miR-93对延边黄牛垂体细胞GH分泌的影响

为了分析血液外泌体miRNA对延边黄牛垂体细胞生长激素(GH)分泌的影响,试验选择在延边黄牛和韩延牛血液外泌体中存在显著差异表达的miR-93,分析其对延边黄牛垂体细胞GH分泌的影响机制。试验首先进行延边黄牛垂体细胞的原代培养,之后将miR-93的mimics(miR-93-mi组)、mimics对照品(NC对照组)、inhibitor(miR-93-in组)、inhibitor对照品(iNC组)转染给已建立的垂体原代细胞,48 h后收集细胞,提取总mRNA和总蛋白。试验利用targetscan和RNAhybrid分析软件对miR-93的靶基因进行预测,并利用双荧光素酶报告基因系统对miR-93的靶关系进行验证;利用实时荧光定量PCR和Western blotting技术分别检测靶基因mRNA转录和蛋白的表达情况,结果表明,miR-93靶向了生长激素释放激素受体(GHRHR)的3′UTR;与NC对照组比较,miR-93-mi组的延边黄牛垂体细胞中GH mRNA转录和蛋白表达均极显著低于NC对照组(P<0.01);miR-93-mi组的GHRH mRNA转录和蛋白表达均极显著低于NC对照组(P<0.01),而miR-93-in组的GHRHR蛋白表达显著高于iNC对照组(P<0.05)。说明miR-93可通过调节GHRHR的表达而调控延边黄牛垂体细胞GH的分泌,进而调控延边黄牛的生长发育。

家兔精液冷冻保存的研究

以家兔为试验动物,通过精液在4℃保存时间来筛选合适的基础液,并从精液解冻后的精子活率和活力2个指标筛选出最佳的平衡时间和抗冻剂(甘油)浓度.冷冻保护液中渗透性抗冻剂(甘油)的3种浓度为3%,4%和5%.4℃平衡时间分别为2,3,4 h.将3种甘油浓度的冷冻保护液与3种平衡时间相配伍,共9组进行冷冻试验,筛选出稀释液为:Tris 3.03 g,柠檬酸1.30 g,果糖1.50 g,卵黄20%,青、链霉素各1×105U,双蒸水100 mL.冷冻后结果表明,3%的甘油浓度平衡3 h,解冻后精子活力在0.3以上,达到人工授精的要求.

和谐校园文化与大学和谐校园

大学是文化的传播者、发源地和辐射源[1].成功和谐的校园文化代表了学校的风格和水平,建设高校和谐校园文化是高校精神文明建设的重要任务,对培养和提高大学生的思想素质、道德素质、科学文化素质、能力素质具有十分重要的作用.

miR-6523a对延边黄牛垂体细胞中生长激素分泌的影响

为研究血液外胞体中miRNA对延边黄牛垂体细胞中生长激素(GH)分泌的影响,本研究选择在延边黄牛和韩延牛血液外胞体中显著差异表达的miR-6523a,利用实时定量PCR(qPCR)和Western Blot技术,研究了miR-6523a对延边黄牛垂体细胞中GH分泌水平的影响及miR-6523a与靶基因间的调控机制。生物信息学分析和双荧光素酶报告基因系统结果显示,miR-6523a靶向了SSTR5的3′非翻译区(UTR);qPCR和Western Blot检测结果显示,与对照组相比,添加miR-6523a-mi能极显著提高延边黄牛垂体细胞中GH mRNA和蛋白的表达(P<0.01),而添加miR-6523a-in,GH mRNA和蛋白的表达有所降低,但和对照组相比差异不显著(P>0.05);与对照组相比,添加miR-6523a-mi能极显著抑制SSTR5 mRNA和蛋白的表达(P<0.01),而添加miR-6523a-in,SSTR5 mRNA和蛋白的表达均有所提高,但和对照组相比差异不显著(P>0.05)。本研究表明,miR-6523a可通过调节SSTR5基因的表达而调控垂体细胞中GH的分泌,本研究结果将为研究外胞体miRNA调控动物生长发育机制提供理论依据。

延边黄牛和韩延牛血液外胞体中miRNA的差异表达分析

为进一步探讨Exosome中miRNA对延边黄牛和韩延牛生长发育的分子调控差异。本研究从延边黄牛和韩延牛血液Exosome中分离出miRNA,通过RNASEQ测序和生物信息学技术分析了延边黄牛及韩延牛血液Exosome中miRNA的表达特点。结果表明,在延边黄牛和韩延牛血液Exosome中获得差异表达miRNA有524个,其中上调表达的271个,下调表达的253个,其中已知miRNA382个,新miRNA142个;差异表达miRNA的靶基因预测结果说明,在两个品种牛中共预测到52348个靶基因。GO富集分析可知,这些靶基因被富集到3473条生物学过程,394条细胞组分以及879条分子功能。KEGG分析可知,这些预测得到的miRNA的靶基因总共被注释到326条信号通路中,其中最显著富集的通路为mTOR信号传导通路。其中显著差异表达的miR-9-5p和miR-99b调控的一些靶基因都与mTOR信号通路有密切的关系。结论:血液Exosome中的miR-9-5p和miR-99b在延边黄牛和韩延牛生长发育差异的过程中可能发挥重要的作用。将为下一步在分子水平上探讨关键差异表miRNA影响边黄牛和韩延牛生长发育差异的分子机制提供试验基础。

孕酮对犬超数排卵的影响

本试验分别以繁殖机能正常、健康无病、不发情及未孕的8只2～3岁雌性土犬为实验材料,探讨孕酮对犬同期发情和超数排卵的影响,为犬人工授精和体外受精技术提供试验依据。结果如下:A组母犬(孕酮处理组)按体重0.1mg/kg注射孕酮,出现阴道肿胀、阴道出血及允许爬跨的平均时间分别1.25天、1.75天和2.13天,均少于B组母犬(空白对照组),差异极显著(P<0.01)。同时,第三天进行阴道细胞学变化观察,发现A组母犬发情效果较好,而B组发情效果不明显。

对高校培养创新型人才的认识与思考

创新型人才是社会不断发展和进步的需要,我们必须高度重视创新型人才的培养,创造良好的教育环境,制定新型的教育方案,改革培养模式和办学理念,培养学生的创新意识、创新精神、创新情感和创新思维。

气肿疽梭菌菌体抗原分析

[目的]了解气肿疽梭菌的抗原特性。[方法]对气肿疽梭菌标准菌株(C54-1)的菌体抗原进行提纯过柱,通过制备小鼠免疫血清及免疫印迹技术进行了反应原性试验。[结果]气肿疽梭菌的菌体抗原有8条蛋白带,电泳图谱上分别出现了与之相对应的条带,分子质量分别为93、72、56、46、38、26、15、11 kD,其中第2(72 kD)、5(38 kD)、6(26 kD)峰的抗原表现出明显的特异性。用酶联免疫印迹技术分析气肿疽梭菌分泌蛋白的抗原组分,气肿疽梭菌感染小鼠的血清能与抗原组分蛋白发生反应,其中72、38、26 kD蛋白带显色最深。[结论]为气肿疽梭菌的深入研究提供了理论依据。

延边黄牛与韩延牛血液Exosome对延边黄牛垂体细胞中GH含量的影响

［目的］从延边黄牛和韩延牛血液中分离Exosome（外胞体），研究2种外胞体对延边黄牛垂体细胞中GH含量的影响。［方法］通过超高速离心等方法，从延边黄牛和韩延牛血液中分离Exosome，并以100 ng/mL的浓度分别转染给原代培养的延边黄牛垂体细胞培养12、24和48 h，对细胞上清液中GH含量进行检测。［结果］ 电镜下延边黄牛与韩延牛血液Exosome均呈圆形或椭圆形的双层膜小囊泡，直径均为30~100 nm，膜结构完整。韩延牛Exosome处理组的延边黄牛垂体细胞GH mRNA表达显著高于延边黄牛Exosome处理组（P〉0.05）。韩延牛血液Exosome处理组垂体中GH的含量显著高于延边黄牛血液Exosome处理组（P〉0.05）。［结论］延边黄牛和韩延牛血液中的Exosome对延边黄牛垂体细胞中GH含量的影响有明显差异。

教学研究型大学动物科学系教学实践基地建设探索

教学实践基地是帮助学生更好地掌握、运用所学知识的一个重要教学场所。该文从实践基地的基本情况、利用情况以及所存在的一些问题及需要改革的地方等进行了探讨。

冻精解冻温度、离心速度及精卵共培养时间对延边黄牛卵母细胞体外受精的影响

进行延边黄牛冻精解冻温度、离心速度及精卵共培养时间等因素对延边黄牛体外受精效果影响的研究,旨在找出适用于延边黄牛体外受精的技术体系,为延边黄牛体外胚胎的产业化生产奠定基础.结果表明,在39℃下解冻精子,其顶体反应率和受精率分别为85.47%和75.85%,高于37,38和40℃等处理组,差异显著(P<0.05);采用1 500r/min离心速度对精子进行离心处理,其顶体反应率和受精率分别为82.47%和72.15%,高于900和1 800r/min处理组,但差异不显著(P>0.05);精卵共培养24h时卵母细胞受精率为75.33%,高于6和12h组,但差异不显著(P>0.05).

五指山猪肾上腺的形态学观察

为了丰富五指山猪的形态学资料,本研究采用大体解剖学和组织学技术对五指山猪肾上腺进行系统的形态学观察。结果表明,五指山猪左肾上腺呈长椭圆形,右肾上腺呈三棱柱形;肾上腺的被膜由不规则的结缔组织构成,皮质从外向内分为球状带、束状带和网状带,髓质位于肾上腺的中央,分内区和外区,髓质中央有一大的中央静脉。

在《动物遗传学》教学过程中的实践与体会

《动物遗传学》作为现代农业高校基础课程,在医学、环境、生物多样性等方面的应用更为广泛。遗传学知识在各个学科的扩展与延伸表现尤为重要,尤其作为畜牧专业的必修课程更是意义深远。遗传学理论具有较强的理论性及逻辑性,在教学实践中将较为抽象的理论知识应用现代课堂多样化的教学方式教学手段和网络资源,助推学生的学习积极性和主动性提高,从而达到提高教学的效率与质量的目的。

延边黄牛血液Exosome的提取和鉴定

[目的]从延边黄牛血液中分离并鉴定外胞体（Exosome）。[方法]通过低速离心、高速离心、超滤及超高速离心等方法从延边黄牛血液中分离Exosome,用电子显微镜观察其形态特征,采用Lorry方法进行蛋白定量。[结果]延边黄牛血液中含有大量的Exosome,电镜下呈圆形或椭圆形的双层膜小囊泡,直径为30-100 nm,膜结构完整。蛋白定量为2 mg/ml。[结论]用离心的方法可以从延边黄牛血液中获得Exosome,为进一步研究Exosome对延边黄牛生长轴调控的分子机制奠定基础。

红色荧光转基因五指山猪大叶性肺炎的病理学观察

采用病理解剖学和病理组织学技术对1例疑似大叶性肺炎而死亡的红色荧光转基因五指山猪进行病理诊断。结果表明,病猪主要病变体现在肺脏,肺充满整个胸腔,表面附有絮状渗出物,呈灰红色,局部可见暗红色的出血斑,质硬如肝,切面干燥,投入水中完全下沉;显微镜下主要呈现大叶性肺炎的红色肝变期和灰色肝变期的病变特点,心、肝、肾、脾、胰腺等其他器官充血,可见轻微的细胞变性,结合其临床症状,确诊为大叶性肺炎。此外,死亡红色荧光转基因五指山猪的各组织器官呈红色,颜色深浅因不同器官而有差异。这将为进一步探讨红色荧光转基因猪的研究提供病理学基础资料。

猪流行性腹泻病毒(PEDV)核酸疫苗研究进展

猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是危害养猪业健康发展的重要疾病之一。它是急性的,具有高度传染性,给养猪业造成严重的经济损失。猪流行性腹泻病毒(Porcineepidemic diarrheavirus,PEDV)感染会破坏动物的消化系统,导致患猪食欲不振,呕吐和严重腹泻,用药物治愈的仔猪也会受到生长不良等因素的严重影响。与传统的PEDV灭活疫苗和PEDV减毒疫苗相比,PEDV核酸疫苗具有安全性好,制备简单,免疫效果好的优点。文章着重对PEDV发病机理和PEDV核酸疫苗的研究进展展开综述,从而加深对PEDV和PEDV核酸疫苗的了解,以期为PEDV感染的预防和控制措施提供参考。

长白山野杂猪和东北民猪背最长肌的mRNA转录组比较分析

本研究通过RNA-seq技术对3个长白山野杂猪与3个东北民猪背最长肌样本进行了mRNA测序和差异分析,从而为筛选长白山野杂猪肉质性状功能基因奠定基础。结果显示:在长白山野杂猪与东北民猪中均有100%以上的序列能完全比对到猪的基因组上,而所转录的基因占总基因的比例在3头长白山野杂猪中平均为59.67%,3头东北民猪为58.73%,而在不同个体间SNP位点数为14299~19671;在2个品种猪背最长肌中共表达基因有15842个,仅在长白山野杂猪中表达的基因有619个,仅在东北民猪中表达的基因有710个;在2个品种猪背最长肌中共获得显著差异表达的基因153个,其中在长白山野杂猪中上调表达的基因有55个,下调表达的基因有98个;GO分析显示,153个差异表达基因被注释到33条GO条目中,其中11条被注释到生物学过程中,11条被注释到细胞组分,11条被注释到分子功能;KEGG分析显示,这些差异表达基因被富集到130条通路中,其中主要与脂肪代谢相关的信号通路有关。结果表明,长白山野杂猪与东北民猪背最长肌中mRNA表达存在差异,这些差异表达基因将是将来研究2个品种猪间肉质差异的主要靶标之一。

不同采精法对犬精液品质的影响

本试验采用手握采精法、电刺激采精法及附睾采精法采集精液,进而进行精液品质分析,本试验以繁殖机能正常、健康无病的1只2岁雄性土犬及延边某屠宰场提供的50只2～7岁之间肉用公犬为实验材料,探讨不同采精法对犬精液品质的影响,为犬人工授精和体外受精技术提供试验依据。结果如下:附睾采精法采集犬精子活率为39.70%,显著低于手握法62.90%和电刺激采精法60.33%(P<0.05),手握法采集精液为最佳方法。

1例圈养黑熊原发性肝癌的病理学诊断

为了给野生动物肿瘤性疾病的诊断提供病理学依据,本试验以某动物医院收诊的1例圈养黑熊肝肿瘤为试验样本,进行病理学观察。结果显示,眼观:圈养黑熊肝脏肿大、坚硬,表面可见多个灰白色或淡黄色、大小不一的肿瘤结节,切面可见结节均质、质地坚硬、直径在5 cm以下,结节与周围组织界限不明显,无包膜;镜下:肿瘤结节周围无包膜,肿瘤细胞排列成大小不一的管状或腺泡状,肿瘤细胞呈立方状或柱状,异型性大,胞浆少,常可见细胞分裂象,肿瘤结节的间质增生明显,将肿瘤组织分离成大小不一的小叶,呈现随肿瘤结节增大,其纤维化结缔组织所占比例增多的现象,严重的可见到肿瘤结节中心肿瘤细胞变性坏死,发生凝固性坏死,仅在其周边与肝组织相邻部可见松散的管状或腺泡样排列的肿瘤细胞。根据临床症状、眼观及镜下病变特点,诊断该肿瘤为胆管细胞型肝癌。

一例长白山野杂猪大肠杆菌病的病理学观察

大肠杆菌病对长白山野杂猪的生存造成了严重威胁,大肠杆菌对新生、成年野杂猪都具有感染能力,该病多发于幼龄野杂猪,是发病率和病死率较高的疾病。试验以延边大学动物医院一头疑似大肠杆菌病的长白山野杂猪为实验动物,运用解剖学和病理组织学的观察方法观察其病理学变化特点。为猪大肠杆菌的诊断及防治奠定基础。