七叶一枝花中6种甾体皂苷与土壤肥力的相关性探究

目的探究七叶一枝花中6种甾体皂苷与土壤肥力的相关性。方法采用UPLC-ELSD法同时测定重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷H、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅱ、纤细薯蓣皂苷、重楼皂苷Ⅰ皂苷的含有量;采用硫酸-重铬酸钾法、碱解扩散法、钼锑抗比色法和乙酸铵提取-火焰光度法分别测定土壤有机质、碱解氮、速效磷、速效钾等土壤肥力指标;采用相关性分析法、逐步回归分析法、灰色关联度法等统计方法综合分析土壤因子与6种甾体皂苷的相关性。结果10批样品中重楼皂苷含有量有6份样品符合2015年版《中国药典》标准;土壤肥力指标中对6种甾体皂苷含有量总体影响最大的为速效磷和速效钾;速效磷可以直接影响重楼皂苷Ⅱ和纤细薯蓣皂苷的含有量;有机质、碱解氮、速效磷、速效钾可以直接影响重楼皂苷H、重楼皂苷Ⅵ的含有量。结论土壤因子是影响6种甾体皂苷含有量的主要因素,不同土壤肥力的七叶一枝花的甾体皂苷含有量存在明显差异。

大理重楼和独龙重楼的野生资源分布和皂苷类成分评价

评价大理重楼和独龙重楼的野生资源分布情况和皂苷类成分.采用实地调研考察,并根据《中国药典》2015年版重楼项下3种重楼皂苷,增加重楼皂苷Ⅰ、纤细薯蓣皂苷、重楼皂苷H为指标,以课题组已经建立的ELSD-UPLC法测定大理重楼和独龙重楼中6种皂苷成分含量.结果表明:1)大理重楼除模式产地云南大理,在保山市腾冲市和贵州赫章县也发现了大理重楼的新分布,野生资源蕴藏量较少;独龙重楼只发现分布在云南省怒江州贡山县独龙江乡,野生资源蕴藏量更少;2)二者尚未被《中国药典》2015年版收载或者各省级药材标准中,但是其根茎在云南、贵州等各地民间也作为重楼药材使用;3)10批大理重楼根茎皂苷类成分总含量平均值高于药典规定标准1倍多,主要含有重楼皂苷Ⅶ和重楼皂苷H;4)在仅采集到的7批独龙重楼皂苷类成分总含量平均值达到药典规定标准,主要含有重楼皂苷Ⅰ和纤细偏诺皂苷,得出大理重楼和独龙重楼资源均稀少结论,建议高度重视开展人工繁育与资源保护工作;大理重楼根茎主要成分为偏诺皂苷(“宫血宁”有效成分),独龙重楼根茎主要成分为薯蓣皂苷(“抗病毒颗粒”消炎、抗菌、抗病毒有效成分),可为大理重楼和独龙重楼的省级药材标准建立和临床用药新药资源开发提供参考依据.

彝药材“欺补景”的鉴别研究

目的:对彝药材“欺补景”(西南委陵菜Potentilla fulgens Wall.ex Hook.)的生药学鉴别特征进行系统观察和比较,筛选出具有鉴别意义的特征。方法:通过原植物鉴定、药材性状鉴定、显微组织和花粉粒电镜鉴定以及利用表儿茶素作为对照品进行薄层色谱鉴定等方法,寻找鉴别特征。结果:原植物叶背密被白色绢毛,根粗壮。横切面组织中存在初生和次生木质部,内含红色分泌物,粉末中可见非腺毛、草酸钙簇晶和方晶以及石细胞等特征。花粉粒长球形或类长球形,具三孔沟,表面具条状纹饰。结论:该研究结果为彝药材“欺补景”今后四川省彝药材质量标准及起草说明的制定、彝医民族传统制剂的开发利用提供了重要的实验依据。

基于七叶一枝花中高含量皂苷类成分的氮、磷、钾配施方案研究

目的研究氮、磷、钾肥配施对七叶一枝花Parispolyphyllavar.chinensis中皂苷类成分含量的影响,以优化七叶一枝花最佳氮、磷、钾配施方案,为其合理施肥提供科学依据。方法以3因素5水平二次回归通用旋转组合设计安排田间试验,采用UPLC-ELSD法测定七叶一枝花中7种皂苷含量,通过方差分析建立回归方程(经F检验),利用模型分析氮、磷、钾配施对各皂苷含量的影响,使用统计频数法筛选最优施肥方案。结果贡献率分析表明,氮肥对重楼皂苷II、V的贡献率最大,磷肥对重楼皂苷H、纤细薯蓣皂苷的贡献率最大,钾肥对重楼皂苷I、Ⅵ、Ⅶ的贡献率最大。单因素分析表明,氮、磷、钾对重楼皂苷Ⅶ、Ⅵ含量有极显著影响(P<0.01);互作效应分析表明,不同浓度的氮肥、磷肥和钾肥的协同作用显著提高重楼皂苷Ⅵ的含量;根据回归模型分析最佳施肥范围,取交集得氮、磷、钾肥最优施肥范围分别为516.39~557.19、2771.70~2848.20、461.61~502.65kg/hm^(2)。结论建立了重楼皂苷与氮、磷、钾肥配施的相关性回归方程模型,有利于七叶一枝花中皂苷类成分含量的提高,为合理施肥提供科学性依据。

基于多元统计分析的川产道地药材江油附子和川乌中6种生物碱含量比较研究

目的建立UPLC法同时测定附子和川乌中苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、新乌头碱、乌头碱和次乌头碱6种生物碱含量的方法,并采用多元统计分析方法比较附子和川乌中的6种生物碱的含量差异。方法采用0.05mol/m L盐酸水超声提取附子和川乌中的生物碱类成分,BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱;乙腈-水梯度洗脱;体积流量0.1 mL/min,柱温35℃;进样体积4μL;检测波长235 nm。采用差异显著性分析、效/毒值分析、毒性成分指数分析、相关性分析、聚类热图分析、主成分分析和TOPSIS分析进行数据处理,综合评价附子和川乌的质量。结果方法学考察结果符合规定,附子和川乌中苯甲酰次乌头原碱、新乌头碱、次乌头碱和MDAs含量差异极显著,苯甲酰新乌头原碱和苯甲酰乌头原碱含量差异显著,乌头碱和双酯型生物碱(DDAs)含量差异不显著。以6种生物碱为评价指标,15号附子样品质量最优,7号川乌样品质量最优。结论建立的方法操作简单、准确可靠,具有良好的精密度、稳定性、重复性,可用于附子和川乌中生物碱类化合物的定量测定;效/毒值、毒性成分指数的运用能更精确、简便地实现附子和川乌的质量控制;基于多元统计分析可更准确地进行药材质量评价。可为进一步完善《中国药典》附子和川乌中酯型生物碱的分析测定提供参考,为附子和川乌的质量控制及评价提供科学依据。

氮、磷、钾配施对华重楼根茎的产量和有效成分含量的影响

目的 研究不同梯度水平氮、磷、钾肥对华重楼根茎的产量和品质的影响,确定华重楼植物的最适施肥方案,为合理施肥提供科学依据。方法 采用3因素5水平2次通用旋转组合设计进行田间试验,研究氮、磷、钾肥配施对华重楼根茎的产量总皂苷含量、灰分、水分和浸出物的影响。结果 建立的回归方程均达到显著水平;当施用氮肥41.66~52.60 kg/hm^2、磷肥181.38~244.38 kg/hm^2、钾肥24.16~35.20 kg/hm^2时,华重楼根茎的增重率大于81.72%;当施用氮肥45.48~53.83kg/hm^2、磷肥179.98~236.83 kg/hm^2、钾肥29.80~39.95 kg/hm^2时,华重楼根茎的总皂苷含量大于11.09%;当施用氮肥28.01~37.79 kg/hm^2、磷肥127.18~209.18 kg/hm^2、钾肥25.27~34.09 kg/hm^2时,华重楼根茎的浸出物含量大于14.31%。结论 氮、磷、钾肥配施有利于华重楼根茎的增重率、总皂苷含量和浸出物含量的提高,华重楼植物的最佳施肥量为氮肥37.79~45.48kg/hm^2、磷肥181.38~209.18 kg/hm^2、钾肥29.80~34.09 kg/hm^2。

基于高通量测序研究甘松根际细菌及药用部位内生细菌群落结构及多样性

目的探析并比较野生甘松Nardostachys jatamansi与仿野生栽培甘松的根际细菌与内生细菌的种群组成、丰富度、多样性及差异性。方法以野生甘松和仿野生栽培甘松的根际土壤、根及根茎为研究样本,基于Illumina MiSeq第二代高通量测序技术对根际土壤细菌、根及根茎内生细菌的16S rDNA V4-V5区进行序列测定,并进行相关生物信息学分析。结果各组样本基因组经16S测序,细菌群落的所有序列分别进行97%的相似水平下的物种分类单元(operational taxonomic units,OUT)分类,根际细菌共涉及22门、38纲、69目、119科、254属、268种,内生细菌共涉及16门、29纲、60目、107科、199属、145种。根际、内生细菌群落中共有的序列分别为498个、177个,主成分分析的最主要2类主成分(PC1和PC2)类群的比例综合分别接近70%、60%,其中丰度排在前4位的依次为变形菌门、放线菌门、酸杆菌门和拟杆菌门,其他类群的类别及相对丰度存在一定差异。优势细菌差异分析中,各组细菌群落组成及相对丰度差异很大。结论野生甘松和仿野生栽培甘松的优势促生菌群可能主要集中于变形菌门、放线菌门、酸杆菌门和拟杆菌门,可从中筛选出核心功能微生物混合菌群,对改良仿野生培育甘松土壤的微生物环境具有理论指导意义。

臭节草UPLC指纹图谱及指标性成分研究

采用UPLC建立臭节草药材指纹图谱及绿原酸等12种指标成分的含量测定方法,采用多元统计分析法寻找臭节草药材指标性成分,建立臭节草质量的综合评价体系,对臭节草药材进行质量评价。以33批不同来源臭节草药材为研究对象,建立臭节草药材UPLC指纹图谱,确定37个共有峰,指认了12种化学成分,并建立了其含量测定方法;结合指纹图谱共有峰与化学成分的含量,进行多维统计分析,结果西瑞香素、异欧前胡素、紫云英苷、欧前胡素、新绿原酸、异槲皮苷(权重>0.1)等6个成分为该药材的指标性成分;采用2种统计分析的评价结果一致:S32、S28和S29等样品质量较优,S12、S7和S16样品质量较差。该研究建立的臭节草质量评价方法准确可靠、简便可行,建议西瑞香素、异欧前胡素、紫云英苷、欧前胡素、新绿原酸、异槲皮苷6种化合物为臭节草药材质量控制指标性成分,样品采收期为花果期(7月初到8月底)。