微囊化血管内皮细胞生长因子基因修饰NIH3T3细胞的制备及体外培养

目的:制备微囊化血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因修饰NIH3T3细胞,并研究微囊化技术对VEGF基因修饰NIH3T3细胞增殖及其分泌VEGF功能的影响。方法:应用海藻酸钠-氯化钡技术制备微囊化VEGF基因修饰NIH3T3细胞。并与未微囊化VEGF基因修饰NIH3T3细胞对照培养,在倒置相差显微镜下观察微囊及细胞形态,用MTT法和PI染色流式细胞术检测细胞的增殖及活性情况。每48 h收集微囊化及未微囊化基因修饰NIH3T3细胞培养上清,-20℃保存.ELISA法检测培养上清VEGF的含量。结果:微囊形态较圆整,其内细胞生长良好;两组细胞增殖与活性及培养上清中VEGF含量无统计学差异。结论:微囊化并不影响基因修饰细胞的生长代谢功能,与对照组比较.在体外培养时生物学特性无明显差异,为研究微囊化基因修饰细胞体内移植奠定了基础。

三嗪三硅酸氯丙酯阻燃剂的合成研究

以四氯化硅和三环氧丙基异氰尿酸酯(泰必克,TGIC)为起始原料,首先进行环氧乙烷开环反应,再与环氧丙烷反应生成伞状硅、氯、氮三元素协同高效阻燃剂三嗪三硅酸氯丙酯。探讨反应的物质的量比,反应时间及温度等对产品收率的影响。最佳工艺条件:n(泰必克)∶n(四氯化硅)∶n(环氧丙烷)为1∶3∶10;泰必克与四氯化硅在60℃反应5h,再加入环氧丙烷于55℃反应6h,产率为97.5%。采用FT IR、1 H NMR、极限氧指数等技术表征化合物三嗪三硅酸氯丙酯的分子结构及阻燃性能。

透明细胞肾细胞癌中Sema4D的表达及临床意义

目的探讨Semaphorin 4D(Sema4D)在透明细胞肾细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)中的表达及其与ccRCC临床病理特征、预后的相关性。方法收集2009年10月~2019年7月苏州大学附属第二医院存档的ccRCC组织标本285例及癌旁正常肾脏组织标本253例,采用免疫组化EnVision法检测ccRCC及相应癌旁正常组织中Sema4D蛋白的表达,分析Sema4D表达与ccRCC临床病理特征的关系。利用qRT-PCR检测20对新鲜冷冻ccRCC组织和癌旁正常组织中Sema4D mRNA的表达。利用GEPIA在线数据库分析Sema4D mRNA表达与ccRCC患者预后的关联性。结果Sema4D蛋白在ccRCC组织中的阳性率(31.2%)低于癌旁正常组织(86.6%)(χ^(2)=167.664,P<0.001)。Sema4D蛋白表达与ccRCC的ISUP/WHO分级(χ^(2)=7.262,P=0.007)和脉管转移(χ^(2)=4.066,P=0.044)有关联。qRT-PCR检测显示,Sema4D mRNA在ccRCC组织中表达下调(t=3.807,P=0.001)。Kaplan-Meier生存分析显示,ccRCC中Sema4D蛋白高表达组患者的生存时间高于低表达组(χ^(2)=3.868,P=0.049)。GEPIA分析进一步表明:Sema4D高表达ccRCC患者的总生存时间和无瘤生存时间均高于Sema4D低表达者(P=0.0016,P=0.00052)。结论Sema4D蛋白在ccRCC中低表达,其可能成为ccRCC潜在的治疗靶点,并为ccRCC患者的预后评估提供重要的指标。

宫颈腺癌中ProEXC和PRMT5的表达及其临床意义

观察ProEXC蛋白和PRMT5蛋白在宫颈腺癌及癌旁组织中的表达,探讨ProEXC和PRMT5的表达与宫颈腺癌辅助诊断及临床病理参数间的关系。收集苏州大学附属第二医院2015—2020年确诊的宫颈腺癌标本88例,采用免疫组化的方法分别检测宫颈腺癌及癌旁组织中ProEXC和PRMT5的表达并进行分析。利用肿瘤基因组图谱数据库(TCGA)分析ProEXC和PRMT5与宫颈腺癌患者的预后相关性及其相关的基因通路。选取基因表达数据库(GEO)中GSE39293数据集,对宫颈腺癌细胞株(HELA)经抗病毒药物处理前后ProEXC和PRMT5的表达量进行了对比分析。在宫颈腺癌组织中,ProEXC蛋白表达率(95.5%比4.6%,P<0.001)和PRMT5蛋白表达率(81.8%比26.1%,P<0.001)均高于癌旁组织,且其表达均与肿瘤的T分期、有无淋巴结转移及有无人乳头瘤病毒(HPV)感染相关(P<0.05)。TCGA数据库分析显示,PRMT5和ProEXC中MCM2高表达患者的总体生存率较低表达患者低(均P<0.05)。在GSE39293数据集中,经西多福韦处理后细胞中MCM2的表达减少(9.34比9.68,P<0.001),PRMT5表达量下降,但差异无统计学意义(8.16比8.26,P=0.087),TOP2A表达无明显改变(8.54比8.42,P=0.056)。耐药组中PRMT5(8.42比8.16,P=0.002)和MCM2(9.51比9.34,P=0.029)表达增加,而TOP2A表达下降(8.06比8.54,P<0.001)。GSEA分析提示ProEXC高表达主要影响细胞周期通路,而PRMT5高表达主要影响RNA剪接体通路。本研究发现,ProEXC蛋白和PRMT5蛋白在宫颈腺癌组织中呈高表达且高表达组预后更差,与宫颈腺癌临床病理特征有一定相关性,可能与其影响细胞周期和RNA合成通路有关,提示其可能在宫颈腺癌的进展中发挥重要作用。

15例脉络膜黑色素瘤患者临床及病理学特征分析

目的观察脉络膜黑色素瘤(CM)患者的临床及病理学特点。方法回顾性病例研究。2011年至2021年于苏州大学附属第二医院病理科收检并经病理检查确诊的CM患者15例15只眼的石蜡标本纳入研究。通过医院信息系统回顾性收集患者年龄、性别、临床表现、治疗方案、病理检查结果等。分析其临床特点、免疫组织化学(免疫组化)染色、分子病理学特点。结果15例患者中,男性8例,女性7例;平均年龄61岁;均为单眼发病。主述视力下降、视物模糊、眼前黑影遮挡感8例;眼红、流泪、脓性分泌物1例;视力丧失、无光感2例;伴视网膜脱离4例。肿瘤平均直径1.4 cm。肿瘤大体外观呈半球形、“蘑菇形”或扁平弥漫形。肿瘤细胞多呈实性、片状、交叉簇状排列,部分围绕血管呈假“菊形”团样排列伴坏死。15只眼中,梭形细胞型、上皮样型、混合细胞型分别为6、2、7只眼。胞质部分嗜双色或嗜酸性,部分透明,部分富含色素;细胞黏附性差,异形性显著,染色质粗糙,核分裂象多见,核仁明显。免疫组化染色结果显示,所有患眼肿瘤组织中HMB45、SOX10、S100、Melan-A均为阳性;上皮源性标记AE1/3、淋巴源性标记LCA以及神经内分泌标记CgA、Syn均为阴性。基因检测结果显示,所有患者均未发现C-KIT、BRAF、NRAS基因突变。随访时间为8~98个月。15例患者中,生存12例;肿瘤复发和(或)转移死亡3例。结论CM临床无特异性表现,确诊依赖组织学形态及免疫组化染色。

老年患者原发鼻腔或鼻咽黑色素瘤临床病理分析

目的 探讨老年患者鼻腔、鼻咽黑色素瘤(STMMMs)的临床病理特征及分子遗传学特征。方法 回顾性分析10例老年患者STMMM临床病理特征、免疫组化特点及BRAF、C-KIT、NRAS基因突变情况。结果 10例老年患者STMMM中女性5例,男性5例,年龄65~81岁,平均(72.5±8.5)岁;7例发生于鼻腔及鼻窦,3例发生于鼻咽;光镜下瘤细胞形态复杂多样,呈浆细胞样、横纹肌母细胞样、小细胞样、上皮样细胞、梭形细胞样形态。10例免疫组化标记HMB-45、S-100均为阳性,MelanA阳性率70.0%。基因检测结果显示,10例STMMMs中BRAF、NRAS基因均为野生型;有1例发生C-KIT第11号外显子c.1666_1667insA移码突变,余9例为野生型。10例均具有随访资料,随访时间4~50个月,至今3例存活。结论 老年患者STMMM临床罕见,容易漏诊误诊,免疫组化及基因检测可为准确诊断及靶向治疗提供指导作用。

肛管直肠恶性黑色素瘤14例临床病理学分析

目的探讨肛管直肠恶性黑色素瘤的临床及病理学特点。方法对14例肛管直肠恶性黑色素瘤的临床特点、免疫组织化学染色及分子病理学特点进行分析,并复习相关文献。结果14例患者,男女各7例,年龄52~88岁,平均年龄69岁。肿瘤肉眼观呈息肉样或溃疡型改变。镜下肿瘤细胞排列方式多样,大多呈巢状排列,部分围绕血管呈假菊形团样排列,梭形细胞呈条束状及鱼骨状排列;肿瘤细胞形态丰富,细胞呈上皮样、梭形及气球样改变,部分区域失黏附,胞质嗜双染或嗜酸性,核分裂象多见,细胞异型性显著,染色质粗糙,核仁明显,部分肿瘤细胞中可见黑色素沉着。免疫组织化学染色14例HMB45、S-100蛋白、SOX10及Melan A均为阳性。分子检测14例患者中有1例发现C-KIT基因第11号外显子存在c.1659_660insA移码突变,14例患者均未发现BRAF及NRAS突变。14例患者随访时间为20~95个月,10例存活,1例复发及3例发生转移的患者死亡。结论直肠肛管恶性黑色素瘤因缺乏特异的临床表现容易漏诊,确诊依赖HE形态及免疫组织化学染色,本组中1例患者发现C-KIT基因第11号外显子存在c.1659;660insA移码突变,可能会为后期临床治疗提供新的靶点。

我国企业管理会计运用的思考

研究我国管理会计的运用,应立足我国企业实际,不仅要大力宣传管理会计,更主要的是要培植永久性企业文化,以战略管理和市场导向的动态观念丰富管理会计内容,研究、实施战略管理会计,完善责任中心的考核、激励标准与指标体系,切实提高企业管理会计运用的实效.

老年人肺腺鳞癌临床病理特征分析

目的探讨老年肺腺鳞癌(ASC)患者的临床病理学特征、免疫组织化学表型和分子学特征。方法回顾性分析苏州大学附属第二医院病理科2009年1月至2020年12月72例ASC患者的临床资料,筛选出年龄≥60岁的患者48例。收集临床表现、影像学检查、组织病理学及免疫组织化学特征等资料,行扩增阻滞突变系统PCR(ARMS-PCR)法检测基因突变情况。结果48例患者中男32例,女16例,年龄60~84岁(平均70岁)。肿瘤的最大径为0.3~9.0 cm(平均2.8 cm)。镜下见鳞癌以及腺癌两种成分,鳞癌组织显示细胞间桥,腺癌组织则显示乳头状、腺泡或小管结构。免疫组化染色结果显示该组病例不同程度表达角蛋白(CK)7(30/31)、CK5/6(20/28)、甲状腺转录因子1(TTF1,12/31)、P40(15/17)及P63(12/13)。基因检测结果显示老年ASC患者EGFR基因突变率为58.8%(10/17),ALK融合突变频率为5.9%(1/17),ROS1和MET基因未见突变。48例病例均行手术切除。结论ASC的病例相对少见,易造成漏诊,诊断需要结合HE染色、免疫组化学以及影像学检查的结果,手术是ASC患者主要的治疗方式。ASC的EGFR基因突变率较高。