脑出血患者脑水肿与精氨酸加压素相关性研究

目的探讨高血压脑出血患者血浆精氨酸加压素（AVP）水平与继发性脑水肿的相关性。方法以高血压脑出血患者为研究对象，定时定量采血，采用放射免疫法测量血中AVP浓度，定时复查头颅cT，测量水肿范围，并观察意识状态。结果脑出血后脑水肿1—2h即可出现，并呈进行性加重，1—3d达高峰，持续约2W，早期血浆AVP含量与脑水肿的严重程度及脑水肿持续时间均呈正相关。结论血浆AVP含量与脑出血继发性脑水肿的发生发展存在着密切联系。

化疗性痛动物模型的建立及发病机制探讨

目的利用长春新碱(Vincristine)或紫杉醇(Paclitaxel)建立化疗性痛大鼠模型并探讨该模型的发病机制。方法利用微量释放泵连续给与SD大鼠一定量的长春新碱(Vincristine)或紫杉醇(Paclitaxel),而对照组给与相当量的溶剂。在注射前和注射后的连续时间点观察大鼠的痛觉行为学变化;当痛觉阈值降到最低点时,对处理组和对照组大鼠脊髓背角进行针对星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和小胶质细胞OX42的免疫荧光染色,并鞘内给药抑制胶质细胞观察镇痛作用,同时取出两组大鼠的新鲜脊髓背角组织进行Western blot分析。结果长春新碱组注射后第6 d出现了明显的机械和热痛觉过敏,到注射后第8 d痛觉阈值降到最低点,以后基本维持在此水平;而紫杉醇组第4 d出现了明显的机械和热痛觉过敏,第12 d痛觉阈值降到最低点,以后基本维持在此水平。与对照组相比,处理组脊髓背角GFAP和OX42的染色密度出现了显著增强,鞘内给予针对星形胶质细胞的特异性抑制剂L-α-氨基己二酸(LAA)和小胶质细胞的特异性抑制剂米诺环素(minocycline)能起到有效镇痛作用。另外处理组脊髓细胞因子白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和磷酸化丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)类分子磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38(p-p38)的表达显著上调。结论我们成功建立了化疗性痛模型,脊髓背角胶质细胞的激活有可能参与了化疗性痛的形成。

miR-144-3p分子在胶质瘤中的表达

目的本文研究了小分子核糖核酸-144-3p(miR-144-3p)分子与胶质瘤发生发展的相关性。方法本实验所需胶质瘤组织均来自于西京医院神经外科胶质瘤患者,共50例;利用人源神经元细胞系HCN-2(human cortical neuron-2,HCN-2)、U251胶质瘤细胞系、U87MG胶质瘤细胞系等。通过细胞培养及miRNA转染,细胞及组织RNA提取,反转录多聚酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR),实时定量PCR对miR-144-3p分子在胶质瘤中的表达进行检测。结果 miR-144-3p分子在人和小鼠染色质定位高度保守;miR-144-3p分子在胶质瘤患者不同组织中的表达差异;miR-144-3p分子在不同病理学分级胶质瘤中的表达差异;miR-144-3p分子在不同人源胶质瘤细胞系中的表达差异,其表达量与患者预后相关性。结论 miR-144-3p分子在哺乳动物中高度保守,与患者的预后有关。

褪黑素通过抑制NLRP3减轻MPP^(+)诱导的HT22细胞焦亡/炎性损害

目的 研究褪黑素(MT)预处理抑制NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)水平,减轻神经细胞焦亡,改善帕金森病症状的作用及分子机制。方法 正常培养的HT22细胞记为空白对照组(Sham组);细胞进行10 mmol/L 1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP^(+))处理24 h,制成帕金森病细胞模型后,记为MPP^(+)组;先用5μmmol/L MT预处理6 h后,再造模后,记为MPP^(+)+MT组;各组细胞处理后经培养24 h后取材。采用CCK8检测细胞死亡变化;采用荧光免疫组化法和Western-blotting方法检测NLRP3分布和表达变化;使用标准ELISA试剂盒检测IL-1β和IL-18表达变化。结果 与Sham组相比,MPP^(+)组神经细胞大量死亡,NLRP3在存活细胞的胞膜和胞浆中高表达,相应的炎症因子IL-1β和IL-18也大量释放,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。相较于MPP^(+)组,MPP^(+)+MT组细胞存活率升高,细胞中NLRP3染色阳性率降低,表达量也降低,相应的IL-1β和IL-18表达量也降低,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MT可有效抑制NLRP3表达和炎症因子的释放,减轻神经细胞焦亡,从而减轻MPP^(+)造成的HT22细胞损伤。

依达拉奉在以氯吡格雷为基础治疗急性脑梗中的作用

目的观察依达拉奉在以氯吡格雷为基础治疗急性脑梗的方案中的作用。方法选取我院2016年1月至2017年5月收治的83例急性脑梗患者作为研究对象,按照随机数字表法将其分为对照组(n=41)与观察组(n=42)。对照组单用氯吡格雷,观察组在对照组的用药基础上加用依达拉奉联合治疗,对比两组治疗效果及凝血功能。结果治疗后,两组患者的NIHSS评分较治疗前降低,且观察组低于对照组(P<0.05);观察组m RS评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组患者的血浆比黏度、全血高切黏度、纤维蛋白原、血细胞容积均优于治疗前与对照组(P<0.05)。结论依达拉奉联合氯吡格雷治疗急性脑梗患者疗效显著,能有效改善患者神经功能缺损及凝血功能,提高其生活质量,值得推广应用。

叶酸通过NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路对HT22细胞拟帕金森损伤作用的研究

目的探讨叶酸对小鼠HT22细胞拟帕金森(PD)损伤产生的影响。方法将小鼠HT22细胞作为研究对象,随机分为对照组、模型组、叶酸组及治疗组4组。采用CCK-8、LDH、TUNEL以及免疫荧光试验检测叶酸对MPP+诱导的细胞损伤的活性影响以及NOD样受体蛋白3(NLRP3)荧光表达的影响;采用Western免疫印迹和qPCR实验检测叶酸对MPP+诱导细胞损伤后NLRP3、凋亡相关微粒蛋白(ASC)、Caspase-1表达的影响;利用ELISA检测叶酸对MPP+诱导细胞损伤后白细胞介素(IL)-18和IL-1β表达的影响;最后采用Western免疫印迹检测NLRP3抑制剂CY-09对MPP+诱导细胞损伤后ASC、Caspase-1、IL-18和IL-1β表达的影响。结果MPP+诱导HT22细胞引起拟PD损伤,CCK-8、LDH、TUNEL实验检测结果显示叶酸可显著缓解损伤引起的细胞活性的降低和凋亡细胞的增加;免疫荧光试验检测结果显示叶酸可降低损伤后细胞中NLRP3荧光强度的升高;Western免疫印迹和qPCR试验检测结果显示叶酸可降低NLRP3、ASC、Caspase-1在蛋白水平和mRNA水平的升高;ELISA检测结果显示,叶酸治疗可显著缓解损伤后细胞内IL-18和IL-1β的分泌;最后采用Western免疫印迹检测显示CY-09可以阻断损伤后细胞内ASC、Caspase-1、IL-18和IL-1β蛋白水平的升高。结论叶酸通过降低IL-18和IL-1β表达保护MPP+致HT22细胞拟PD损伤,潜在的保护机制可能与NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路密切相关。