基于Nrf2/ARE信号通路探讨夹脊电针对神经根型颈椎病模型大鼠的作用机制

目的:观察夹脊电针对神经根型颈椎病(CSR)模型大鼠的作用效应,从Nrf2/ARE通路探究其作用机制。方法:将75只SPF级SD大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、针刺组和电针组。空白对照组不予任何处理,用手术方法将用福尔马林溶液浸泡过的定量滤纸片放在C 8神经根腋下建立CSR型,假手术组仅暴露神经根,不放置滤纸片。造模完成后观察各组大鼠的疼痛行为表现、步态障碍评分和抓握能力评分,从造模后第4天开始,假手术组和模型组予以每日捆绑15 min,针刺组予以每日捆绑+针刺15 min,电针组予以每日捆绑+电针15 min。治疗结束后用试剂盒检测大鼠血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的含量或活力,运用Western blot技术检测大鼠神经根组织中核因子E2相关因子(Nrf2)、抗体Kelch样ECH相关蛋白(Keap1)和血红素氧合酶(HO-1)的表达。结果:针刺组和电针组大鼠疼痛行为表现、步态障碍和抓握能力改善程度和好转速度均优于模型组。与空白对照组比较,假手术组大鼠血清MDA的含量、SOD与GSH-PX的活性差异无统计学意义(P>0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠血清MDA的含量显著升高,SOD与GSH-PX的活性显著降低,并且神经根组织Nrf2与HO-1表达显著下降,Keap1表达显著上升,差异具有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,针刺组和电针组大鼠血清MDA的含量明显降低,SOD的活性明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05),GSH-PX的活性显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01),神经根组织Nrf2与HO-1的表达显著上升,Keap1的表达显著下降,差异具有统计学意义(P<0.01)。与针刺组比较,电针组大鼠血清MDA的含量明显升高,SOD与GSH-PX的活性明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05),神经根组织Nrf2的表达显著上升,差异具有统计学意义(P<0.01),HO-1的表达明显上升,差异具有统计学意义(P<0.05),Keap1的表达显著下降,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:电针夹脊穴可以改善CSR大鼠的步态障碍,减轻CSR大鼠的根性疼痛,其机制可能与夹脊电针激活Nrf2/ARE信号通路,上调Nrf2、HO-1的表达和下调Keap1的表达水平有关。

热敏灸治疗中风后气虚型便秘的疗效观察及对血清SP、VIP水平的影响

目的观察热敏灸治疗中风后气虚型便秘的临床疗效以及对血清P物质(substance P,SP)和血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)水平的影响。方法将60例中风后气虚型便秘患者随机分为针刺组和热敏灸组,每组30例。两组均予药物对症治疗,针刺组采用针刺治疗,热敏灸组采用热敏穴悬灸治疗。观察两组治疗前后的症状积分评定表、便秘临床评分(clinic constipation score,CCS)量表、便秘患者生存质量量表(patient assessment of constipation quality of life,PAC-QOL)评分及血清SP和VIP水平变化,并比较两组临床疗效。结果两组治疗后症状积分均低于治疗前,且热敏灸组低于针刺组;两组治疗后CCS均下降,且热敏灸组低于针刺组;两组治疗后PAC-QOL评分均下降,且热敏灸组低于针刺组,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后血清SP水平升高,血清VIP水平下降;且热敏灸组血清SP水平高于针刺组,血清VIP水平低于针刺组,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组临床疗效比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在药物治疗的基础上,热敏灸治疗中风后气虚型便秘疗效优于针刺,可有效改善便秘症状,提高生存质量,机制可能与升高血清SP水平、降低血清VIP水平有关。

谢晶日教授辨治慢性腹泻经验撷菁

慢性腹泻是临床上常见的消化系统疾病,其发病率高,可严重影响患者的日常工作、生活。慢性腹泻属中医学泄泻范畴,谢晶日教授认为,肝脾功能不调是本病的关键病机,湿邪为主要病理因素,并根据多年临证心得将慢性腹泻分为肝郁脾虚证、脾虚湿盛证、脾肾两虚证3个主要证型,治疗上分别以疏肝理脾、健脾化湿、益火补土为基本原则,同时注重通涩相济、养生调摄,临床屡获佳效。

脊痛消胶囊对神经根型颈椎病作用机制的网络药理学研究

利用网络药理学和分子对接技术,研究脊痛消胶囊治疗神经根型颈椎病(Cervical Spondylotic Radiculopathy,CSR)的有效成分和作用机制。从TCMSP、TCM-ID和BATMAN-TCM数据库中检索,并筛选脊痛消胶囊的有效活性成分及其作用靶点,使用GeneCards、OMIM和DisGeNET数据库预测CSR的疾病靶点,将活性成分作用靶点与疾病靶点进行映射,得到脊痛消胶囊治疗CSR潜在靶点,利用STRING数据库进行蛋白互作分析,运用Cytoscape软件绘制蛋白互作网络图和药物-活性成分-潜在靶点网络图。利用ClusterProfiler包对潜在靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析,用Autodock Vina软件对有效活性成分和关键靶点进行分子对接验证。网络药理学预测结果表明,脊痛消胶囊活性成分有133种,共有275个作用靶基因,CSR相关靶点有7111个,映射得到交集靶点245个,通过PPI网络筛选得到脊痛消胶囊治疗CSR的关键治疗靶点10个,分别为蛋白激酶B(AKT1)、细胞性肿瘤抗体P53(P53)、转录因子JUN(JUN)、肿瘤坏死因子(TNF)、热休克蛋白HSP90-α(HSP90AA1)、表皮生长因子受体(EGFR)、白介素6(IL6)、钙黏蛋白相关蛋白(CTNNB1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(CASP3)、核转录因子-κB-p65(RELA/P65)和丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)。GO功能和KEGG通路分析表明,关键靶点涉及肿瘤坏死因子信号通路、丝裂原活化蛋白激酶信号通路、晚期糖基化终末产物(AGE)-AGE受体(RAGE)信号通路、白介素-17信号通路、G蛋白偶联受体和神经递质受体等。分子对接结果表明,关键靶点与重要活性成分结合构象稳定,脊痛消胶囊对治疗神经根型颈椎病的有效活性成分主要是槲皮素、β-谷甾醇、山柰酚、豆甾醇、常春藤皂苷元和刺芒柄花素等。脊痛消胶囊治疗神经根型颈椎病的作用机制可能与炎症反应和氧化应激等生物学过程有关。

脊痛消胶囊对神经根型颈椎病模型大鼠脊髓组织白细胞介素-1β、白细胞介素-6及组胺的影响

目的研究脊痛消胶囊对神经根型颈椎病模型大鼠脊髓组织白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及组胺(HA)的影响。方法通过手术植入异物使神经根受到卡压的方式建立神经根型颈椎病大鼠模型,将大鼠随机分成脊痛消胶囊组(中药组)、布洛芬缓释对照组(西药组)、模型组,空白对照组,为排除手术创伤所致疼痛对实验结果的影响加设假手术组。于造模3 d后中药组和西药组分别给予不同配比的脊痛消胶囊和布洛芬混悬液灌胃;空白组、假手术组及模型对照组每日给予等量0.9%氯化钠注射溶液灌胃。观测给药后第7天和第14天分批处死实验大鼠取C5至T1脊髓组织,采用酶联免疫法检测IL-1β、IL-6、HA表达量。结果给药后第7、14天模型组大鼠脊髓组织IL-1β、IL-6、HA含量明显升高,与空白对照组比较差异有统计学意义,而中药组大鼠上述物质的表达量与模型组比较相对较少,两组比较差异有统计学意义。结论脊痛消胶囊能有效降低神经根型颈椎病模型大鼠脊髓组织中IL-1β、IL-6及HA的含量。

黄连温胆汤对代谢综合征患者凝血功能、β-TG及PAI-1影响

目的:探讨黄连温胆汤对代谢综合征患者凝血功能(PT、APTT、FIB、TT)、β-血小板球蛋白(β-TG)、纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)的影响。方法:遴选2017年9月-2017年12月符合代谢综合征(Metabolic Syndrome,MS)诊断标准的黑龙江中医药大学第一附属医院心血管一科住院患者60例。按患者自愿原则将其均分为对照组和治疗组,对照组采取西医经典降糖、降脂治疗,治疗组在对照组基础上加服黄连温胆汤,用药12周后,检测各项指标并进行对比分析。结果:用药12周后,治疗组FIB、β-TG两项指标明显降低,PAI-1显著上升,和对照组比较差异性显著(均P<0.05)。结论:黄连温胆汤可以改善代谢综合征患者的凝血功能,降低血小板释放活性,减轻患者体内氧化应激反应,一定程度上抑制了血栓的形成。

银杏内酯注射液对高脂血症大鼠红细胞膜生物学特性的影响

目的:从血液流变学和红细胞膜生物学特征变化的角度,探讨银杏内酯注射液改善高脂血症的作用机制。方法:30只SD雄性大鼠进行高脂血症造模,然后随机分为银杏内酯注射液高剂量组、低剂量组和模型组,另取10只大鼠作为正常对照组。腹腔给药2周后,取血测定血脂、血液流变学以及红细胞膜表面生物特征等指标。结果:与正常对照组比较,模型组血脂明显升高(P<0.01);全血黏度显著升高(P<0.05),血浆黏度升高极显著(P<0.01);红细胞变形指数及红细胞电泳时间均显著降低(P<0.05);红细胞膜SOD活性下降,MDA含量升高,疏基及Na+-K+-ATP酶活力明显下降。与模型组比较,银杏内酯注射液组能够显著降低高脂血症模型大鼠的血脂水平、全血黏度(P<0.01)和血浆黏度(P<0.05),明显提高红细胞变形指数(P<0.05);并且能显著增加高脂血症大鼠红细胞膜表面巯基含量(P<0.05),显著提高红细胞膜表面Na+-K+-ATP酶和SOD活性(P<0.01,P<0.05),降低MDA(丙二醛)水平(P<0.05)。结论:银杏内酯注射液通过增加红细胞膜表面疏基含量,影响膜脂质代谢、提高红细胞膜抗氧化能力以及改变膜上电荷数量等方面来改善高脂血症大鼠的血液流变学特性,达到降脂效果。

黄连温胆汤含药血清改善小鼠脂肪细胞胰岛素抵抗的机制探讨

目的探讨黄连温胆汤含药血清对小鼠脂肪细胞胰岛素抵抗(IR)的改善作用及其分子机制。方法取SD大鼠各15只,分别灌服黄连温胆汤、等体积蒸馏水5 d后,腹主动脉采血,制备黄连温胆汤含药血清及空白血清。经典鸡尾酒方法使小鼠胚胎成纤维细胞3T3-L1分化为脂肪细胞,再应用地塞米松刺激使其发生IR制备IR模型,随机分为模型组、黄连温胆汤组和二甲双胍组。另取未进行IR造模的脂肪细胞作为正常组。各组细胞均培养于DMEM高糖+5%FBS培养基,模型组、黄连温胆汤组和二甲双胍组分别加入8%空白血清、4%含药血清+4%空白血清、盐酸二甲双胍溶液1 mmol/L,正常组加入8%空白血清,均培养36 h。采用Real time q PCR法检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)信号通路相关基因胰岛素受体底物1(IRS1)、PI3K-p85α亚基、GLUT4 mRNA表达。采用Western blotting法检测IRS1、p-IRS1(Tyr612)、PI3K-p85α、p-PI3K-p85α(Tyr607)、GLUT4蛋白表达。结果模型组葡萄糖消耗量低于正常组,黄连温胆汤组葡萄糖消耗量高于模型组(P均<0.05)。与正常组比较,模型组GLUT4 mRNA表达下调,黄连温胆汤组和二甲双胍组GLUT4 mRNA表达上调(P均<0.05);与模型组比较,黄连温胆汤组和二甲双胍组GLUT4 mRNA表达上调(P均<0.01)。与正常组比较,模型组p-IRS1(Tyr612)/IRS1、p-PI3K-p85α(Tyr607)/PI3K-p85α、GLUT4蛋白表达下调(P均<0.05),黄连温胆汤组和二甲双胍组蛋白表达均较模型组上调(P均<0.05)。结论黄连温胆汤含药血清可以改善鼠脂肪细胞的IR,其机制为可能通过PI3K-GLUT4信号传导途径发挥作用。

夹脊电针治疗对神经根型颈椎病模型鼠颈神经根组织形态学及脊髓背角环氧化酶-2mRNA含量的影响

目的观察夹脊电针治疗对神经根型颈椎病模鼠颈神经根组织形态学及脊髓背角环氧化酶-2mRNA含量的影响。方法取成年Wistar大鼠40只,随机分为健康对照组、模型对照组、手针对照组和电针治疗组。采用手术方法将浸有甲醛的定量滤纸片放在颈6-7神经根肩上,导致颈神经根的炎症,从而造成大鼠的神经根型颈椎病模型。电针治疗组予以夹脊电针治疗,治疗3周后处死,检测模鼠颈神经根组织形态学的电镜观察及脊髓背角COX-2mRNA含量的表达,观察夹脊电针治疗对模鼠颈神经根组织形态学的电镜下表现及脊髓背角COX-2mRNA表达的影响。结果电针治疗组大鼠颈神经根组织形态学的电镜观察及脊髓背角COX-2mRNA含量表达较模型对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论夹脊电针治疗能降低神经根型颈椎病大鼠脊髓背角COX-2mRNA的表达,对神经根组织具有保护作用。

健康和糖尿病大鼠红细胞荧光光谱非线性程度差异

糖尿病是严重威胁人类健康的慢性疾病之一,对其进行早期诊断尤为重要。由于糖尿病病程的发展会对血液中红细胞的结构和功能产生影响,因此利用红细胞荧光光谱在特征峰位和峰高等方面的差异性,可以对糖尿病状态进行诊断。在选取光谱信号的差异性作为特征向量方面,可以采用荧光光谱信号的非线性程度作为特征向量。为更好地描述荧光光谱信号的非线性,采用延迟向量方差(DVV)法描述信号的非线性程度。采用迭代幅度匹配傅里叶变换(IAAFT)法产生原始数据的替代数据,通过比较原始数据与替代数据的延迟向量方差确定原始数据的非线性特征。以原始数据目标方差为横坐标,以其替代数据目标方差为纵坐标,画出延迟向量方差散布图。健康大鼠红细胞荧光光谱的延迟向量方差散布图与其对角线几乎重合,说明健康大鼠红细胞荧光光谱非线性程度较低;而糖尿病大鼠红细胞荧光光谱的延迟向量方差散布图偏离其对角线,说明糖尿病大鼠红细胞荧光光谱非线性程度较高,并且氨基酸对应的光谱段非线性程度更深。据此,提出健康和糖尿病荧光光谱之间的非线性差异程度可以作为糖尿病早期诊断的特征之一。

骨科洗药配合中频电治疗仪治疗膝关节滑膜炎的疗效观察

目的:探讨骨科洗药配合中频电治疗仪治疗膝关节滑膜炎的临床疗效。方法:将符合纳入标准的240例膝关节滑膜炎患者随机分为对照组与治疗组,各120例。对照组采用骨科洗药熏洗治疗;治疗组采用骨科洗药配合中频治疗。结果:治疗组的有效率为97.5%,明显优于对照组(P<0.05);两组患者治疗前后VAS的评分比较,治疗组优于对照组(P<0.01)。结论:骨科洗药配合中频治疗功能改善程度优于单纯中药熏洗治疗。

骨蚀灵胶囊对糖皮质激素性骨质疏松症Ⅰ型胶原mRNA表达影响的实验研究

目的观察中药骨蚀灵胶囊对糖皮质激素性骨质疏松模型家兔左侧股骨上端Ⅰ型胶原mRNA表达的影响。方法取成年雄性大耳白家兔40只,随机分为空白对照组、激素模型组、肾骨胶囊组和骨蚀灵胶囊组。采用家兔臀肌注射醋酸泼尼松龙造成家兔糖皮质激素性骨质疏松症实验动物模型,骨蚀灵胶囊组予以骨蚀灵胶囊粉末空腹灌胃,治疗8周后处死,通过原位杂交技术检测家兔左侧股骨上端Ⅰ型胶原mRNA的表达,观察骨蚀灵胶囊对Ⅰ型胶原mRNA表达的影响。结果原位杂交结果显示运用中药骨蚀灵胶囊治疗后家兔左侧股骨上端Ⅰ型胶原mRNA表达与激素模型组相比,具有显著差异(P<0.01)。结论中药骨蚀灵胶囊治疗能够提高家兔左侧股骨上端Ⅰ型胶原mRNA的表达水平,具有明显的成骨作用。

中药离子导入联合脊痛消胶囊治疗神经根型颈椎病的临床观察

1临床资料 1.1一般资料 选取2013年1月-2014年9月黑龙江中医药大学附属第一医院骨伤一科门诊神经根型颈椎病患者60例。采用随机分配编码法将60例患者分为两组,对照组30例,其中男15例,女15例;平均年龄（53.23±3.22）岁;病程（2.5±1.2）年。治疗组30例,其中男20例,女10例;平均年龄（50.25±3.19）岁;病程（2.4±1.3）年。两组具有可比性。

大接经法联合头穴丛刺法治疗瘀血阻络型血管性痴呆疗效观察

目的探讨大接经法联合头穴丛刺法治疗瘀血阻络型血管性痴呆的临床疗效。方法将60例瘀血阻络型血管性痴呆(VD)患者随机分为治疗组和对照组,每组30例。治疗组采用大接经法联合头穴丛刺法,对照组采用头穴丛刺法联合常规针刺法,治疗3个疗程后,分别统计治疗前后简易智能精神状态检查量表(MMSE)、日常生活能力评分量表(ADL)评分,比较治疗前后血脂水平变化。结果治疗组总有效率为86.7%,显著高于对照组(70.0%)(P<0.05);治疗组治疗后MMSE评分、ADL评分、血脂水平改善均优于对照组(P<0.05)。结论大接经法联合头穴丛刺法相对于头穴丛刺法联合常规针刺法能更有效改善VD患者的智能水平,提高生活能力,降低血脂水平。

针刺联合颈舒颗粒治疗神经根型颈椎病临床研究

目的观察针刺联合颈舒颗粒治疗神经根型颈椎病的临床疗效。方法神经根型颈椎病患者60例随机分为3组。针刺组仅给予针刺治疗,药物组仅口服颈舒颗粒治疗,治疗组予针刺联合颈舒颗粒治疗,2周后评定各组的治疗效果。结果针刺组的总有效率为80.00%,药物组的总有效率为85.00%,治疗组总有效率为95.00%。各组治疗后NRS疼痛评分及症状体征量化评分比较,治疗组明显优于针灸组与药物组(P<0.05)。结论针刺联合颈舒颗粒治疗神经根型颈椎病效果满意。

电针对抑郁大鼠海马组织炎性细胞因子的影响

目的:观察电针对抑郁大鼠海马组织炎性细胞因子的影响。方法:采用慢性温和性不可预见性应激加孤养的方式建立抑郁大鼠模型,将120只雄性SD大鼠按随机数字表法分为7、14、21 d实验组,每组分为空白、模型、电针、西药(氟西汀)4个亚组,采用免疫组化和HE染色方法检测各组大鼠海马组织中IL-1β、TNF-α、IFN-γ的含量,并观察各组大鼠海马神经细胞形态学变化。结果:与空白组大鼠比较,模型组大鼠IL-1β、TNF-α、IFN-γ的含量均明显上升(P<0.01),形态学表现为神经元溶解,细胞核固缩,细胞质、细胞核界限不清,凋亡小体增多;与模型组大鼠比较,电针组大鼠、西药组大鼠IL-1β、TNF-α、IFN-γ均显著降低(P<0.01),形态学表现为神经元损伤得到修复,结构较完整。结论:电针可抑制组织炎性细胞因子的分泌与释放,对海马神经起到保护作用,可能是电针抗抑郁的作用机制之一。

黄连温胆汤含药血清干预IR-3T3-L1细胞的最佳浓度与时间筛选

目的:通过建立胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞模型,筛选黄连温胆汤含药血清最佳浓度和最佳作用时间。方法:制备黄连温胆汤含药血清及空白血清,诱导分化3T3-L1脂肪细胞,应用地塞米松制备胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞模型,随机分为5组并给予相应处理干预12 h:模型组(8%空白血清)、中药高剂量组(8%含药血清)、中药中剂量组(4%含药血清)、中药低剂量组(2%含药血清)、二甲双胍组(1 mmol/L二甲双胍溶液),另外选用分化成熟的3T3-L1细胞作为正常组(8%空白血清)。CCK-8法测定细胞活力,葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖消耗量,ELISA法检测葡萄糖氧化酶含量;同样方法测定每组干预24 h和36 h各指标。结果:干预12 h、24 h时,中药高、中、低剂量组细胞活力相当,给药干预12 h,模型组葡萄糖消耗量明显低于其余5组(P<0.01),给药干预24 h,各组葡萄糖消耗量较12 h增高,但中药低剂量组与模型组无差异(P>0.05),余各组葡萄糖消耗量仍高于模型组(P<0.05);干预36 h时,中药高、低剂量组细胞活力较中药中剂量组有下降趋势,仅中药中剂量组和二甲双胍组葡萄糖消耗量较模型组升高(P<0.05),模型组培养基中GOD浓度低于中药中剂量组(P<0.05)。结论:黄连温胆汤含药血清无细胞毒性,其调控IR-3T3-L1脂肪细胞的最佳浓度是含药血清占培养体系的4%,最佳作用时间为36 h。

骨科外用膏方配合红光治疗肝肾亏虚型膝痹病临床观察

目的：探讨骨科外用膏方配合红光治疗疗法对于肝肾亏虚型膝痹病的临床疗效。方法：将2016年9月—2017年9月黑龙江中医药大学附属第一医院骨伤四科符合纳入标准的80例肝肾亏虚型膝痹病患者随机分为治疗组和对照组,治疗组42例用骨科外用膏方配合红光治疗疗法,对照组38例用单纯红光治疗疗法,疗程为3周,观察疗效。结果：治疗3周后,每组治疗前后比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,2组间比较时治疗组疗效优于对照组（P〈0.05）。整个治疗过程中无1例出现皮肤过敏、药物不良反应。结论：骨科外用膏方配合红光治疗疗法对于肝肾亏虚型膝痹病疗效显著,安全、便捷,是治疗肝肾亏虚型膝痹病的有效方法,值得临床推广及应用。

骨蚀灵胶囊对激素性股骨头坏死BGP及VEGF表达的影响

目的:探讨中药骨蚀灵胶囊对实验性兔BGP及VEGF的影响。方法:以健康成年日本大耳兔为激素性股骨头坏死的实验模型,通过对照组观察大耳兔BGP及VEGF表达的治疗前后。结果:显示运用中药骨蚀灵胶囊治疗后测定各组BGP及VEGF值有显著性差异。结论:中药骨蚀灵胶囊与盐酸川芎嗪片一样。骨蚀灵胶囊在对家兔激素性股骨头坏死预防、治疗作用方面优于盐酸川芎嗪碱,有显著的防治效果。