纤维素分解菌群的分离和筛选

滤纸平板法结合摇床培养筛选到２个纤维素分解能力较强的混合菌Ｍ１和Ｍ２。在以纤维素为碳源的培养液中，２８℃振荡培养４ｄ，滤纸纤维素失重率分别达５７．５３％和５４．９２％，未经处理的稻草秆纤维素失重率为３８．８２％和３６．２１％。膨化稻草比稻草秆易分解，纤维素降解率可达６８．８３％和６０．０２％。经初步鉴定，Ｍ１由木霉Ｆ１和芽孢杆菌Ｂａ组成，Ｍ２由木霉Ｆ２和芽孢杆菌Ｂａ组成。实验结果表明，由真菌、细菌组成的混合菌分解纤维素的能力明显强于其中任何一个单一菌株。

青霉菌P－93对偶氮染料的降解特性研究

采用富集培养的方法，从土壤中分离得到一株对偶氮染料酸性大红（ＧＲ）和酸性黑（ＡＴＴ）有较强脱色能力的青霉菌Ｐ－９３（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｓｐ．Ｐ－９３）。该菌以ＧＲ和ＡＴＴ作为唯一Ｃ源和唯一Ｎ源均能生长。Ｐ－９３在ｐＨ４．０─８．０的范围内对ＡＴＴ的脱色率都在８０％以上，在２８－３７℃的温度范围内对ＧＲ和ＡＴＴ的脱色率也都超过８０％。对降解产物的紫外─可见光光谱分析表明，对ＧＲ和ＡＴＴ在可见光区的吸收峰（４８７．１ｎｍ，４８６．２ｎｍ和５９６．５ｎｍ）明显消失，而在紫外区的光吸收有所加强。Ｐ－９３中降解ＧＲ和ＡＴＴ的酶主要存在于细胞内，其生物合成不受染料的诱导。

纤维分解菌群对水稻秸秆田间腐熟效果的研究

稻草秸秆接种分解菌群还田，可以加速稻草秸秆在田间的软化和分解。与不接种相比，经３４ｄ ，秸秆分解率提高１３ ．６２ ％ ；经一季小麦生长，当季还田秸秆可完全被腐熟分解，收获后土壤容重下降０ ．０７ｇ／ｃｍ ３ 。小麦生长性状与不接种纤维分解菌群的相比，播种后７５ｄ ，次生根增加１１ ．８７ ％ ，分蘖数增加３７ ．５ ％ ，单株干重增加１９ ．７７ ％ ；营养生长后期，剑叶长增加３ ．４２ ％ ，宽增加７ ．８８ ％ ，株高增加４ ．９５ ％ ，第一、二、三节间长分别下降５０ ．５８ ％ 、１６ ．６ ％ 和８ ．８ ％ ；成熟时，有效穗增加４ ．２２ ％ ，每穗实粒数增加１ ．７２ ％ ，千粒重增加２ ．０８ ％ ，实际产量增加８ ．４２ ％ 。

紫云英根瘤菌结瘤因子的初步研究

最近的研究结果表明,豆科植物与根瘤菌的共生识别是一种双向的信号物质交换过程.首先是豆科植物的根或种子分泌类黄酮物质,诱导根瘤菌的结瘤基因(nod genes)产生结瘤因子(nod factors),分泌到胞外,为植物所接受,从而引发植物某些基因表达,细胞分化,细胞壁形成,最终导致根毛变形等一系列变化.已经测定了几种苜蓿根瘤菌(Rhizobium meliloti)和豌豆根瘤菌(R.leguminosarum bv.viciae)结瘤因子的分子结构式,它们均属于寡糖胺类物质,在没有根瘤菌存在的条件下,结瘤因子能独立地促使根毛发生变形,这是检测结瘤因子是否存在的重要手段,即根毛变形试验(Root hairdeformation assay,简称Had试验).高浓度的结瘤因子甚至能诱导植物产生空瘤,其组织结构与典型的根瘤相同.

根瘤菌结瘤因子的微量生物检测法

在豆科植物根系分泌物诱导下，根瘤菌在自生状态下能产生胞外寡糖胺类物质─—结瘤因子，其生物学功能之一是引起某些豆科植物根毛卷曲。结瘤因子与根毛接触４ｈ后，即使去除结瘤因子，３～６天后根毛即能发生变形。据此设计出一种结瘤因子微量生物检测法。该法操作方便，并且只需耗用微量结瘤因子。

偶氮染料降解菌L-6和L-D的分离及其降解特性的研究

从受染料污染的土壤样品中分离到24株具有染料脱色能力的细菌。从中筛选出对酸性大红(GR)和酸性黑(ATT)染料脱色能力较强的棒杆菌L-6和L-D。它们均能以GR和 ATT作为唯一C源和唯一N源进行生长。在pH6.O～7.5,温度为30～35 C范围内对GR和 ATT的脱色率均在80%以上。染料经降解后,紫外可见光光谱分析表明,可见光区吸收峰明显消失,紫外区的光吸收峰有所增加,染料结构发生了显著变化。

蛹虫草产胞外多糖的液体优化培养条件研究

对蛹虫草进行发酵培养基配方正交设计试验 ,经统计学分析后得出的优化培养基配方如下 :玉米粉4% ,黄豆粉 0 6 % ,酵母汁 0 3% ,K2 HPO4 0 0 5 % ,Mg SO4 0 0 5 % ,接种量 3% ,pH5 5。此培养基组合在 2 5℃培养 1 4 4h的胞外多糖产量可达 1 83g/L。

Tn5-Mob系统诱导耐盐基因转移

利用转座子Tn5-Mob和辅助转移质粒R68.45将放射形土壤杆菌(Agrobacterium radiobacter)生物变型1(biovar 1)菌株PDDCC5785的耐盐基因转移到快生型大豆根瘤菌(Rhizobium fredii)USDA 191中,获得转移接合子,提高了根瘤菌的耐盐能力,随机挑取27个转移接合子进行结瘤试验,其中3株能够结瘤固氮。本研究为根瘤菌的遗传改造提供了一个有用的手段。

用L_(27)(3^(13))正交试验筛选产鸡■菌胞外多糖的液体培养基

从贵州安顺分离筛选到一株鸡菌 (Termitomycesalbuminosus) ,对其产胞外多糖特性进行研究后 ,用正交设计试验方法获得产胞外多糖优化液体培养基配方如下 :玉米淀粉 1.5% ,葡萄糖 1.5% ,酵母粉 0 .4 % ,蛋白胨 0 .2 % ,KH2 PO4 0 .2 % ,MgSO4 0 .0 5% ,pH4 .8,最大胞外多糖产量可达 1.75g/L。

毛萼田菁茎瘤菌共生状态下吸氢与固氮关系的研究

不同瘤龄、不同光照和生长周期的毛萼田菁，其茎瘤的吸氢活性和固氮活性均呈正相关。绿色的茎瘤，无论在数量上还是固氮及吸氢活性上均为最高。Ａ．ｃａｕｌｉｎｏｄａｎｓＯＲＳ５７１菌（Ｈｕｐ＋）、Ｈｕｐ－突变株和含Ｂ．ｊａｐｏｎｉｃｕｍ５．９ｋｂｈｕｐ结构基因质粒的转移接合子回接实验的结果表明，Ａ．ｃａｕｌｉｎｏｄａｎｓ具吸氢活性的菌株对植株生长有益，茎瘤的固氮活性高于根瘤的２倍以上；吸氢活性亦高。转移接合子在无选择压力的条件下连续培养，其带有外源ｈｕｐ基因片段的质粒会缓慢丢失，最终从茎瘤中分离的Ｒ－３０９１１和Ｒ－４９１１已经完全丧失了Ｔｃ抗性。

毛萼田菁和其它茎瘤固氮植物(综述)

近来，豆科植物茎瘤固氮研究取得很大进展，这种双重固氮能力在农业上具有很大应用潜力。茎瘤固氮植物主要有三个属，即田菁属（Ｓｅｓｂａｎｉａ）、合萌属（Ａｅｓｃｈｙｎｏｎｍｅｎｅ）和假含羞草属（Ｎｅｐｔｕｎｉａ）。本文论述它们的生长特性、茎瘤的形成、固氮及在农业上的应用。

硝酸钾对毛萼田菁共生体氮代谢的影响

施 KNO_3能显著增加毛萼田菁植株各部分氮化物的含量,低浓度的 No_3^-主要在根中还原,高浓度的NO_3^-则主要在叶片中还原和同化。毛萼田菁属酰脲型植物,施氮后其伤流液中酰脲氮和氨基氮含量有所增加,但酰脲氮占总氮的比例下降。根瘤和茎瘤输出的氨基酸主要为天冬酰胺(Asn)、苏氨酸(Thr)和丝氨酸(Ser)。施 KNO_3后,根部输出量增加的氨基酸为 Ser 和 Thr,而茎瘤中则为 Asn 和谷胺酰胺(Gln)。毛萼田菁茎瘤和根瘤中氮代谢相关的酶主要分布于瘤的细胞质中。KNO_3处理对茎瘤和根瘤中氨同化的酶活性均无抑制作用。

硝酸盐对毛萼田菁茎瘤固氮的影响

ＫＮＯ３对毛萼田菁（Ｓｅｓｂａｎｉａｒｏｓｔｒａｔａ）茎瘤和根瘤固氮的抑制作用与瘤中积累，碳水化合物减少（特别是蔗糖）以及豆血红蛋白（ｌｇｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ，Ｌｂ）浓度减少和功能受阻相关．经ＫＮＯ３处理的植株的茎瘤类菌体的呼吸作用和固氮活性明显下降．从ＫＮＯ３处理的植株茎瘤中提取的类菌体悬液加上未经ＫＮＯ３处理的正常Ｌｂ可提高固氮活性和耐ｐＯ２；加５ｍｍｏｌ／ＬＫＮＯ２于正常的茎瘤类菌体悬液和Ｌｂ反应体系，引起固氮活性和耐ｐＯ２都降低，证明是Ｌｂ功能受阻的重要因素．施ＫＮＯ３可能还导致茎瘤Ｏ２扩散的阻力增加．

毛萼田菁茎瘤菌吸氢酶基因克隆的研究

采用强迫克隆的方法，构建含Ａ．ｃａｕｌｉｎｏｄａｎｓ５～７ｋｂＥｃｏＲⅠ酶切片段的质粒库，以Ｂ．ｊａｐｏｎｉｃｕｍ的ｈｕｐ结构基因为探针，经原位杂交，筛选到带有Ａ．ｃａｕｌｉｎｏｄａｎｓ６．０ｋｂＥｃｏＲⅠ酶切片段的阳性克隆。经三亲本杂交，将阳性克隆转入Ａ．ｃａｕｌｉｎｏｄａｎｓＨｕｐ－突变株中，所得转移接合子的吸氢酶和固氮酶活性均未恢复，表明所克隆到的基因虽与Ｂ．ｊａｐｏｎｉｃｕｍ的ｈｕｐ结构基因同源，却不是一个能完整表达吸氢酶活性的功能单位。

诱导紫云英根瘤菌nod基因表达的一些植物因子

利用柱层析、薄层层析（TLC）和高压液相色谱（HPLC）从紫云英种子中分离并纯化对紫云英根瘤菌nd基因表达有诱导活性的成分，质谱（MS）鉴定为抽皮素（naringenin）。19种类黄酮或非类黄酮化合物对紫云英根瘤菌结瘤基因表达的诱导活性实验表明，紫云英根瘤菌的结瘤基因可以应答多种诱导咸分，除抽皮素外，还有类黄酮物质毛地黄黄酮（luteolin）、大豆素（daidzein）以及非类黄酮化合物7-羟基香豆素（umbelliferone）和葫芦巴碱（trigonelline）。