环境温度日变化及花器官温度,用环境温度计监测环境温度。结果表明:(1)太阳照射显著提高全缘叶绿绒蒿花内微环境温度和花器官温度,全缘叶绿绒蒿的热量主要来源于太阳辐射。花内微环境昼夜温差显著低于环境昼夜温差,全缘叶绿绒蒿的花具有温度调节功能。(2)白天环境温度较高时,太阳照射显著提高全缘叶绿绒蒿花内微环境温度,花瓣会降低花内微环境温度;夜间环境温度较低时,花瓣闭合会提高花内微环境温度;花瓣闭合运动降低了花内微环境昼夜温差,产生了保温效果。(3)在太阳照射下,花器官温度差异显著,雌雄蕊温度显著高于花瓣温度,且花器官温度由雌蕊柱头中心点向外递减,全缘叶绿绒蒿能有效调控花器官各部位的温度。综上认为,全缘叶绿绒蒿的花内热量来源于太阳辐射,主要通过花瓣闭合运动降低花内微环境昼夜温差并能在太阳照射下调节各花器官的温度实现温度调节功能。

优化小学英语阅读指导“三策略”

在小学英语阅读教学中,教师要善于对学生进行有效的英语阅读指导,以此促进他们英语阅读能力的提升。具体而言,要创设良好的英语阅读环境、重视英语多种阅读方法指导、开展多种英语阅读活动,以此促进学生英语阅读能力的提升。

“双减”背景下小学英语课外作业优化设计研究

在学校教育中,各类课外作业的设计与提出、完成与评讲等现象,是学科活动体系中的有机组成,是对课堂教学环节的自然延续。其根本目的和主要任务在于对教与学情况的及时反馈,通过与之相应的调整与优化,更好激励与引领后续教与学活动,为促进学与用结合、教与学相长注入源源不断的活力元素。在整个作业活动环节,优化设计是首当其冲的重要环节,对于引领与促进“教学思做”来说,不仅作用很大,而且影响很深。如何抓好并抓实这一“牛鼻子”环节呢?这是一项不容忽视的艺术性实践课题。“蒙以养正,圣功也。”本文立足小学英语活动视角,试简述一些实践与探究之论。

小学道德与法治教学培养学生公共意识的实践研究

在当前的教育背景下,小学道德与法治课程承载着培养学生公共意识的重要使命。课程通过深入探讨“自我认识”“社会互动”和“国家与公民”三大核心主题,旨在引导学生深入思考自身与社会的紧密关系,理解并积极参与社会的民主管理。公共参与素养是个体融入社会、实现个人价值的关键能力,它要求个体妥善处理与他人、集体、社会和国家之间的关系,积极履行社会责任,实现个人与社会的和谐共生。对于小学生而言,提升公共参与素养至关重要,这不仅有助于学生深入理解国家和社会的民主管理原则,更能让他们深刻体验民主决策的意义,认识到民主监督的重要性。

巧用提问艺术,点燃智慧课堂

提问的有效性不仅影响着教师对课堂教学效果的观测、反馈和调控,更是关乎学生对知识的掌握。有效地提问能让学生产生怀疑、困惑的探索心理,这种心理能有效驱使学生主动积极地思考,搜寻已有的信息,大胆探索未知的内容,不断尝试解决问题,让学生的＂学＂和＂思＂相融合。但是当前小学英语课堂教学中教师对课堂提问的认知存在着种种的误区,如：提问千篇一律,枯燥乏味;提问停留在浅层次,不能有效启迪思维;提问只求标准答案,而缺乏求异,影响学生的语用能力的发展……影响了提问的课堂教学效果。本文中笔者尝试结合具体的课堂教学案例谈谈巧用课堂提问的艺术和策略，奏响小学英语高效课堂的乐章。

中美贸易摩擦对中国进口商品市场的影响——以水果市场为例

随着中美贸易摩擦愈演愈烈,对两国的商品市场都造成了不小的冲击,尤其对中国的进口市场产生了一定量的影响。对于危机形成前的两国市场状况要进行详细的了解,并进行对比,从而得出他们的差异;要从中观察出中美贸易摩擦的诱因,从而想出一系列应对措施;提出对于创伤后的进口水果市场如何修复,并从这次贸易摩擦之中吸取教训。

菘蓝查尔酮异构酶基因的克隆与体外酶活鉴定

查尔酮异构酶是高等植物黄酮类化合物生物合成中的关键限速酶,决定了植物体内黄酮类化合物的产生。该研究从菘蓝的不同部位中提取RNA,反转录为cDNA,并设计带有酶切位点的特异性引物,克隆得到1个菘蓝查尔酮异构酶基因,命名为IiCHI。该基因全长756 bp,含有1个完整的开放阅读框,编码251个氨基酸。通过同源比对显示IiCHI与拟南芥Arabidopsis thaliana的CHI蛋白亲缘关系较近,并且具有查尔酮异构酶典型的活性位点,系统发育树分析显示IiCHI归属于Ⅰ型CHI。构建原核表达载体pET28a-IiCHI并进行诱导表达,纯化后获得IiCHI的重组蛋白。体外酶活性检测实验显示IiCHI重组蛋白可以把柚皮素查尔酮催化生成柚皮素,而不能把异甘草素催化生成甘草素。实时荧光定量PCR结果显示菘蓝中IiCHI在地上部分的表达量明显高于地下部分,其中地上部分在花中表达量最高,叶与茎次之,在地下部分的须根、根的皮部与木质部几乎不表达。该研究为进一步探讨菘蓝中查尔酮异构酶的功能及其在黄酮类化合物的生物合成研究中提供了参考。

催化根皮素生成三叶苷的来源于穿心莲的糖基转移酶UGT74L2及其酶学研究

根皮素-4’-O糖基转移酶(P4’-OGT)是三叶苷生物合成途径中最后一步关键酶,可在体外催化根皮素生成三叶苷,但目前仅有少数P4’-OGT被鉴定。本研究利用已报道的苹果中P4’-OGT(MdPh-4’-OGT)序列对穿心莲转录组进行筛选,获得两条同源基因UGT74L2和UGT74L3。系统发育树分析表明,UGT74L2和UGT74L3与其他物种中已鉴定功能的UGT74家族聚为一类。体外酶促反应显示,UGT74L2可特异性催化根皮素生成三叶苷,而UGT74L3无产物产生。通过Ni-NTA亲和色谱纯化获得可溶性UGT74L2重组蛋白,以根皮素为底物进行酶促动力学研究。研究结果表明,UGT74L2酶促反应最适温度为40℃,最适pH值为8.0(Tris-HCl体系)。Ca^(2+)、Mn^(2+)、Co^(2+)对UGT74L2的活性有一定的抑制作用,而Mg^(2+)可提高UGT74L2的活性,其他金属离子对UGT74L2活性无明显影响。酶促动力学参数测定结果显示,K_(m)值为29.84μmol·L^(-1),kcat值为0.02 s^(-1),k_(cat)·K_(m)^(-1)值为572.6 mol^(-1)·s_(-1)。同源建模、分子对接结合突变实验结果显示,底物结合口袋中的多个氨基酸与其催化活性密切相关。本研究从穿心莲中鉴定了一条新的P4’-OGT,可为活性天然产物三叶苷的生物合成提供糖基化元件,也可为其他植物糖基转移酶的功能挖掘提供参考。

菘蓝木脂素糖基转移酶体外催化根皮素的酶学研究

体外酶促反应发现前期克隆的菘蓝木脂素糖基转移酶UGT236(属于UGT71B家族)能高效催化根皮素生成根皮苷。UGT236与苹果中的P2′GT同源性较高,同属UGT71家族。该研究将重组质粒pET-28a-MBP-UGT236转入大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞,通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达,并通过纯化获得较高纯度的UGT236蛋白,以根皮素为底物,研究其酶学性质。结果显示,UGT236最适反应温度为40℃,最适反应pH为8(Na_(2)HPO_(4)-NaH_(2)PO_(4)体系)。金属离子影响实验表明,Ni^(2+)、Al^(3+)对UGT236有一定抑制作用,Fe^(2+)、Co^(2+)、Mn^(2+)3种离子均能提高UGT236的活性,而Mg^(2+)、Ca^(2+)、Li^(+)、Na^(+)、K^(+)对UGT236的活性没有影响。酶动力参数实验测得根皮素的K_(m)为61.03μmol·L^(-1),K_(cat)为0.01 s^(-1),K_(cat)/K_(m)为157.11 mol^(-1)·s^(-1)·L,UDPG的K_(m)为183.6μmol·L^(-1),K_(cat)为0.01 s^(-1),K_(cat)/K_(m)为51.91 mol^(-1)·s^(-1)·L。通过同源建模、分子对接筛选出部分可能的活性位点,对其进行突变及活性检测鉴定了3个关键的活性位点Glu391、His15、Thr141,而位点Phe146则和产物的多样性有关。该研究发现菘蓝中木脂素类糖基转移酶UGT236能催化根皮素生成根皮苷,对其酶学性质进行了探究,通过结构预测、分子对接和突变验证发现了几个关键的氨基酸残基,为根皮素糖苷产物的专一性和多样性催化提供了一定依据,可为后续通过改造获得高效和专一性催化的人工糖基转移酶元件提供参考。

菘蓝木脂素类糖基转移酶基因IiUGT349克隆及功能表征

对菘蓝转录组数据进行系统挖掘,获得110条假定糖基转移酶。利用原核表达和体外酶促体系,获得了1条新的木脂素糖基转移酶基因,暂命名为IiUGT349。活性检测发现IiUGT349能催化落叶松树脂醇生成落叶松树脂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷和落叶松树脂醇-4′-O-β-D-葡萄糖苷。生物信息学分析表明,IiUGT349的开放阅读框(ORF)为1 401个碱基,编码467个氨基酸,编码的蛋白质理论等电点为5.96,相对分子质量为52.77 kDa。系统发育树分析显示IiUGT349和已报道的木脂素糖基转移酶同源性较低,归属于UGT90家族,可能代表了一类新的木脂素糖基转移酶。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果显示IiUGT349在根、茎、嫩叶和叶中均表达,其中在茎中表达量最高。体外酶促反应显示IiUGT349对落叶松树脂醇最佳反应时间为12 h,最佳反应温度为45℃。亚细胞定位发现IiUGT349定位于植物细胞质和细胞核中。该研究克隆得到了1条新的属于UGT90家族的木脂素糖基转移酶IiUGT349,为深入研究此关键酶基因功能和菘蓝木脂素糖苷生物合成途径奠定了基础,对木脂素糖苷活性成分的合成生物学研究有重要意义。