虚寒呕吐模型的复制和吴茱萸汤的止呕作用研究

目的:为客观准确评价吴茱萸汤的止呕作用,本研究首次尝试顺铂致呕模型的基础上。方法:采用给予苦寒中药大黄的方式制备了病症结合的虚寒呕吐模型,并基于两种呕吐模型,分别从体质量、生化指标和脏器指数等机体生理生理病理状态,以及异食癖等行为学多个方面对吴茱萸汤的止呕作用进行了评价。结果:大鼠口饲大黄一段时间后表现出了明显的虚寒状态和一定程度的病理指标的变化,而对证给予吴茱萸汤后这种病理状态和病理指标均有较为明显的改善,而不具有虚寒状态的顺铂对照组大鼠给予吴茱萸汤治疗后反而加重了病理指标的变化;吴茱萸汤对两种呕吐模型均有显著的止呕作用(P<0.01),但对大黄加顺铂制备的虚寒呕吐动物模型的作用优于单纯顺铂制备的呕吐模型(P<0.01)。结论:该方法制备的病症结合模型比顺铂致呕模型更适于吴茱萸汤等中医复方治疗虚寒呕吐药效学的评价研究,本研究结果也从以方测证和方证相应的角度反映了该方法复制虚寒呕吐模型的可行性和合理性。

高效液相色谱法同时测定吴茱萸汤中5种活性成分的含量

目的建立吴茱萸汤中吴茱萸碱、吴茱萸内酯、吴茱萸次碱、6-姜酚、芦丁5种活性成分含量同时测定的方法。方法采用HPLC法,色谱柱:COSMOSIL 5 C18-MS-II(5μm,4.6 mm×250 mm);流动相:乙腈(0.1%磷酸A)-水溶液(0.1%磷酸B),梯度洗脱,流速1 m L·min-1,柱温30℃,检测波长210 nm。结果吴茱萸碱、吴茱萸内酯、吴茱萸次碱、6-姜酚、芦丁分别在0.0098~0.196、0.205~4.10、0.0026~0.052、0.039~0.78、0.017~0.34μg内与峰面积呈良好的线性关系,r分别为0.9998、0.9999、0.9997、0.9996、0.9998,加样回收率分别为95.2%、98.8%、96.4%、99.9%、95.2%。结论该方法快速简便,重复性好,专属性强,可作为吴茱萸汤的质量控制标准和方法。

热性中药成分辣椒碱调节小鼠UCP1的分子机制研究

目的为进一步揭示热性中药的分子机制、诠释中药寒热药性理论的科学内涵,同时对能量代谢开关解偶联蛋白亚型1(UCP1)的表达调控作用进行研究。方法采用热偶技术对小鼠的核心温度和尾部皮肤温度进行了给药后的实时监测,温度的采集分析采用了热偶检测技术,UCP1的表达量分别采用了荧光定量PCR和Western blot的技术。结果辣椒碱给药后小鼠机体中心温度先降低后上升,尾部皮肤温度以升高为主,与空白对照组相比差异有显著性(P<0.05或P<0.01);UCP1的基因和蛋白的表达量均明显上调(P<0.05或P<0.01)。结论上调UCP1的表达进而提高机体的能量代谢可能是辣椒碱作为辣椒的热性成分表征热性属性的生物分子机制之一。

马兜铃酸I对小鼠肝脏代谢酶的影响研究

目的利用代谢动力学等相关技术研究马兜铃酸I对小鼠肝脏代谢酶的影响,揭示马兜铃酸I影响小鼠肝脏代谢功能的作用机制。方法取雄性6周龄C57BL/6小鼠作为研究对象,按照设定的马兜铃酸I剂量随机分为4个给药组和l个正常对照组,灌胃给药,每周5天,连续4周,利用代谢动力学相关技术和分子生物学手段研究马兜铃酸I对小鼠肝脏代谢酶的影响。结果显示马兜铃酸I可以诱导小鼠肝脏细胞色素P4501a2和细胞色素P4503a11的酶活性和mRNA表达,也可以通过诱导磺基转移酶增加吲哚酚硫酸的含量,但不是主要因素。AAI引起的肾毒性是吲哚酚硫酸在血浆、肝脏和肾脏蓄积的主要原因,反过来也加重了AAI引起的肾脏毒性。结论马兜铃酸I对小鼠肝脏代谢酶有多重影响。

不同种间、性别和年龄小鼠肝脏代谢谱的差异研究

目的利用代谢组学等相关技术研究不同种间、性别和年龄小鼠肝脏代谢谱的差异,为有毒药物的毒性差异研究提供物质基础。方法8周C57雄性小鼠、C3H雄性小鼠、C57雌性小鼠、2周未离乳C57雄性小鼠作为研究对象,利用代谢组学相关技术结合分子生物学手段研究不同种间、性别和年龄小鼠肝脏代谢谱的差异。结果显示不同种间、性别和年龄小鼠肝脏的相关代谢通路存在差异,主要涉及氨基酸合成和代谢的相关代谢通路,同时不同种间、性别和年龄小鼠肝脏的I相和II相代谢酶的活性和mRNA基因表达存在差异,代谢酶的活性和mRNA基因表达越高,马兜铃酸I的LD50值越大,其毒性越小。结论本研究揭示了不同种间、年龄和性别小鼠肝脏代谢谱的差异,从不同种间、年龄和性别小鼠肝脏物质基础方面解释了马兜铃酸I毒性差异的原因,也为其他有毒药物的合理评价提供了数据支持。

吴茱萸不同提取方式差异化学物质和毒性物质基础研究

目的研究吴茱萸不同提取方式存在差异性的化学物质以及引起肝脏毒性可能的主要物质基础。方法分别制备吴茱萸水提组分、30%乙醇提组分、50%乙醇提组分和80%乙醇提组分,采用植物组学方法找出差异性化学物质,利用软件预测方法筛查主要差异性化学物质的毒性终点。结果吴茱萸水提与不同浓度醇提相比较获得的差异性化学物质总共有50种,其中最主要的差异性化学物质是吴茱萸生物碱,毒性终点筛查的结果显示吴茱萸生物碱存在安全风险,并揭示了吴茱萸醇提取物的毒性大于水提取物的原因。结论不同提取方式可以使吴茱萸存在差异性化学物质以及吴茱萸生物碱可能是其毒性物质基础。

纳米TiO_(2)对幼年小鼠血浆代谢谱影响的代谢组学研究

观察不同染毒剂量的纳米TiO_(2)对ICR幼年小鼠血浆代谢谱变化的影响,寻找潜在的毒性效应的生物标志物。将幼年小鼠随机分为对照组以及10、30、100和300 mg·kg^(-1)不同纳米TiO_(2)染毒组进行28 d短期毒性试验,利用代谢组学技术初步筛选出TiO_(2)毒性作用潜在的生物标志物,运用KEGG数据库对生物标志物进行拓扑分析;并利用靶向定量技术检测血浆胆酸、去氧胆酸、熊去氧胆酸和牛磺胆酸的含量变化,从而探究TiO_(2)毒性作用相对应的生物标志物。从血浆中筛选出49种差异代谢物,发现纳米TiO_(2)染毒后主要导致磷脂类及胆汁酸类化合物的异常。小鼠经过纳米TiO_(2)28 d染毒后,其毒性作用可能与磷脂代谢及胆汁酸代谢异常相关,血浆中的胆汁酸可以作为纳米TiO_(2)产生肝脏毒性作用的生物标志物。

基于高分辨质谱研究双酚A对小鼠血浆代谢谱的影响

观察不同染毒剂量的双酚A(BPA)对C57BL6小鼠血浆代谢谱的影响,探讨其可能的毒性机制,并探寻毒性相关生物靶点。将小鼠随机分为对照组及1、10、50和250μg·kg^-1组。利用高分辨质谱技术结合主成分分析、偏最小二乘分析等方法对血浆数据进行分析,发现对照组与各剂量组基本分离,并随染毒剂量的增加,各组逐渐偏离对照组,提示小鼠机体具有发生紊乱的趋势;运用Pathway Analysis数据库对差异性代谢物进行拓扑分析;运用Cytoscape和Metscape进行代谢产物的相关性分析和模块化分析。从血浆中筛选出27种差异代谢物,发现BPA的干预作用可能与亚油酸代谢、花生四烯酸代谢、丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢、丙酮酸代谢、鞘脂类代谢和磷酸肌醇代谢等通路有关;对血浆差异性代谢产物的相关性分析和模块化分析结果表明,7个模块之间关系密切,BPA的干预作用可能与血浆7个模块代谢物的差别相关;BPA染毒14 d后,其毒性作用机制可能与丙酮酸、花生四烯酸、亮氨酸和亚油酸等生物靶点的异常相关,丙酮酸、花生四烯酸、亮氨酸和亚油酸等生物靶点可作为BPA引起机体毒性的标志物。

男性们撑起的女权世界——从《那年花开月正圆》说起

近期热播的《那年花开月正圆》讲述了晚清背景下,女主人公周莹从一个天真无邪的江湖卖艺少女,在商海中历经几番沉浮,最终成长为陕西女首富的传奇故事。这部剧中看似为我们塑造了一个大胆突破自己,彰显女权意识的女性新形象,为我们构建了一个颠覆传统礼教和以女性视角为主的女权世界。然而现实并非如此,周莹的成功依然和剧中各位男性的帮助分不开,整部剧实际来说仍然是男性撑起的女权世界。

新形势背景下永济麦草画产业经济面临的困境及出路

十九大提出目前我国经济正处在转变发展方式、优化经济结构、转变增长动力的攻关期,建设现代化经济体系是跨越关口的迫切需求。在这种新经济形势背景下,我国民间传统手工艺产业经济结构发生一定的变化。永济麦草画产业经济也紧追时代的潮流,在一定程度上得到创新和发展。本文全面梳理永济麦草画发展现状,分析当前麦草画产业经济的发展困境,提出麦草画产业经济保护与发展的出路。

新型TSPO配体YL-IPA08抗创伤后应激障碍的大鼠血浆代谢谱的代谢组学研究

目的应用代谢组学方法分析抗PTSD新药YL-IPA08对PTSD模型大鼠内源性代谢物的影响,探讨YL-IPA08抗PTSD的代谢调节及其可能机制。方法将大鼠随机分为对照组、PTSD模型组和PTSD模型伴随给予YL-IPA08组,采用强迫游泳建立PTSD模型大鼠,治疗组连续15 d灌胃给予YL-IPA08(2 mg·kg^(-1))。应用超高效液相色谱-质谱(HPLC-MS/MS)技术非靶向分析大鼠血浆样本中差异内源代谢物及可能的相关代谢通路。利用靶向定量技术检测大鼠血浆中18种胆汁酸含量变化。结果与对照组比较,模型组大鼠血浆中发现并鉴定出谷氨酸、脯氨酸、缬氨酸、精氨酸、亮氨酸、肌酸等40个差异代谢物,11种胆汁酸含量明显升高;与模型组比较,给予YL-IPA08后,40个潜在差异代谢物和11种胆汁酸均有向正常水平回调的趋势。结论代谢组学研究显示,YL-IPA08对PTSD模型大鼠内源代谢紊乱具有一定的干预作用,其机制可能与调节氨基酸代谢和胆汁酸代谢等有关。

基于血浆代谢组学研究制何首乌改善小鼠肾虚的作用机制

运用血浆非靶代谢组学探究制何首乌改善小鼠肾虚的作用机制。将35只ICR小鼠随机分为空白组(C)、模型组(M)以及黑豆汁炖24 h (braising with black bean sauce for 24 h,BB24 h)、32 h (BB32 h)、40 h (BB40 h)制何首乌给药组。造模后连续给药14天,取血检测生化指标,并通过超高效液相-线性离子阱-轨道阱串联质谱(UPLC-LTQ-orbitrap XL)测定各组小鼠血浆中内源性代谢物的变化,筛选差异代谢物。实验结果显示,与模型组相比,黑豆汁炖24 h给药组中雌激素(estradiol,E2)水平显著升高(P<0.05);黑豆汁炖32 h给药组中皮质醇(cortisol,Cort)水平显著升高(P<0.05),制何首乌对肾虚小鼠的激素水平有明显改善。制何首乌干预治疗后,小鼠血浆中共发现70个差异代谢物,主要涉及甘油磷脂代谢、花生四烯酸代谢、苯丙氨酸代谢、苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成、亚油酸代谢等5条通路。研究提示制何首乌可能是通过改善小鼠下丘脑—垂体—肾上腺轴的紊乱并调节脂质代谢的水平,从而发挥补肝肾的作用。血浆中的差异代谢物与化学成分群的相关性分析发现二苯乙烯苷类及糖类成分可能是制何首乌发挥补肾作用的药效物质基础。本文为揭示制何首乌发挥补肾作用的潜在药效物质基础及补肝肾作用机制研究提供了新的参考和依据。本研究涉及的动物实验操作均遵循中国中医科学院中药研究所实验动物福利伦理委员会的规定并通过动物实验伦理审查[批准号:SYXK (京) 2019-0003]。

基于UHPLC-MS的吴茱萸汤影响虚寒呕吐大鼠尿液代谢谱的研究

目的 观察吴茱萸汤对虚寒呕吐大鼠尿液代谢谱的变化,探讨其治疗虚寒呕吐证可能的作用机制。方法 运用复合法(大黄+顺铂)制备大鼠虚寒呕吐模型,将大鼠随机分为对照组、模型组、吴茱萸汤组。利用超高液相色谱-质谱(UPLC-MS/MS)技术结合主成分分析、偏最小二乘分析等方法对尿液数据进行分析,鉴定出潜在生物标志物,通过VIP及非参数检验筛选并通过多元化ROC曲线验证差异代谢物;运用PathwayAnalysis数据库对差异性代谢物进行拓扑分析;运用R和Cytoscape进行代谢产物的相关性分析和模块化分析。结果 尿液代谢谱对照组和模型组完全分离,吴茱萸汤组靠近对照组,表明模型复制成功,且吴茱萸汤能够干预大鼠的虚寒呕吐症状,提示大鼠机体具有恢复到正常状态的趋势。从尿液中筛选出34种差异代谢物进行通路分析,发现虚寒呕吐发挥干预作用可能与缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的生物合成,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成,精氨酸和脯氨酸代谢,色氨酸代谢,酪氨酸代谢,花生四烯酸代谢,三羧酸循环(TCA循环)等通路有关;进行模块化分析发现10个模块之间关系密切,丙氨酸、亮氨酸、酪氨酸、色氨酸、异亮氨酸、琥珀酸、丙氨酸、富马酸、苹果酸、异柠檬酸等生物靶点可作为虚寒呕吐模型的标识。结论 吴茱萸汤能够改善虚寒呕吐模型的生理特征,机制可能与吴茱萸汤调节大鼠体内紊乱的氨基酸代谢、能量代谢及脂代谢等有关。

基于UPLC-MS研究纳米二氧化钛对成年小鼠血浆代谢谱的影响

目的:观察不同染毒剂量的纳米二氧化钛(TiO_(2))对C57BL/6成年小鼠血浆代谢谱的变化,探讨其产生毒性效应可能的作用机制,并尝试寻求其毒性相关生物靶点。方法:运用纳米TiO_(2)制备不同染毒剂量的小鼠模型,将小鼠随机分为对照组及10,30,100和300 mg·kg^(-1)组。利用UPLC-MS技术结合主成分分析、偏最小二乘分析等方法对血浆数据进行分析,鉴定出潜在生物标志物,通过变量对模型的重要性(variable important in projection, VIP)及非参数检验筛选差异代谢物;运用Pathway Analysis数据库对差异标志物进行拓扑分析。结果:从血浆中筛选出35种差异代谢物,发现纳米TiO_(2)发挥干预作用可能与亚油酸代谢、鞘脂代谢、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的生物合成、组氨酸代谢、花生四烯酸代谢、烟酸酯和烟酰胺代谢、甘油磷脂代谢等通路有关。结论:纳米TiO_(2)经过28 d染毒后,所产生的毒性作用机制可能与体内氨基酸代谢、脂质类代谢异常相关。

基于UPLC-MS的吴茱萸汤对虚寒呕吐大鼠血清代谢谱的影响

目的以虚寒大鼠为模型,观察吴茱萸汤对模型大鼠血清代谢谱的影响,探讨其治疗虚寒呕吐证可能的内在作用机制。方法采用复合法(大黄+顺铂)制备虚寒呕吐模型。通过超高液相色谱-质谱(UPLC-MS)技术非靶向获取虚寒呕吐大鼠血清的高通量代谢组数据,结合多元变量分析和数据库检索,对不同组别大鼠血清中内源性代谢物进行分析,筛选鉴定出潜在的差异代谢物,并通过Metabo Analyst软件进行代谢通路分析。结果血清代谢谱对照组和模型组完全分离,吴茱萸汤给药组靠近对照组,表明从机体内源性物质变化的水平模型复制成功,且吴茱萸汤在一定程度上能够干预大鼠的虚寒呕吐症状,提示吴茱萸汤干预后机体具有恢复到正常状态的趋势。对筛选出来的35种差异性代谢物进行通路分析,发现虚寒呕吐证的机制可能与体内脂代谢、氨基酸代谢通路异常相关,且吴茱萸汤对其通路可能具有调控作用;网络模块化分析发现7个模块之间关系密切,焦谷氨酸、花生四烯酸、5-羟基色胺、异柠檬酸、三酰甘油等生物靶点可作为虚寒呕吐证的生物标志物。结论吴茱萸汤能够改善虚寒呕吐模型的生理特征,机制可能与吴茱萸汤调节虚寒呕吐大鼠体内紊乱的氨基酸代谢、能量代谢、脂代谢等异常有关。

家族遗音,京城风情——试析叶广苓的《状元媒》

作为"京味小说"的后起之秀,满族女作家叶广苓在其家族题材小说中,运用夹议夹论的写作手法,道出老北京百余年的沧桑巨变和人情冷暖。作品中将满族传统行业、服饰、饮食、礼仪、娱乐等民俗展现得淋漓尽致,从这个意义上来说,她延续了老舍所确立的"京味文学的传统"。文章试以叶广苓的长篇小说《状元媒》为例,从物质民俗、社会民俗、民间信仰、民间艺术等几个方面,运用民俗学原理,阐述老北京尤其是满族的风俗人情,凸显一代人的老北京记忆,最后再对传统文化当下的境遇进行反思。