对大鼠高脂血症模型分型的探讨

目的:利用脂肪乳剂灌胃法和高脂饲料喂养法建立大鼠高脂血症动物模型,结合临床高脂血症分型的依据对其血脂水平进行对比研究,为更合理的使用高脂血症动物模型提供依据。方法:采用无特定病原体Wistar大鼠,雄性,180～220g,30只,按体重随机分为3组,分别给予普通饲料、每100克体重2ml脂肪乳剂灌胃和高脂饲料,分别在第0天和第14天检测血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)。结果:脂肪乳灌胃组的血清TC、TG、LDL-c较对照组升高,有统计学意义;高脂饲料组的血清TC、LDL-c较对照组升高,有统计学意义;TG较对照组有所下降,有统计学意义。结论:2种方法都可建立大鼠高脂血症模型,脂肪乳灌胃法建立的动物模型适合应用于高胆固醇血症、混合型高脂血症、高甘油三酯和低高密度脂蛋白血症的研究;高脂饲料喂养法建立的动物模型适合应用于单纯性高胆固醇血症的研究,不适合用于混合型高脂血症、高甘油三酯和低高密度脂蛋白血症的研究。

鲜驴奶的保健功效研究

目的:研究鲜驴奶对小鼠免疫功能的影响;及鲜驴奶体外抑制结核杆菌生长作用。方法:应用环磷酰胺制备免疫低下小鼠模型,以不同剂量鲜驴奶作为受试物灌胃20d,研究鲜驴奶对小鼠脾脏及胸腺指数、抗体分泌细胞功能、血清溶血素水平、脾脏淋巴细胞转化功能等免疫指标的影响;按照《结核病诊断细菌学检验规程》以覆盖法研究鲜驴奶体外抑制结核杆菌生长作用。结果:鲜驴奶高剂量组可以增加血清溶血素含量并可提高小鼠脾细胞抗体分泌细胞功能;大剂量(0.4、0.5ml)驴奶脂肪抑菌效果明显。结论:鲜驴奶对免疫力低下小鼠的免疫功能具有一定的增强作用;鲜驴奶脂肪在体外具有抑制结核杆菌生长的作用。

新疆昆仑雪菊水提液对大鼠血脂的影响

采用昆仑雪菊水提液灌胃大鼠,以探讨其对大鼠血脂水平的影响。将60只健康成年SPF级SD大鼠随机分为6组,每组10只。试验前及实验期第28天眼眶采血检测大鼠血清中血脂4项指标:血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)与低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。试验结束时处死大鼠并采集大鼠脏器,制作肝组织切片观察雪菊水提液对各组大鼠的肝组织形态变化的影响。试验前各组大鼠的血脂4项、体重指标均无显著差异,使用昆仑雪菊水提液灌胃高脂造模大鼠后,高、中、低3个剂量组与高脂模型组比,TC含量分别降低了39.0%(P<0.01),30.5%(P<0.01),32.6%(P<0.01);LDL-C指标分别降低了40.3%(P<0.01),31.0%(P<0.05),30.8%(P<0.05);经过统计学分析与正常对照组相比:高脂模型组肝组织切片脂肪空泡明显增多(P<0.01),昆仑雪菊干预三个剂量组与高脂模型组肝组织切片比较,脂肪空泡显著减少(P<0.05)。分析表明,昆仑雪菊水提液可以降低SD高脂大鼠模型血脂4项指标中的TC、LDC-L的值,且能显著减少SD大鼠肝脏的脂肪细胞的数量,说明其具有降血脂的功效。

大鼠肝缺血再灌注损伤对心脏能量代谢和结构的影响及其机制

目的:探讨肝缺血再灌注损伤对心脏能量代谢和结构的影响及其可能的发生机制。方法:健康雄性Wistar大鼠48只,随机分为对照组、缺血30min组(I组)及缺血30min再灌注即刻组、2h组、4h组和6h组(I/R组、I/R2h组、I/R4h组和I/R6h组),每组8只。用偶氮显色法测定血清中的内毒素,用放射免疫法测定心肌组织胰岛素和胰岛素抗体,取心肌制备组织匀浆测丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO),乳酸含量。结果:在肝缺血再灌注损伤过程中,内毒素在I组和I/R组达到高峰,随着再灌注时间的延长逐渐下降,但仍高于对照组(P<0.05)。I组及I/R各组MDA的含量明显高于对照组,在I/R2h组、I/R4h组、I/R6h组差别更为明显(P<0.05);再灌注各组MPO活性明显高于对照组、I组(P<0.05);随着再灌注时间的延长,心肌组织中乳酸含量明显增加(P<0.05),但在I/R6h组呈下降趋势(P<0.05);胰岛素的含量在I/R4h组和I/R6h组明显下降(P<0.05);而胰岛素抗体在各组间无显著差异(P>0.05)。结论:肝缺血再灌注损伤过程中,肠源性内毒素吸收入血及肝脏解毒功能的降低所致的内毒素血症可能是引起心脏能量代谢和结构改变的始动环节。

db/db2型糖尿病模型小鼠肠道多形拟杆菌实时荧光定量PCR标准品制备方法的比较研究

目的比较研究db/db 2型糖尿病模型小鼠肠道多形拟杆菌(Bacteroides thetaiotaomicron)实时荧光定量PCR 2种标准品制备方法。方法收集2型糖尿病小鼠db/db模型组和db/m对照组肠道内容物,同时以多形拟杆菌ATCC29148为标准菌株,提取微生物DNA,用16SrRNA V6区多形拟杆菌引物,采用实时荧光定量PCR标准品制备中标准菌株法和正常组高阳性法2种标准品制备方式进行定量检测,比较2种方法的差异性。结果标准菌株法与正常组高阳性法测定db/m对照组和db/db模型组小鼠肠道多形拟杆菌的数量分别为(5.23×106±2.30×106)、(1.52×107±3.23×106)和(5.23×106±2.25×106)、(1.45×107±3.39×106),与db/m对照组相比,db/db模型组多形拟杆菌数量多,差异有统计学意义(P<0.05);标准菌株法与正常组高阳性法对检测多形拟杆菌的差异无统计学意义(P>0.05)。结论实时荧光定量PCR的标准品制备中标准菌株法与正常组高阳性法均可检测出较多的多形拟杆菌,并且2种检测方式都可以对肠道菌群进行检测。

大鼠肝缺血再灌注损伤时血清内毒素的变化及对心功能的影响

目的：探讨肝缺血再灌注损伤时内毒素变化对心功能的影响及其可能的发生机制. 方法：健康雄性Wistar大鼠48只随机分为对照组、缺血30 min组（Ⅰ组）及缺血30 min再灌注即刻、2 h、4 h和6 h组（I/R及I/R2、4、6 h 组）,每组8只,采用BL-420生物信号采集系统测定各组心功能[包括心率（HR）、左室收缩压（LVSP）、左室舒张末期压力（LVEDP）、左室内压最大上升/下降速率（±dp/dtmax）],采用偶氮显色法测定血清中的内毒素水平. 结果：在肝缺血再灌注损伤过程中,Ⅰ组、I/R组HR明显低于对照组（P＜0.05）,随着再灌注时间的延长呈上升趋势,但与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）;I/R6 h组LVSP 、±dp/dtmax明显低于对照组（P＜0.05～0.01）,LVEDP明显高于对照组（P＜0.01）;Ⅰ组和I/R组内毒素水平达到高峰,随着再灌注时间的延长逐渐下降,但仍高于对照组（P＜0.05）. 结论：肝缺血再灌注损伤过程中,肠源性内毒素吸收入血及肝脏解毒功能的降低所致的内毒素血症是引起心功能改变的始动环节之一.

油酸致大鼠ARDS过程心肌TNF-α、Bax、Bcl-2的动态变化

目的:观察油酸致大鼠ARDS过程中心肌表达的TNF-α及凋亡基因Bax、Bcl-2 mRNA的变化。方法:64只健康Wister大鼠采用油酸(Oleic acid,OA)法复制急性呼吸窘迫综合征(ARDS)模型,分为对照组(C组)及油酸2 h(OA2 h)、4 h(OA4 h)、6 h组(OA6 h)。观察不同时间点心功能(左室±dp/dtmax、LVSP)、肺功能(血气、肺湿/干)、心肌TNF-α、Bax、Bcl-2 mRNA表达的变化。结果:各OA组PaO2均低于C组,肺湿/干(W/D)均高于C组;与C组比较,各OA组LVSP、左室±dp/dtmax逐渐降低,各OA组心肌TNF-αmRNA的表达随时间延长呈增强趋势;Bax/Bcl-2 mRNA与C组相比呈升高趋势。结论:油酸型ARDS并发心功能障碍机制中,可能有TNF-α及Bax、Bcl-2的参与。

新疆昆仑雪菊水提液对大鼠血压的影响

目的:本试验采用昆仑雪菊水提液灌胃大鼠,以探讨其对大鼠血压水平的影响。方法:将50只健康成年自发性高血压大鼠(SHR)随机分为五组,每组10只。分为SHR模型组、降压药物组(替米沙坦)、雪菊灌胃高、中、低剂量组,所有大鼠均采食正常饲料。使用昆仑雪菊水提液对SPF(无特定病原体)级自发性高血压大鼠(Spontaneously hypertensive rats,SHR)灌胃高、中、低三个剂量组,试验期42d,检测试验前后SHR的收缩压的变化。结果:试验开始前各组血压无明显差异(p>0.05),从试验第2周到第5周与SHR模型组相比,各组血压即有降低,降压药物组的收缩压降低最为明显(p<0.01),高、中、低三个剂量组分别降低15.6%、10.1%、8.8%。试验前各组体重无明显差异(p>0.05),试验开始后与SHR模型组相比降压药物组体重降低最为明显(p<0.01)。结论:昆仑雪菊水提液对SHR大鼠降低了SHR大鼠的尾动脉收缩压,显示其具有降血压的功效,但雪菊各活性成分对血脂、血压的影响需要进一步研究,本研究为昆仑雪菊保健品研发奠定了生理生化基础。

db/db2型糖尿病小鼠的肠道、门脉血中LPS水平与血糖的相关性分析

目的:探讨LPS水平与2型糖尿病血糖相关性。方法:采用db/db 2型糖尿病小鼠db/db组和对照组db/m,收集门脉血、结肠组织并取匀浆液,用酶联免疫法(ELISA)测定肠道、门脉血中脂多糖的水平;用血糖仪测血糖值。结果:db/db模型组与db/m组相比,肠道LPS水平高(P<0.05),门脉血中LPS水平高(P<0.05),肠道比门脉血中LPS水平高(P<0.05),FPG是高的(P<0.05),结肠、门脉血中LPS分别与血糖成正相关(r=0.72,P<0.01;r=0.71,P<0.01)。结论:LPS水平与2型糖尿病的血糖有关,可为糖尿病的机制的研究提供有力的依据。

新疆昆仑雪菊水提液对大鼠血压的影响

目的：本试验采用昆仑雪菊水提液灌胃大鼠，以探讨其对大鼠血压水平的影响。方法：将50只健康成年自发性高血压大鼠（SHR）随机分为五组，每组10只。分为SHR模型组、降压药物组（替米沙坦）、雪菊灌胃高、中、低剂量组，所有大鼠均采食正常饲料。使用昆仑雪菊水提液对SPF（无特定病原体）级自发性高血压大鼠（Spontaneously hypertensive rats，SHR）灌胃高、中、低三个剂量组，试验期42d，检测试验前后SHR的收缩压的变化。结果：试验开始前各组血压无明显差异（p〉0.05），从试验第2周到第5周与SHR模型组相比，各组血压即有降低，降压药物组的收缩压降低最为明显（p〈0.01），高、中、低三个剂量组分别降低15．6％、10．1％、8．8％。试验前各组体重无明显差异（p〉0.05），试验开始后与SHR模型组相比降压药物组体重降低最为明显（p〈0.01）。结论：昆仑雪菊水提液对SHR大鼠降低了SHR大鼠的尾动脉收缩压，显示其具有降血压的功效，但雪菊各活性成分对血脂、血压的影响需要进一步研究，本研究为昆仑雪菊保健品研发奠定了生理生化基础。

不同动物油脂对大鼠血糖血脂及血液相关因子的影响研究

研究羊油、猪油、牛油、马油4种油脂对大鼠血糖、血脂及血液相关因子的影响研究。130只雄性健康SD大鼠随机分为对照组、羊油脂组、猪油脂组、牛油脂组和马油脂组共5组。各油脂组再分为高(2mL/100g体重)、中(1mL/100g体重)、低(0.5mL/100g体重)剂量3个灌胃组,对照组灌胃纯净水(1mL/100g体重)。灌胃56d后,测定各组动物体重、内脏脂肪重量、血糖(GLU)、血脂4项〔高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)〕的变化以及脂代谢相关血液因子〔血浆胰岛素(INS)、瘦素(LEP)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)〕的变化。结果表明,与对照相比,4种油脂对大鼠的体重、LEP、NO影响不明显(P>0.05);4种动物油脂的高剂量组以及猪油脂和马油脂的中剂量组均能显著增加内脏脂肪的重量(P<0.05);羊油脂中剂量组、马油脂高剂量和中剂量组的GLU值均极显著升高(P<0.01);羊油脂高剂量组HDL-C水平显著升高(P<0.05),猪油脂高剂量组HDL-C水平极显著升高(P<0.01);牛油脂高剂量组LDL-C水平显著升高(P<0.05);牛油脂和马油脂的各剂量组TC水平均极显著升高(P<0.01);仅羊油脂高剂量组TG水平显著升高(P<0.05);马油脂的高、中剂量组的血浆INS水平极显著降低(P<0.01);羊油脂和猪油脂的各剂量组MDA水平均极显著升高(P<0.01);牛油脂和马油脂的各剂量组SOD水平均极显著升高(P<0.01);4种油脂对大鼠的体重、血浆LEP、血浆NO没有明显影响;灌服猪油脂对大鼠GLU水平影响不明显;灌服高剂量羊油脂可明显升高大鼠血液HDL-C和TG水平;猪油脂主要表现为升高HDL-C水平;而牛油脂和马油脂各剂量组则可极显著升高血浆总胆固醇。羊油脂和猪油脂均能升高大鼠的MDA水平;牛油脂和马油脂均能升高大鼠的SOD水平,推测牛油脂和马油脂具有抗氧化的作用。

多次采血对Wistar大鼠脏器系数的影响

目的研究不同时间间隔经眼眶静脉丛多次采血后,对雄性Wistar大鼠重要脏器系数的影响。方法实验组分别间隔3 d、7 d、10 d,经眼眶静脉丛采血,每次采血1 mL,共采3次。对照组于实验组最后一次采血时采血一次,采血1 mL。每次采血前称量体重,于最后一次采血后将大鼠处死,取心脏、肝脏、肾脏、脾脏、胸腺,称量脏器重量,计算脏器系数。结果间隔3 d多次采血,大鼠的肝、肾系数差异具有显著性(P<0.05),间隔7 d、10 d多次采血,大鼠的各脏器系数差异无显著性。结论间隔3 d多次采血对大鼠的肝、肾系数有影响,间隔7 d、10 d多次采血对各脏器系数均无影响。

两种大鼠肝癌模型制作方法的对比研究

目的采用Walker-256细胞,分别使用两种方法建立Wistar大鼠肝癌模型并进行对比研究。方法将30只雄性Wistar大鼠随机分为肿瘤组织研磨组、肿瘤细胞腹水悬液组、空白对照组。肿瘤组织研磨组:将Walker-256细胞接种于Wistar大鼠腋下,待肿瘤组织长出大约1cm时,将肿瘤组织取出,将肿瘤组织研磨,离心,弃去上清液,留试管下层白色肿瘤细胞进行肝脏接种;肿瘤细胞腹水悬液组:将Walker-256细胞接种于Wistar大鼠腹腔,传代2代后收集腹水,离心,弃去上清液,留试管下层白色肿瘤细胞进行肝脏接种;空白对照组:取0.9%生理盐水进行肝脏接种。结果剖检结果:肿瘤组织研磨组剖检可见大鼠肝脏出现0.2～0.5cm菜花样的占位性瘤体;肿瘤细胞腹水悬液组剖检可见大鼠肝脏出现1～2cm菜花样的占位性瘤体,组织切片显微镜下观察两组模型均可见肝癌细胞,在形态和排列上没有差别。肿瘤组织研磨组的肝小叶比较完整,肿瘤细胞腹水悬液组的肝小叶基本破坏。结论采用Walker-256细胞的肿瘤组织研磨液和肿瘤细胞腹水悬液均可建立Wistar大鼠肝癌模型;肿瘤细胞腹水悬液制作的肝癌模型的瘤体生长速度大于肿瘤组织研磨组;肿瘤细胞腹水悬液组的肝脏的损伤更为严重。

不同间隔采血对大鼠血常规的影响

目的探讨雄性Wistar大鼠间隔不同时间经眼眶静脉丛采血3次后，其红细胞计数、白细胞计数及白细胞分类计数等变化。方法实验组分为1d采血3次，间隔3d、7d、10d、14d各采血1次，共采血3次等5组，每组各10只。于各组最后一次采血后手工计数红细胞、白细胞及分类计数白细胞。对照组（每组各10只）于相应实验组最后一次采血时同时采血检测相关指标。结果1d采血3次对大鼠红细胞总数、白细胞总数有明显影响（P〈0．05），间隔3d对大鼠白细胞总数有影响俨〈0．05），其他各组各指标均无显著影响（P〉0．05）。白细胞分类计数见环形核粒细胞且占粒细胞比例较大。结论1d采血3次会造成大鼠贫血，间隔3d采血产生明显应激反应。问隔7d、10d，14d多次采血均不会对大鼠血常规造成明显影响。

高脂膳食诱导肥胖大鼠的瘦素水平分析

目的:研究高脂膳食诱导对肥胖大鼠瘦素水平的影响。方法:将50只雄性Wistar大鼠随机分为高脂膳食组和正常对照组,分别用高脂饲料和基础饲料喂养8周,观察体质量变化,第八周末测定并比较血脂和血清瘦素水平。结果:本次研究高脂膳食诱导肥胖大鼠的体质量、血清总胆固醇和瘦素水平均显著高于正常对照组。结论:高脂膳食诱导的肥胖大鼠易产生瘦素抵抗,并伴有一定程度的血脂代谢紊乱。

高脂饲料诱导肥胖及肥胖抵抗大鼠的瘦素、胰岛素水平

目的:探讨高脂饲料肥胖诱导大鼠的瘦素、胰岛素水平与肥胖抵抗的关系。方法:将50只雄性Wistar大鼠随机分为肥胖诱导组和正常对照组,分别喂以高脂饲料和基础饲料8周,观察体脂含量的变化,第8周末根据体重增加量筛选出膳食诱导肥胖(DIO)组大鼠和膳食诱导肥胖抵抗(DIO-R)组大鼠,采用酶法测定血脂4项,酶联免疫法测定瘦素和胰岛素水平并进行比较。结果:高脂饲料喂养导致肥胖组和肥胖抵抗组大鼠的血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、瘦素和胰岛素水平均显著高于正常对照组,也使肥胖组大鼠体重显著高于肥胖抵抗组与正常对照组大鼠,肥胖抵抗组大鼠体重和正常对照组比较没有差异。结论:高脂饲料诱导肥胖抵抗大鼠不易产生瘦素抵抗和胰岛素抵抗,但伴有一定程度的血脂代谢紊乱。

多形拟杆菌对糖尿病模型小鼠的影响

目的研究多形拟杆菌(BT)干预糖尿病模型小鼠后对血糖、体重和C肽的影响。方法 (1)用四氧嘧啶(200 mg/kg腹腔注射)制备糖尿病模型小鼠,并分成四组:空白组(n=10)、空白给菌组(n=10)、四氧嘧啶糖尿病模型组(n=11)和模型给菌组(n=11),15 d。(2)BHI血琼脂培养基培养ATCC 29148标准菌株,比浊法测定混悬菌液数量。(3)用多形拟杆菌菌液干预空白给菌组和模型给菌组小鼠,观察15 d中四组小鼠的体重、空腹血糖水平的变化;实时荧光定量PCR测定小鼠肠道内多形拟杆菌的数量;运用酶联免疫法(ELISA)测定血清中C肽的水平。结果 (1)给予菌悬液后,空白给菌组与空白组相比,BT在第3天就可以定植并维持到第15天。与模型组相比,模型给菌组在第15天时可以定植;(2)线性回归相关性分析显示,肠道内多形拟杆菌与体重呈负性相关(r=-0.70,P<0.05);与空腹血糖(FPG)呈正性相关(r=0.71,P<0.05);与C肽呈负性相关(r=-0.62,P<0.05);与胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)呈正性相关(r=0.55,P<0.05);与胰岛素分泌指数(HOMA-IS)呈负性相关(r=-0.43,P<0.05)。结论 (1)外源性灌胃给予多形拟杆菌可以在肠道内定植。(2)肠道内多形拟杆菌的数量变化与糖尿病有相关性。