基于网络药理学、分子对接及实验验证探讨刺梨黄酮干预溃疡性结肠炎的作用机制

运用网络药理学方法和分子对接技术探讨刺梨黄酮干预溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的核心成分和作用机制。用乙醇-纤维素酶法提取刺梨黄酮,并采用液相色谱-质谱法鉴定刺梨黄酮提取物主要的化学成分,然后通过分析平台筛选得到刺梨黄酮中34个活性成分和146个干预溃疡性结肠炎作用的靶点,构建“刺梨黄酮-活性成分-交集靶点-溃疡性结肠炎”网络。基因本体通路分析和京都基因与基因组百科全书通路富集分析结果显示,刺梨黄酮干预UC主要涉及花生四烯酸代谢通路、核因子κB信号通路、癌症通路等信号通路;对网络筛选的主要活性成分和关键靶点做分子对接,对接能均小于-6.0kcal/mol,显示刺梨黄酮筛选的核心活性成分和治疗UC的关键靶点有较强的亲和能力,说明网络分析结果可靠。动物实验结果显示刺梨黄酮干预可有效缓解小鼠体质量下降与结肠组织病变,并可显著抑制模型组炎症因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素-1β和白细胞介素-6的表达(P<0.05),且Westernblot结果显示刺梨黄酮可有效地抑制花生四烯酸代谢通路的关键靶点蛋白环氧合酶-2和5-脂氧合酶的表达。综上,刺梨黄酮通过多成分-多靶点-多通路协同作用干预UC,研究结果可为刺梨功能性食品的开发与利用提供理论依据。

刺梨多酚对丙烯酰胺致肝脏氧化损伤的保护作用

目的探究刺梨多酚(Rosa roxburghii Tratt.polyphenols,RRTP)对丙烯酰胺致肝脏氧化损伤的缓解效果及可能影响机制。方法采用丙烯酰胺诱导小鼠肝脏氧化损伤模型,通过苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察肝脏组织病理情况;运用试剂盒测定血清中谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)活性,肝脏中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)活性;蛋白质免疫印迹法检测肝脏组织中核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)和血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,Ho-1)蛋白相对表达量。结果与模型组相比,RRTP能够显著降低血清中ALT、AST活性和肝脏中ROS和MDA含量,提高SOD和GSH活性,并上调Nrf2和Ho-1蛋白表达量,改善肝脏组织病理现象。结论RRTP对丙烯酰胺诱导的肝脏毒性具有较好的改善作用,其作用机制可能与Nrf2/Ho-1信号通路有关。

基于Nrf2/CYP2E1通路探讨刺梨多糖对酒精性肝损伤小鼠的保护机制

目的探讨刺梨多糖(Rosa roxburghii polysaccharide,RP)对食用酒精诱导的酒精中毒小鼠肝脏的影响及保护机制。方法采用热水浸提法制得纯度为64%的RP。将60只健康KM雄性小鼠分为空白组、模型组、阳性组、RP低、中、高剂量组,连续给药15 d,于末次给药4 h后,除空白组外,其余各组一次性灌胃16 mL/kg 50%的食用酒精建立酒精性肝损伤(alcoholic liver injury,ALI)小鼠模型;解剖后记录脏器质量,测定血清中谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)含量,测定肝脏氧化应激指标含量、核因子-红细胞2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)信号通路相关蛋白表达量及细胞色素P4502E1(cytochrome P4502E1,CYP2E1)蛋白表达量,并进行肝脏病理和肝细胞凋亡观察。结果与模型组相比,RP各剂量组均能降低肝脏指数、血清中ALT、AST、血脂指标TC、TG含量、肝脏丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量,提高谷胱甘肽(glutathione,GSH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量,上调Nrf2、血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)、超氧化物歧化酶1(superoxide dismutase-1,SOD-1)蛋白表达量,下调CYP2E1蛋白表达量,并改善肝脏病变和肝细胞凋亡情况。结论RP对ALI小鼠起到良好的护肝效果,这可能与调控Nrf2信号通路起到抗氧化作用及调节脂质代谢有关。