氨氯地平衍生物CJX1对K562/DOX细胞阿霉素耐药的逆转作用

目的:研究氨氯地平衍生物CJX1对K5 6 2 /DOX细胞阿霉素耐药的逆转作用。方法:应用流式细胞仪和MTT法观察了CJX1对K5 6 2 /DOX细胞P- 糖蛋白(P -gp)的抑制作用及对K5 6 2 /DOX细胞阿霉素耐药的逆转作用。结果:CJX1能剂量相关性地增加K5 6 2 /DOX细胞内罗丹明12 3(Rh 12 3)的累计,明显抑制P -gp介导的Rh 12 3外排,显著增强阿霉素对K5 6 2 /DOX细胞的细胞毒作用,增加K5 6 2 /DOX细胞内阿霉素水平。结论:氨氯地平衍生物CJX1能显著抑制P gp的外排功能,逆转K5 6 2 /DOX细胞的多药耐药性。

洛美利嗪衍生物CJZ3对K562/DOX细胞阿霉素耐药的逆转作用

目的研究洛美利嗪衍生物CJZ3对K562/DOX细胞阿霉素耐药的逆转作用。方法应用流式细胞仪和MTT法观察了CJZ3对K562/DOX细胞P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的抑制作用及对K562/DOX细胞阿霉素耐药的逆转作用。结果CJZ3能剂量相关性地增加K562/DOX细胞对罗丹明123(rhodamine123,Rh123)的摄取以及细胞内罗丹明Rh123的累计,明显抑制P-gp介导的Rh123外排,增强阿霉素对K562/DOX细胞的细胞毒作用,提高阿霉素诱导的K562/DOX细胞凋亡率,提高细胞Caspase-3活性,增加K562/DOX细胞内阿霉素水平。结论洛美利嗪衍生物CJZ3体外能明显抑制P-gp的外排功能,逆转P-gp介导的K562/DOX细胞的多药耐药性。

氨氯地平衍生物CJX1对人耐药肿瘤细胞P-gp ATP酶活性的影响

目的研究CJX1与K562/DOX(耐受阿霉素的骨髓粒细胞性白血病)细胞P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)ATP酶的相互作用。方法由K562/DOX细胞制成细胞膜,定磷法测定膜上P-gp ATP酶活性。结果CJX1可提高基础P-gpATP酶活性,Km值为(8.6±1.4)μmol·L-1,CJX1与P-gp的亲和力高于维拉帕米(verapamil,Ver);动力学分析提示,CJX1可非竞争性抑制Ver激活的P-gp ATP酶活性,粉防己碱(tetrandrine,Tet)可竞争性抑制CJX1激活的P-gp ATP酶活性,环孢素A(cyclosporin A,CsA)分别以非竞争性和竞争性方式抑制CJX1和Ver激活的P-gpATP酶活性。结论CJX1与Tet在K562/DOX细胞P-gp上可能具有相同的结合部位,CJX1与Ver或CsA在K562/DOX细胞P-gp上可能存在不同的结合部位。

氨氯地平衍生物CJX2与人P-糖蛋白ATPase的相互作用

目的:研究CJX2与K562/DOX细胞P-糖蛋白(P-glycoprote in,P-gp)ATPase的相互作用。方法:由K562/DOX细胞制成细胞膜,定磷法测定膜上P-gp ATPase活性。结果:CJX2可提高基础P-gp ATPase活性,Km值为10.7±1.8μM,CJX2与P-gp的亲和力高于维拉帕米;动力学分析提示,CJX2可非竞争性抑制维拉帕米(Verapam il,Ver)激活的P-gp ATPase活性,粉防己碱(tetrandrine,Tet)可竞争性抑制CJX2激活的P-gp ATPase活性,环孢素A(Cyc losporin A,CsA)分别以非竞争性和竞争性方式抑制CJX2和Ver激活的P-gp ATPase活性。结论:CJX2与Tet与K562/DOX细胞P-gp上结合部位可能是重叠或者是相互联系的,CJX2与Ver或CsA在K562/DOX细胞P-gp上结合部位是相互独立的,存在不同的结合部位。

新型蒽醌类衍生物HG251诱导人白血病K562/DOX细胞凋亡的机制

目的探讨新型蒽醌类衍生物HG251诱导K562/DOX细胞凋亡的机制。方法以MTT法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞周期变化、凋亡率、线粒体膜电位的变化,Western blot检测P-gp及凋亡相关蛋白如半胱天冬蛋白酶-3、-8、-9、p53、Bcl-xL、cytochrome C的表达。结果HG251剂量依赖性的抑制K562/DOX细胞的生长、降低线粒体膜电位并诱导其凋亡;上调p53并下调Bcl-xL;诱导半胱天冬蛋白酶-3、-8、-9的活化及cytochrome C的释放,但对P-gp的表达无影响。结论HG251通过干扰p53及Bcl-xL的表达而克服K562/DOX细胞的多药耐药,并通过细胞膜死亡受体途径及线粒体途径诱导其细胞凋亡。

藻酸双酯钠对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑环境的影响及对鸡胚背根神经节的促生长作用

目的观察藻酸双酯钠(PSS)对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑环境的影响及对培养的鸡胚背根神经节的促生长作用。方法采用大鼠大脑中动脉结扎模型研究PSS对局灶性脑缺血再灌注后脑环境的影响;采用鸡胚背根神经节体外培养模型研究PSS对培养的鸡胚背根神经节的促生长作用。结果在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型中,PSS可呈剂量依赖性阻止大脑皮质Ca2+释放,降低脑组织Na+,NO,丙二醛(MDA)浓度,抑制一氧化氮合酶(NOS),增强超氧化物歧化酶(SOD),Na+-K+- ATPase,Ca2+-ATPase活性,提高K+浓度;在鸡胚背根神经节体外培养模型中,PSS可呈剂量依赖性促进鸡胚背根神经节生长。结论 PSS能改善大鼠局灶性脑缺血再灌注后的损伤脑环境,促进鸡胚背根神经节生长,对局灶性脑缺血有保护作用。

缩氨基硫脲衍生物JOH-1对K562细胞增殖的影响

目的探讨JOH-1对体外培养人白血病K562细胞株增殖的影响。方法以JOH-1为研究对象,采用细胞体外培养技术,MTT法和台盼蓝拒染法检测JOH-1对K562细胞株增殖抑制。结果不同浓度的JOH-1作用于K562细胞12、24、48h后对K562细胞的增殖有抑制作用,且呈剂量和时间依赖性;生长曲线显示JOH-1使K562细胞的生长受到明显抑制。结论 JOH-1对体外培养人白血病K562细胞株的增殖有显著抑制作用,且呈剂量和时间依赖性。

多塞平对急性脑缺血再灌注大鼠脑组织单胺类递质含量的影响

目的 :观察多塞平对急性脑缺血再灌注大鼠各脑区单胺类递质含量的影响。方法 :以阻断四血管方法造成急性脑缺血再灌注模型。动物随机分成假手术组 ,空白对照组 ,尼莫地平 3mg·kg- 1组和多塞平 15 ,10 ,5mg·kg- 1组共 6组。在缺血前及再灌注前分别腹腔给药 ,用荧光分光光度计测定大脑皮层、海马、纹状体、脑干中 5 羟色胺、去甲肾上腺素及多巴胺的含量。结果 :与空白对照组比较 ,多塞平 15 ,10 ,5mg·kg- 1剂量组及尼莫地平 3mg·kg- 1组大脑皮层、海马、纹状体各单胺类递质含量显著升高 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,脑电活动亦显著恢复 (P<0 .0 5或P <0 .0 1)。结论

多塞平对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 观察多塞平对急性脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用。方法 大鼠 1 2 0只 ,随机分为缺血再灌注组 ,多塞平大、中、小剂量组 ,尼莫地平阳性对照组和假手术组。以线栓法阻断大脑中动脉制作大鼠急性脑缺血再灌注模型 ,分别测定皮层脑组织一氧化氮 (NO)含量、一氧化氮合酶活性(NOS)、超氧歧化酶 (SOD)活性、丙二醛 (MDA)含量及大脑皮层神经元细胞内游离钙 ([Ca2 + ] i)水平。结果 与空白对照组比较 ,多塞平 2 5、5、7 5mg·kg- 1 和尼莫地平阳性对照组可降低NO含量、NOS活性、MDA含量及皮层神经元细胞内 [Ca2 + ] i 含量、升高SOD活性 (P <0 0 5或P <0 0 0 1 )。结论 多塞平对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用。

苯海索对培养神经细胞谷氨酸兴奋毒性的保护作用

目的 观察苯海索 (trihexyphenidyl,THP)对培养神经细胞谷氨酸兴奋毒性的保护作用。方法 体外培养大鼠胚胎皮层神经细胞 ,加入谷氨酸观察谷氨酸对神经细胞的兴奋毒性及苯海索的保护作用。结果 苯海索能显著减少细胞死亡 ,降低乳酸脱氢酶 (lactatedehydrogenase,LDH)漏出量 ,一氧化氮 (nitrioxide,NO)含量及丙二醛 (malondialdehyde ,MDA)生成 ,提高超氧歧化酶 (superoxidedismutase ,SOD)活性。结论 苯海索对培养神经细胞谷氨酸兴奋毒性具有显著的保护作用 。

藻酸双酯钠对培养神经细胞谷氨酸兴奋毒性的保护作用

目的 :观察藻酸双酯钠 (PSS)对培养神经细胞谷氨酸兴奋毒性的保护作用。方法 :体外培养大鼠胚胎皮层神经细胞 ,加入谷氨酸观察谷氨酸对神经细胞的兴奋毒性及PSS的保护作用。结果 :PSS 5 0 ,1 0 0 ,1 5 0mg·L-1能显著减少细胞死亡 ,降低乳酸脱氢酶(LDH)漏出量 ,一氧化氮 (NO)含量及丙二醛 (MDA)生成 ,提高超氧歧化酶 (SOD)活性。结论 :PSS对培养神经细胞谷氨酸兴奋毒性具有显著的保护作用 ,其机制可能与PSS抗脂质过氧化作用有关。

食管癌患者红细胞免疫功能测定

采用红细胞酵母菌花环法检测５６例食管癌患者红细胞免疫功能。结果：食管癌患者红细胞免疫功能显著降低，降低程度与食管癌病理分期及转移率、转移度有关。提示：红细胞免疫功能的测定对于判断食管癌病情进展具有重要临床价值。

血脑屏障上P-糖蛋白及其药物外排作用研究进展

P-糖蛋白是与肿瘤多药耐药(Multidrugresistance，MDR)密切相关的糖蛋白，属于能量依赖性药物外排泵。人类的MDR基因有两个亚型(MDR1，MDR2)，啮齿类动物有三种基因(MDR1a，MDR1b，MDR2)。P-糖蛋白是血脑屏障(BBB)的重要成分，BBB上的P一糖蛋白定位于脑微血管内皮细胞的腔面上。

美多洛尔药动学药效学结合模型的研究

应用药动学药效学结合模型的方法研究了美多洛尔效应室药物浓度与降压效应之间的关系。原发性高血压患者一次口服美多洛尔片剂５０ｍｇ，体内代谢呈一室模型，降低动脉收缩压效应与血药浓度之间存在逆时针滞后现象，效应室药物浓度（Ｃｅ）与降压效应（Ｅ）的关系为Ｅ＝ＥｍａｘＣｅ~ｓ／［Ｃｅ~ｓ＋Ｃｅ（５０）~ｓ］，Ｃｅ（５０）为１２２．３２±７５．８２μｇ／Ｌ，效应室消除速率常数ｋｅｏ为０．０４３±０．０３２ｍｉｎ（－１）。提示以上模型可较好地应用于美多洛尔高血压病治疗过程中降压效应的预测。

苯海索对培养大鼠神经细胞缺氧/缺糖性损伤的保护作用

目的 观察苯海索对缺血 /缺氧培养所致大鼠皮层神经细胞损伤的保护作用。方法 体外培养大鼠胚胎皮层神经细胞 ,以缺氧加缺糖培养建立神经细胞“缺血”性损伤模型 ,观察苯海索对培养神经细胞“缺血”性损伤的保护作用。结果 苯海索能显著减少细胞死亡 ,降低乳酸脱氢酶 (LDH)漏出量、一氧化氮 (NO)含量及丙二醛 (MDA)生成 ,提高超氧化物歧化酶(SOD)活性。结论 苯海索对培养神经细胞“缺血”性损伤具有显著的保护作用 ,其机制可能与苯海索降低NO含量、抗过氧化作用有关。

苯海索对血红素所致大鼠胚胎皮层神经细胞损伤的保护作用

目的 :观察苯海索对血红素所致大鼠胚胎皮层神经细胞损伤的保护作用。方法 :体外培养大鼠胚胎皮层神经细胞 ,加入血红素建立神经细胞血红素损伤模型 ,以不加血红素者为正常对照 ,观察不同浓度苯海索对血红素损伤模型神经细胞死亡数 ,乳酸脱氢酶 (LDH)的漏出量 ,培养液中丙二醛 (MDA)和超氧化物歧化酶 (SOD)活性的影响。结果 :苯海索 10 -9mol·L-1、10 -8mol·L-1、10 -7mol·L-1能浓度依赖性地显著减少细胞死亡 ,降低LDH漏出量及MDA生成 ,提高SOD活性。结论 :苯海索对血红素所致神经细胞损伤具有显著的保护作用 ,其机制可能与苯海索抗过氧化作用有关。

血脑屏障上的P-糖蛋白及其转运功能研究进展

P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)是一个由分子量170-180KD组成的糖蛋白,其主动的药物外排作用是造成肿瘤细胞产生多药耐药性(Multidrug resistance,MDR)的重要原因。近年来研究发现,P-糖蛋白在机体正常组织如血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)也呈高度表达。本文归纳了P-糖蛋白的逆转剂及其底物的特征,系统介绍了血脑屏障上P-糖蛋白的转运功能及其研究方法,期望为P-糖蛋白逆转剂的应用以及中枢神经系统疾病的治疗提供帮助。

高效液相色谱法测定血浆美托洛尔浓度的改进

对反相高效液相色谱法测定血浆美托洛尔浓度的方法进行了改进，选用色谱柱带预柱，溶酶为四氢呋喃。本法的最低检测限为５ｎｇ。血浆中最低测定浓度为２０ｎｇ／ｍｌ，平均回收率为９９．６％。日内回收率为９９．８％，日间回收率为９９．４％。方法简便，灵敏度高，毒性较低，适于临床药理研究及临床治疗监测。

美托洛尔血药浓度与抑制心率效应关系

家兔６只，１０ｍｇ／ｋｇ美托洛尔肌注，药物体内代谢呈二室模型，高血压患者５例，一次口服美托洛尔片剂５０ｍｇ，药物体内代谢呈一室模型。家兔和高血压患者，血药浓度（Ｃｐ）与抑制心率效应（Ｅ）的关系均为Ｅ＝Ｅｍａｘ·Ｃｐ~ｓ／［Ｃｐ~ｓ＋Ｃｐ（５０）~ｓ」。Ｃｐ（５０）为引起半数最大效应的血药浓度，家兔Ｃｐ（５０）个体间相差１７．４５倍，高血压患者Ｃｐ（５０）相差６．０９倍，提示药物浓度监测应注意药效学的个体差异。