罕见抗-Di^(b)致严重胎儿新生儿溶血病的实验室检测与相关研究

目的对1例高频抗体导致的胎儿新生儿溶血病(hemolytic disease of the fetus and newborn,HDFN)进行检测、鉴定及配血。方法对患儿进行新生儿溶血试验,对母亲进行血清学意外抗体鉴定,并对母亲红细胞进行常见高频抗原鉴定;对检出抗体进行IgG分型检测,并用流式细胞术进行单核细胞体外吞噬致敏红细胞试验,以检测抗体相关的吞噬率;对患儿母亲、父亲及舅舅进行相关红细胞血型基因测序;利用稀释的母亲血浆和抗人球卡法,在献血者中进行大规模相合血液的筛选。结果产妇鉴定为Di(b-)稀有血型,产生了抗-Di b(效价512)并导致了严重的HDFN;抗-Di b亚型分型为IgG1和IgG2型,单核细胞体外吞噬效率为88.83%(74.7/84.09);产妇亲属中没有相合献血者,后续从5520名献血者中筛选到2例Di(b-)相合血液,患儿接收输血治疗后康复出院。后续在51334名献血者中筛查到17名Di(b-)献血者,该数据表明Di(b-)在广州地区献血者中的分布频率约为三千分之一(0.033%,17/51334)。结论综合利用血型血清学及分子生物学方法诊断了抗-Di b所致的严重HDFN,建立了1种有效大规模筛查Di(b-)稀有血型的方法并找到相合血液,为建立Di(b-)稀有血型库奠定了基础。

面向自适应学习的个性化学习路径推荐

根据学习者的学习记录和学习任务进行学习路径推荐,是实现自适应学习的关键技术。文章首先将个性化学习路径推荐模型归为八类,并对每类模型进行详细分析,总结出这些模型普遍存在的问题,认为这些问题严重影响了自适应个性化学习的应用效果。之后,文章提出一种从课程、学习任务两个维度进行学习路径推荐的个性化学习路径推荐模型,其融合了知识图谱、深度知识跟踪和强化学习三种智能技术,能有效解决上述问题。最后,文章通过对学习任务内学习路径推荐模型进行对比实验及其相关数据分析,发现该模型能有效提高学习效果和学习效率,其推荐性能也优于目前主流的推荐模型。文章的研究成果对自适应学习的实现具有重要应用价值,并为教育领域个性化学习路径推荐的理论与技术研究提供了重要参考。

RhD双群患者的血清学及分子生物学分析--附1例报道

目的对1名配血困难的RhD双群(double population,DP)患者进行血清学及分子生物学分析,解决其RhD血型鉴定及临床用血问题。方法用毛细管离心法分离患者红细胞,对近心端、远心端红细胞分别进行ABO和Rh血型鉴定,以及直接抗人球蛋白试验;对患者血浆进行不规则抗体筛选及鉴定以及交叉配血试验;采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)检测RHD基因合子型,采用序列特异性聚合酶链反应(PCR-SSP)进行RHD和RHCE基因型检测。结果血型鉴定的结果显示该患者血型为B型,RhD及RhCE的c和E血型抗原均为DP,直抗阳性,抗体筛查及鉴定结果显示血浆中含有抗-D;PCR-RFLP结果显示该患者RHD基因盒子型为D-/D-纯合子,即为RHD编码基因缺失型所致的RhD阴性;PCR-SSP的结果也显示该患者RHD编码基因外显子均缺失,RHD基因型为RHD*01N.01/01N.01,RHCE基因型为Ccee。结论本例患者在急救情况下输注了RhD阳性血液,之后被误判为RhD阳性血型,实则为RhD阴性血型。本中心在血型鉴定为DP时,利用分子生物学方法对患者进行了Rh血型准确鉴定,为该患者的精准临床用血提供了依据。

中国人群中RHAG变异对mRNA剪接影响的体外研究

目的通过mRNA异常剪接体外验证实验,即体外微基因剪接系统(minigene splicing assay,MSA),研究中国人群中发现的RHAG突变对于RHAG基因mRNA剪接的影响。方法通过对KMxD数据库中RHAG基因数据的分析,选择10种中国人群中分布频率相对较高的位于RHAG基因剪接位点附近的突变或编码区域的同义突变,构建相应的RHAG外显子野生型及突变型pSplicePOLR2G微基因表达质粒。转染HEK-293T细胞,48 h后收集细胞提取总RNA,反转录后进行PCR扩增,然后进行琼脂糖凝胶电泳检测和毛细管电泳检测,根据实验结果判断RHAG基因突变是否会影响相应外显子的正常剪接。结果2种RHAG基因剪接位点附近突变(c.158-5delT,c.807+3A>C)轻微减弱了原剪接位点的剪接效率,其余8种突变(c.312G>A,c.341+3G>A,c.609C>T,c.681G>A,c.861G>A,c.957T>A,c.984T>C和c.1139-7G>A)均不影响RHAG基因mRNA的剪接。结论RHAG基因在剪接方面比较保守,剪接位点附近突变及编码区同义突变较少会引起RHAG基因异常剪接。

线上线下混合教学模式在“卫生化学”课程中的应用研究

卫生化学是预防医学的专业基础课,涉及知识点多,学习难度较大。传统的卫生化学教学采取的主要是以教师讲授为主的课堂教学模式,学生缺乏主动深入的思考,与教师主动互动少。为提高课堂效率以及学生学习积极性,基于雨课堂与“e会学”平台的线上线下混合教学模式被应用到卫生化学教学过程中,并对教学效果进行了统计调查。结果表明,对卫生化学课程采用线上线下混合教学模式,可以达到更好的教学效果,进一步提高了学生的学习兴趣、学习积极性以及自学能力,在情感交流上也增强了师生沟通,达到更好的“教学相长”体验。

输血相容性检测实验室RhD血型检测策略专家共识

RhD抗原是Rh血型系统最具免疫原性的抗原,可导致溶血性输血反应(HTRs)和胎儿与新生儿溶血病(HDFN)。我国RhD阴性红细胞属于稀缺资源,RhD阴性患者及时输注红细胞面临资源挑战。对于初筛(盐水法)为RhD阴性的不同人群,使用何种检测策略、如何出具检测报告、何时需要鉴定“亚洲型”DEL(RHD*01EL.01,c.1227G>A)是临床输血工作者较为困惑的问题。本共识由国内200余位输血相容性检测技术专家进行深入探讨后完成,旨在进一步规范、细化RhD血型检测策略,为实现不同RhD血型患者精准输血,不断提高RhD-HTRs及RhD-HDFN的防治水平提供技术支撑,为今后制定RhD血型检测策略行业标准奠定基础。

高通量红细胞血型基因分型的多重连接依赖的探针扩增技术在一例抗Di^a新生儿溶血病诊断中的应用

目的运用高通量红细胞血型基因的多重连接依赖的探针扩增技术(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)辅助诊断一例罕见的由抗Di^a导致的严重核黄疸新生儿溶血病。方法运用传统的血型血清学方法对导致新生儿溶血病相关红细胞血型抗体进行鉴定,运用MLPA对患儿及其父母的超过40种红细胞血型抗原进行基因分型,对鉴定的抗体进行效价分析。结果血型血清学检测表明患儿体内含有针对某种低频抗原的抗体,MLPA基因分析结果提示母婴红细胞MNS血型系统及Diego血型系统抗原不匹配,可能存在抗N或抗Di^a,经进一步的血型血清学检测,证实母亲及患儿血清中存在抗Di^a,并且其母亲血清抗Di^a效价为1:32。结论抗Di^a可引起包括核黄疸在内的严重新生儿溶血病;高通量红细胞血型基因分型的MLPA技术能够协助并有效解决临床疑难样本稀有血型鉴定;针对国人的Di^a阳性的试剂红细胞应该常规应用于日常的抗体筛查工作中。

广州地区无偿献血者人群中Jk(a-b-)表型筛选及分子遗传学研究

目的了解广州地区无偿献血者人群中,Kidd血型系统中Jk(a-b-)稀有血型个体的分布频率及分子遗传背景。方法用2 mol/L尿素溶解法,对50 000名广州血液中心无偿献血者中的Jk(a-b-)血型个体进行筛选。用传统的血型血清学方法对筛选到的Jk(a-b-)表型进行确证。随后从静脉血中提取DNA,PCR方法扩增Kidd血型系统编码基因Jk的所有编码外显子,并直接进行测序分析。结果在50 000名无偿献血者中共筛选到10名Jk(a-b-)血型个体,在广州地区无偿献血者人群中其分布频率约为0.02%。在对其中8名先证者基因分型中,共发现了2种基因型,纯合IVS5-1G>A(n=6),杂合IVS5-1G>A/杂合896G>A(299Gly>Glu)(n=2)。结论广州地区无偿献血者人群中,Jk(a-b-)的分布频率高于已报道的北方人群。高频率分布于太平洋波利尼西亚群岛的变异IVS5-1G>A,也是本人群中最常见的基因变异。

多重连接依赖的探针扩增(MLPA)技术在广州地区RhD阴性献血者基因分型研究中的应用

目的采用新型Rh血型系统的MLPA检测试剂盒,对广州地区收集的200名RhD阴性献血者进行基因分型。方法采用传统的血型血清学方法,对RhD阴性献血者进行RhD表型鉴定。提取基因组DNA,采用MLPA检测试剂盒对收集的200名RhD阴性献血者进行RHD基因分型。对于不能明确分型的标本,进行RHD基因直接测序分析。结果在200名RhD阴性献血者中,采用MLPA方法对196名进行了明确的基因分型。其中,127名为RHD基因缺失(占63.5%);仅检测到包含RHD1227A突变的DEL等位基因有41例,其中38例包含杂合等位基因,其余3例包含纯合等位基因;仅检测到RHD(1-2)-CE(3-9)-D(10)等位基因的有23例,其中19例杂合,4例纯合;3例包含2种不同的RHD等位基因(1条为RHD(1-2)-CE(3-9)-D(10),另1条为RHD1227A);其余2例分别包含杂合的DFR-2(RHD-CE(4)-D)及弱D15型(RHD845A)等位基因。在其余4例直接测序分析的标本中,2例包含杂合的RHD711delC突变;1例1条等位基因为MLPA检测到的包含RHD1227A突变的DEL等位基因,另1条为包含711delC突变的RHD等位基因;其余1例的1条等位基因为MLPA检测到的RHD(1-2)-CE(3-9)-D(10),另1条为包含新突变的RHD等位基因(1154G>T,385Gly>Val)。结论 MLPA检测试剂盒是适用于中国人群的1种快速、有效的高通量基因分型方法,能够对中国人群常见的各种RHD基因型进行明确分型,适用于参比实验室相关疑难标本的基因分型检测。也可应用于中国人群常见的Del表型检测,使Del表型患者不必再输注RhD阴性血液,节约稀有的RhD阴性血液资源。

昆明种小鼠正常行为发育指标探讨

目的 探讨昆明种小白鼠生长和行为发育指标 ,为小鼠行为毒理学测试方法标准化提供依据。方法 选用 44只昆明种孕鼠 ,自然分娩 ,观察其哺乳情况及仔鼠耳廓分离、上下牙萌出、张耳、睁眼、睾丸下降、阴道开口等生理发育指标、平面翻正、前肢悬挂、爬行、空中翻正及负重游泳等神经反射和运动协调功能。结果 每只孕鼠平均产仔 (11 93± 2 71)只 ,仔鼠出生存活率为 86 0 9% ,哺育存活率为 6 6 5 1%。结论 昆明种小白鼠生理发育指标与B6C3F1小鼠及CD 1小鼠各发育指标大致相当 ,平面翻正指标差别较大 ,可能与观察方法或小鼠品系有关。该试验为进一步的研究提供了参考依据。

高通量MLPA基因分型技术在1个D^(el)表型家系基因鉴定中的应用

目的对1个Del表型家系作基因鉴定。方法运用血型血清学方法对先证者及其家系的3名成员作RhD及相关血型抗原鉴定;提取先证者及其父母和妹妹的静脉血DNA。运用高通量红细胞血型基因的多重连接依赖探针扩增技术(MLPA)对先证者及其他成员血型基因作定性及定量分型;用PCR产物直接测序方法对发现的变异作确认。结果血型血清学检测:先证者为Del表型,其他3名家系成员为正常的RhD阳性个体。MLPA基因分型:先证者有2条包含1227G>A突变位点的RHD等位基因,而3名家系成员有1条包含1227G>A突变位点的RHD等位基因及1条正常的RHD等位基因。结论高通量红细胞血型基因分型的MLPA技术能够对Del表型作明确的基因鉴定,有助于节约宝贵的RhD阴性血液。

弱D72血型的血清学特征及分子生物学分析

目的了解广州地区人群中弱D72血型的血清学特征及分子遗传背景。方法从广州血液中心献血者人群中收集了62人份D变异型标本,采用多重连接依赖的探针扩增(MLPA)技术做RHD及RHCE基因分型;对于MLPA检测不到的RHD突变型等位基因,对其10个外显子做直接测序分析,并采用D抗原表位分析试剂盒(DScreen)及其他7种单克隆抗-D做D抗原表位血清学检测。结果在62例D变异型标本中,共发现26例弱D表型,其中弱D72突变型等位基因5例[占8.1%(5/62)],4例为RHD*weak D type 72/RHD*01N.01(RHD基因缺失)和Ccee,1例为RHD*weak D type 72/RHD*DVI.3和CCeee。取1例RHD*weak D type 72/RHD*01N.01的红细胞标本做D抗原表位血清学检测:其与D-Screen试剂盒的9种单克隆抗-D均呈阳性反应,反应强度为1+~2+,与其余7种单克隆抗-D也均呈阳性反应,反应强度为w+~1+。结论血型血清学分析初步提示弱D72血型D抗原表位完整,但该血型个体在免疫刺激下是否不会产生抗-D仍需进一步临床证据证实。

吸烟对男性生殖和遗传毒性的研究进展

吸烟作为一个社会问题受到广泛关注 ,目前研究认为吸烟可对生殖系统存在有害影响。从吸烟对睾丸功能、精液质量、生殖内分泌功能的影响及吸烟对生殖细胞的遗传毒作用几个方面 ,总结了近几年国内外有关吸烟对男性生殖与遗传毒性研究进展 ,为进一步研究吸烟的生殖毒性提供参考。

广州地区类孟买型个体FUT1和FUT2基因的分子遗传学研究

目的类孟买型个体的主要血型血清学特征是红细胞表面缺乏或部分缺乏H抗原,但是其唾液中含有ABH血型物质。中国人群中,福建台湾地区类孟买型个体的频率大约在1∶8000～1∶8500之间。迄今为止,中国人群中类孟买个体共报道过16种FUT1等位基因和4种FUT2等位基因。本研究中,对广州地区收集的8名的类孟买血型个体,进行了FUT1和FUT2基因分析。方法通过传统的血型血清学方法对类孟买血型表型进行鉴定。PCR扩增FUT1和FUT2基因的编码区域,并对PCR产物进行直接测序。采用Inno-train的ABO血型试剂盒,利用PCR-SSP方法对类孟买个体进行ABO血型基因分型。

1条突变型RHCE*ce新等位基因的发现

目的采用新型Rh血型系统的多重连接依赖式探针扩增(MLPA)检测试剂盒,对广州地区收集的200例RhD阴性献血者进行RHCE基因分型。方法收集RhD阴性献血者200例,从静脉血提取基因组DNA,采用MLPA检测试剂盒进行RHCE基因分型和拷贝数定量分析。对MLPA显示的RHCE拷贝数异常的样本,进行RHCE基因外显子1至10测序分析。对发现的杂合突变进行克隆测序。结果在200例RhD阴性献血者中,MLPA基因分型结果显示有6例标本RHCE等位基因定量拷贝数下降,测序发现RHCE基因外显子2的一个新杂合突变(c.308C>T,p.103Pro>Leu),克隆测序证实了该突变。结论在中国人群中,首次发现了一条新的突变型RHCE*ce(308C>T)等位基因,该等位基因在广州地区RhD阴性献血者中频率为6/400。

用于光学小波变换的图像压缩方法

小波图像压缩数据量大,实现需时较长。本文将光学小波变换技术应用于图像数据压缩,分析光学小波变换系统和光学小波变换系数特点,对相关量化编码方案进行仿真实验,提出适用于光学系统的压缩方案,并实现光学小波变换的有损压缩。通过分析光学系统对量化编码噪声的容许程度,提出光学系统的近无损压缩方法。实验结果表明,近无损压缩重建图像与经光学小波变换直接重建图像相比,PSNR仅有0.1dB的差异,视觉上没有明显差异。

镉处理对小鼠睾丸间质细胞PI3K/AKT信号通路的影响

目的探讨镉对小鼠睾丸间质细胞3-磷酸肌醇激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路的影响。方法 TM3细胞经20μmol/L Cd Cl2处理,分别在加入Cd Cl24 h和8 h后收集细胞;对照组给予相应体积的PBS,8 h后收集细胞。利用实时定量RT-PCR法测定炎症相关细胞因子白细胞介素(IL)-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-6、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、巨噬细胞炎性蛋白(MIP)-2、MIP-1和环氧合酶(COX)-2 mRNA的表达水平以及用Western blot法检测细胞COX-2、AKT和p-AKT蛋白的表达水平。结果与对照组相比,镉能够显著诱导TNF-α和IL-6 mRNA的表达(P<0.01);镉处理4 h组MCP-1 mRNA表达水平明显高于对照组(P<0.01),而镉处理8 h组MCP-1 mRNA表达水平与对照组相比差异无统计学意义;镉对TM3细胞MIP-1和MIP-2mRNA表达差异无统计学意义;镉能够明显诱导TM3细胞COX-2蛋白和mRNA的表达(P<0.01)。此外,镉处理组pAKT蛋白表达水平也明显高于对照组(P<0.01)。结论镉可能通过激活TM3细胞中PI3K/AKT信号通路进而选择性调节部分炎症相关细胞因子的表达。

香烟烟雾水溶物对小鼠的急性毒性和骨髓嗜多染红细胞微核率的影响

[目的] 探讨香烟烟雾水溶物对雄性健康小鼠的急性毒性作用及其对骨髓嗜多染红细胞微核率的影响. [方法] 以香烟烟雾水溶物为试验材料,用Horn＇s法测其LD50,进行小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验.[结果] 该香烟烟雾水溶物的LD50为56.2 mg/kg,95%可信区间为33.8～82.5 mg/kg,按毒性分级标准,该水溶性提取物的毒性为中等毒;其低、中、高 （1/8 LD50、1/4 LD50、1/2 LD50）剂量组的微核率分别为4.0‰、6.2‰、10.2‰,明显高于阴性对照组的1.8‰,并在一定范围内呈现明显的剂量-反应关系.[结论] 香烟烟雾水溶物对小鼠有较强的急性毒性,属于中等毒,可引起小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率增高,有一定的致突变作用.

应用IDCORE+和MLPA平台对广州地区无偿献血者人群进行红细胞抗原高通量基因分型的初步研究

目的红细胞血型抗原的准确鉴定对于输血安全至关重要。采用传统的血型血清学方法,对诸多临床相关的红细胞血型抗原进行分型的效率低,并且价格昂贵。在国内,由于缺乏足够的商业化特异性抗体,这种问题就显得更为突出。而对献血者和患者进行高通量的血型抗原分型,是为已产生抗体患者、需要长期输血患者,及稀有血型患者提供匹配血液的有效途径。相对于血型血清学方法,高通量的基因分型平台能够在短时间内及缺乏抗体的情况下,实现血型抗原分型。

浅析高校人事档案的精细化管理

高校人事档案是在学校组织人事管理活动中形成,并经组织审查或认可的,记录、反映人员经历和德才表现等原貌,以个人为单位立卷归档保存的文字、声音、[1]图像、照片等形式的档案。由于它涉及的人员众多、类型多样,且有很大的动态性。在“互联网＋”时代,如何做到高校人事档案的精细、有效管理,已是档案管理工作者不得不思考的问题。