TaqMan探针双重荧光聚合酶链式反应技术检测食源性沙门氏菌和志贺氏菌

目的建立TaqMan探针双重荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测食源性沙门氏菌和志贺氏菌的方法。方法通过比对沙门氏菌和志贺氏菌的基因组序列,选择同源性高、保守性好的区域设计特异性引物和探针,经过引探筛选、浓度调试等一系列优化,建立了食源性沙门氏菌和志贺氏菌双重荧光PCR核酸检测方法,并对其特异性、质粒最低检出限、菌液敏感性、重复性、稳定性以及实际样品进行了验证。结果该方法与大部分食源性致病菌无交叉反应,特异性强;沙门氏菌和志贺氏菌质粒的最低检出限可达5 copies/μL,沙门氏菌菌液敏感性为1.0×10^(2) cfu/mL,志贺氏菌菌液敏感性10 cfu/mL;质粒和菌液核酸梯度的批内和批间变异系数均在0.177%~1.958%之间,小于5.0%,具有较强的稳定性;标准曲线相关系数(r^(2))均大于0.999。结论本研究成功建立了一种TaqMan探针双重荧光PCR技术同时检测食源性沙门氏菌和志贺氏菌的方法,该方法扩增时间短,只需要30 min即可,而且特异性强、稳定性好,可用于疑似沙门氏菌和志贺氏菌污染样品的检测,为食品安全的快速检测提供技术支撑。

基于实时荧光聚合酶链式反应快速检测食源性大肠埃希氏菌O157:H

目的 建立一种快速、灵敏、特异、高效的食源性大肠埃希氏菌O157:H7型实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法。方法 针对大肠埃希氏菌O157:H7型的O抗原特异基因rfbE保守区域设计特异性引物和探针,合成基因片段绘制标准曲线,在菌液基因组DNA和质粒双层面调试优化以完成方法的初步建立。其后,对该方法的特异性、敏感性、重复性等进行全面的质量评估验证。结果 该方法特异性100%;基因组DNA检测敏感性为7.11×10^(2)fg/μL;纯培养物水平检测敏感性为1.0×10^(2)CFU/mL;重复性变异系数在0.10%~1.00%之间;标准曲线相关系数r^(2)为0.9994。结论 成功建立了一种性能良好的大肠埃希氏菌O157:H7型实时荧光探针PCR快速检测方法,该方法具有灵敏度高、特异性强、扩增时间短,仅为35 min的特点,可用于疑似大肠埃希氏菌O157:H7型污染样品的快速诊断检测。

国内外粮食中真菌毒素采样标准对比及分析

真菌毒素广泛存在于粮油等食品中,危害人类和动物的健康。由于粮油等食品中真菌毒素的污染分布不均匀,因此科学、合理、经济的采样(扦样)计划尤为重要。梳理了国内外粮食的采样标准,并对每个标准适用范围、是否适合真菌毒素、各个采样环节规定进行比较分析。国际采样标准就不同的食品类别或真菌毒素(污染物)的各个采样环节的要求进行了系统阐述,涵盖了粮食中真菌毒素的采样要求。目前国内没有系统的针对粮食中真菌毒素采样标准。通过对国内外相关标准的研究,为提出符合我国种粮散户多、运输工具规格不同、大中小粮仓乃至高大平房仓等不同储运环节粮食中真菌毒素的科学、有效、公正的采样方案提供了一定的参考。

恒温荧光扩增法快速检测食品中金黄色葡萄球菌

目的建立恒温荧光扩增法快速检测食品中的金黄色葡萄球菌.方法基于重组酶介导链替换核酸扩增技术针对金黄色葡萄球菌nuc基因的保守区域设计特异性引物和探针,建立了检测金黄色葡萄球菌的恒温荧光扩增检测方法,并评价其敏感性、特异性、重复性和符合率.结果该方法可在常温(37~42℃)实现核酸快速扩增,20 min即可完成反应;敏感性较高,金黄色葡萄球菌的检出限为9.12×10^(2) CFU/mL;特异性强,与大肠埃希氏菌O157∶H7、大肠埃希氏菌、单核细胞增生李斯特菌、鼠伤寒沙门氏菌、副溶血性弧菌的核酸均无交叉反应;不同稀释度菌液检测阈值时间的变异系数为5.78%~5.93%,重复性较好;采用该方法与荧光聚合酶链反应方法同时对50份临床样品进行检测,总符合率均为100%,差异不显著(P>0.05).结论本研究建立的金黄色葡萄球菌恒温荧光扩增检测方法具有敏感性高、特异性强、时间短的特点,可用于金黄色葡萄球菌的快速检测.

石墨炉原子吸收法测定面粉中镉不确定度的评定

通过对石墨炉原子吸收光谱法检测面粉中镉含量的不确定度进行评定,对数学模型中各个参数进行不确定度来源分析,分别对A类不确定度和B类不确定度进行评定。按照国际通用方法对各不确定度分量合成和扩展,得到石墨炉原子吸收法测定面粉中镉的不确定度评定。结果表明:石墨炉原子吸收法测定面粉中镉含量的不确定度的主要来源是体积分量和标准曲线绘制。

抑制电导-离子色谱法同时测定肉制品中亚硝酸盐和硝酸盐

建立了一种灵敏、快速的同时测定肉制品中亚硝酸盐和硝酸盐的抑制电导-离子色谱分析方法。样品经超声提取后,以DIONEX IonPac AS19(4mm×250mm)色谱柱分离,用DIONEX EG40淋洗液发生器自动淋洗,采用梯度洗脱方式,以抑制电导检测器进行检测。实验表明,硝酸盐和亚硝酸盐的方法检出限(3S/N)为0.6mg/kg和0.8mg/kg,在0.1～50ug/ml范围内呈良好线性关系,回收率为98.4%和96.5%,重复性(RSD)为2.8%和3.2%。本方法灵敏度高,重复性好,可用于肉制品中的亚硝酸盐和硝酸盐的检测。

超高效液相色谱法同时测定食品中5种添加剂

采用超高效液相色谱法同时测定食品中的安赛蜜、山梨酸、苯甲酸、脱氢乙酸和糖精钠的含量。不同食物样品经过前处理后,分析物经ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱分离,以甲醇-含0.02mol·L^(-1)乙酸铵的乙酸溶液(pH 5.17)为流动相进行梯度洗脱,采用二极管阵列检测器,检测波长为230nm。结果表明:5种食品添加剂在4min内可以完全分离,线性范围均为0.10~50.0mg·L^(-1),检出限在1.0~3.4μg·L^(-1)之间。加标回收率在90.1%~106%之间,测定值的相对标准偏差(n=7)在1.7%~4.9%之间。

产业区采暖系统改造探讨

介绍了新技术产业区采暖系统的改造方案 ,分析了系统改造后可取得的经济效益和社会效益 。

抑制电导—离子色谱法同时测定肉制品中亚硝酸盐和硝酸盐

建立了一种灵敏、快速的同时测定肉制品中亚硝酸盐和硝酸盐的抑制电导-离子色谱分析方法。样品经超声提取后,以DIONEXIonPacAS19(4mm×250mm)色谱柱分离,用DIONEXEG40淋洗液发生器自动淋洗,采用梯度洗脱方式,以抑制电导检测器进行检测。实验表明,硝酸盐和亚硝酸盐的方法检出限(3S/N)为0.6mg/kg和0.8mg/kg,在0.1～50μg/mL范围内呈良好线性关系,相关系数分别为0.9994和0.9989,回收率为98.4%和96.5%,重复性(RSD)为2.8%和3.2%。本方法灵敏度高,重复性好,可用于肉制品中的亚硝酸盐和硝酸盐的检测。

浅析热水锅炉的防腐问题

阐述了集团公司热水锅炉防腐工作的现状，分析了存在问题的原因，提出改进措施。

蒸汽参数变化对汽轮机运行状况的影响

分析了蒸汽参数变化对汽轮机运行状况的影响。

白酒中氨基甲酸乙酯含量检测及在不同香型白酒中的含量分析

采用SPE结合气相色谱-质谱联用(GC-MS)法对从河南省各地市抽取的1882批白酒的EC进行检测。结果表明,所检测的白酒中EC的检出率为52.3%,最大值1680μg/kg,平均含量为49.9μg/kg。7.6%的白酒中EC含量超过国际常用蒸馏酒的EC限量标准(150μg/kg)。针对不同香型白酒进行分析,EC平均含量最高的是酱香型白酒,为92.1μg/kg;其次是董香型白酒,为91.4μg/kg;第三是陶香型白酒,为84.0μg/kg,之后依次是凤香型白酒63.7μg/kg,浓香型白酒56.7μg/kg。此研究期望能为我国食品安全部门制定白酒中EC的限量标准提供有效的参考。

河南地区市售白酒中邻苯二甲酸酯类塑化剂含量检测结果与分析

目的:了解河南省市售白酒中邻苯二甲酸二正丁酯(DBP)与邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)的污染状况。方法:按照《河南省食品安全风险监测计划》和GB5009.271-2016《食品安全国家标准食品中邻苯二甲酸酯的测定》对河南省销售的白酒进行检测。结果:共检测了白酒样品641份,其中DBP检出率为25.7%,个别样品的检出含量高达16.6mg/kg,是最大残留量(0.3mg/kg)55.3倍;DEHP均未超出最大残留量(1.5mg/kg)。结论:河南省市售白酒整体处于安全水平,一些白酒存在一定程度的DBP污染问题,可能由生产、储存、运输等环节引入,需引起重视加强监测,潜在的健康危害和风险需进一步评估。

2017年河南省抽检样品中甜蜜素调查结果与分析

目的:了解2017年河南省抽检食品中甜蜜素使用现状并分析评估。方法:在全省18个地市随机抽取了18个食品大类共5 010批食品样品,按照食品安全国家标准GB 5009.97-2016对样品中的甜蜜素进行检测。检测结果参照食品安全国家标准GB2760-2014进行判定,采用SPSS22对数据进行统计分析。结果:甜蜜素在各类食品中的整体检出率偏高,其中方便食品中的检出率最高为53.95%。结论:甜蜜素是一种普遍使用的食品添加剂,建议居民健康饮食,同时建议相关监管部门可加强方便食品、速冻食品、调味品、罐头以及酒类等高检出率、高超标率食品类别的监管。

夏季食品酸价、过氧化值的检测与调查

通过对夏季食品中的酸价、过氧化值的测定和分析,可以对夏季食品中的酸价以及过氧化值两项指标的具体情况进行调查。通过对比和分析发现,糕点面包类的超标率在6%左右,腌腊肉类的超标率高达60%,食用植物油类的超标率达14%左右,烘炒类的食物超标率高达40%。所以我国居民应改变长期以来养成的饮食习惯,尽量少吃或者是不吃一些腌腊肉类的食品,对夏季以及黄梅季的部分烘炒类产品要谨慎购买。

荧光探针法金黄色葡萄球菌核酸检测方法的建立

基于荧光探针法建立一种快速、灵敏的金黄色葡萄球菌核酸检测方法。针对金黄色葡萄球菌nuc基因设计特异性引物和探针,制备质粒标准品和菌液核酸标准品,完成方法建立。然后,对该方法的特异性、敏感性、重复性、实用性等性能进行评价。结果显示,该方法特异性100%;质粒标准品敏感性为1 copy/μL;菌液标准品敏感性为1000 CFU/mL;重复性变异系数为0.69%;多种基质加标样品均能有效检出。成功建立了一种快速、灵敏的金黄色葡萄球菌核酸检测方法,可用于疑似金黄色葡萄球菌污染样品的快速核酸检测。

加工对不同小麦制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的影响

以脱氧雪腐镰刀菌烯醇平均含量为3 223.6μg/kg的超标小麦为原料,经加工处理,制成全麦粉、麸皮、全麦粉干面筋、小麦粉干面筋,分别测定其脱氧雪腐镰刀菌烯醇含量,进行对比分析后发现:麸皮中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的含量达到9 431.2μg/kg,超标8.4倍,极显著高于全麦粉;全麦粉干面筋中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的含量极显著降至1 159.5μg/kg;在用分离麸皮后的小麦粉制作成的干面筋中,脱氧雪腐镰刀菌烯醇的含量极显著降至818.4μg/kg,符合国家标准.试验结果表明,利用脱氧雪腐镰刀菌烯醇超标的小麦,采取适当的生产设备和工艺,生产的谷朊粉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇含量能够达到国家标准.

真菌毒素会检的总结及ELISA与胶体金快速检测法的比对结果报告

2009年6月12日至14日,国家粮食局标准质量中心组织对河南、湖北两省受灾严重的13各地市的小麦进行会检,抽取了400份样品,其中对发霉、发芽较严重的150多份样品分别用ELISA与胶体金快速试纸试卡（试纸卡由上海快灵生物科技有限公司提供）两种方法进行真菌毒素测定,同时对这两种方法进行比对。采用ELISA方法的会检结果为：

河南省玉米真菌毒素污染调查

目的为了解2013年河南省产玉米质量和真菌毒素的状况,探究天气环境对玉米真菌毒素污染的影响。方法以2013年河南大田产玉米为研究对象,采用免疫亲和净化-高效液相色谱法重点检测了玉米中黄曲霉毒素B1(AFB1)、玉米赤霉烯酮(ZEN)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(呕吐毒素,DON)等3种真菌毒素,共检测玉米样本197份,抽查样品覆盖了全省18个省辖市的73个县、市、区。根据检测结果并结合当年玉米种植和收获季节天气环境变化等情况进行相关性研究和分析。结果 DON、ZEN等2种真菌毒素含量均未超标,符合国家规定的限量标准,但黄曲霉毒素B1超标严重,平均超标率达48.7%。结论干旱和高温胁迫天气变化、秸秆还田和高密度种植引起的微环境变化是导致玉米黄曲霉毒素污染最主要的环境因素。

超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法快速筛查配制酒中的11种那非类药物

目的建立超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法快速筛查配制酒中的11种那非类药物的分析方法。方法样品稀释、过滤后经Hypersil GOLD C18(150 mm×2. 1 mm,1. 9μm)分离,超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱分离检测,电离模式为电喷雾正离子模式,数据采集使用一级母离子全扫描和数据依赖的二级子离子扫描(Full MS/dd-MS2)模式。结果在11 min内,11种那非类化合物能得到较好分离;在3μg/L^100μg/L内线性关系良好,检出限为1μg/L^2μg/L,定量限为3μg/L^5μg/L,回收率为86. 4%~107. 9%,RSD为0. 5%~6. 7%(n=3)。705批配制酒中,检出西地那非和伐地那非4批次,阳性率为0. 6%。结论该方法简单快捷,定性准确,可用于配制酒中11种那非类药物的快速筛查及确证。