禽巴氏杆菌环丙沙星耐药株转录组测序与分析

为鉴定禽源多杀性巴氏杆菌(Avian Pasteurella multocida,Pm)敏感株与环丙沙星(Cip)耐药株的差异表达基因,本研究采用高通量转录组测序的RNA-seq技术对敏感株与Cip耐药株进行检测,参考Pm70株基因组(NC_002663.1)进行拼接与质量评估,测序数据处理后获得表达差异基因,利用GO和KEGG数据库对表达差异基因进行注释与富集性分析,并利用荧光定量PCR对转录组测序中的差异表达基因进行验证。结果显示,所有样品测序数据参考Pm70全基因组匹配率均达到95.87%以上,对基因差异表达进行分析后鉴定得到19个差异表达基因,其中15个上调,4个下调。通过GO功能富集分析显示差异表达基因主要为转运运输功能,并对差异表达基因进行信号通路富集性分析,结果表明最具代表性的信号通路为"ABC转运蛋白"(ko02010)。推测禽源Pm中的ABC转运蛋白超家族可能在Cip耐药机制中具有重要作用。

禽巴氏杆菌四环素耐药株转录组测序与分析

为鉴定禽源多杀性巴氏杆菌(avian Pasteurella multocida,Pm)四环素(Tetracycline,Tet)敏感株与耐药株(MIC=32μg/mL)在转录组水平上的差异,本研究采用RNA-seq技术对Tet敏感株与耐药株进行双向测序,通过GO、KEGG和ARDB数据库对表达差异基因进行注释和富集性分析。结果显示,共筛选出442个差异表达基因,其中包括103个上调基因和339个下调基因。通过GO功能富集分析显示差异表达基因多数富集于核糖体结构成分、rRNA结合、跨膜运输和离子转运等生物过程;对差异表达基因进行信号通路富集性分析,大多数差异表达基因分布在ABC转运蛋白与核糖体代谢途径中;对差异表达基因进行耐药基因注释(ARDB),发现其中的耐药基因主要为核糖体保护蛋白和外排系统两类。本研究表明禽源Pm对四环素耐药的耐药机制可能与细胞膜上ABC转运蛋白的过量表达以及核糖体保护蛋白有关。

体外诱导禽巴氏杆菌环丙沙星耐药株及耐药机制的初步分析

为了探讨在环丙沙星(ciprofloxacin,CIP)药物培养后,多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)对CIP的药物敏感性变化及其耐药机制,试验采用体外递增药物浓度的方法诱导出禽源Pm标准株C48-1对CIP的耐药菌株,并对CIP耐药菌株的最小抑菌浓度(MIC)值变化及耐药稳定性、生化特性、生长曲线和基因组位点突变进行了研究。结果表明:诱导的CIP耐药菌株的MIC由0.25μg/mL上升至16μg/mL;与亲本株比较,生化特性与生长曲线无显著差异,但诱导株的喹诺酮类耐药决定区(QRDR)gyrA基因编码的氨基酸发生了Thr99→Ala的变化,该位点突变首次发现,gyrB、parC、parE耐药基因均未发生变化。说明逐步递增药物浓度可以诱导禽源Pm对氟喹诺酮类药物的耐药性,并导致靶基因发生突变。

针刺联合手法与理疗治疗神经根型颈椎病的疗效比较

本研究自201 6-05-2017-10收治了156例神经根型颈椎病患者,并进行分组对比研究,其中A组患者采取针刺配合手法治疗,B组患者采取针刺配合理疗,本文探讨两种疗法对神经根型颈椎病的疗效差异。现报告如下:1资料与方法1.1一般资料156例患者采用电脑随机抽选的方法分为A组和B组,平均每组78例。A组(针刺配合手法治疗组)中,41例男性、37例女性;年龄35~69岁,平均(37.6±4.5)岁;病程3~12个月,平均(7.2±1.5)个月;B组(针刺配合理疗组)中,43例男性、34例女性;年龄35~70岁;平均(36.8±4.2)岁;病程3~13个月,平均(7.4±1.2)个月。A、B两组的一般资料对比差异无统计学意义(P>0.05),存在可比性。

克氏原螯虾病原弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及其药敏与黏附特性

为了明确安徽省当涂县淡水养殖克氏原螯虾暴发性疾病的病原,取濒临死亡的病虾分离病原。从肝胰腺中分离到一株优势细菌（命名为XLX1分离株）,人工感染试验证实其具有较强的致病性;采用形态学检查、生理生化特性测定和细菌16S r RNA基因序列分析,确定XLX1分离株为弗氏柠檬酸杆菌。进一步对XLX1分离株进行药物敏感性、携带黏附素基因情况和细胞黏附性进行检测。结果显示：该分离株对头孢噻肟、庆大霉素、阿米卡星、硫酸新霉素、恩诺沙星、诺氟沙星、替考拉宁和米诺环素敏感或中敏,对其他7种测试药物呈现耐药。该分离株携带黏附素基因cfa和ure基因簇;序列分析发现ure ABC结构基因和ure D关键辅助基因高度保守,在虾源分离株与人源参考株间前者的核苷酸和氨基酸序列同源性分别在93.2%～98.3%和91.7%～97.4%,后者的核苷酸和氨基酸序列同源性分别在90.8%～98.3%和94.7%～98.7%;与人源参考株相比,虾源分离株Ure ABC结构蛋白中第294、600和608位氨基酸,以及Ure D蛋白中的第62和122位氨基酸发生了有意突变。XLX1分离株可以聚集方式黏附于EPC细胞周围,平均黏附菌数为29.8±5.3,但随黏附时间延长,EPC细胞出现病变。上述研究结果可为防控弗氏柠檬酸杆菌引起的水产动物疾病提供理论依据。

体外诱导禽巴氏杆菌链霉素耐药株及耐药机制的初步分析

为了研究多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)对链霉素(Streptomycin,Str)药物敏感性变化及其耐药机制,采用体外诱导法对禽源Pm亲本敏感株(C48-1)进行诱导后成功获得Str耐药株,并对Str耐药株的最小抑菌浓度(MIC)、生化特性、生长曲线、耐药稳定性、耐药基因点突变以及耐药逆转性进行了研究。结果表明,与亲本株相比,Str耐药株生化特性与生长曲线无显著差异,MIC值由8μg/m L上升至1 024μg/m L;发现耐药基因Str A、Str B,且核糖体基因rps L编码的氨基酸发生了Lys43→Thr突变;耐药逆转性试验中羰基氰氯苯腙(CCCP)将Str耐药株MIC值降为16μg/m L。逐步递增药物浓度可以诱导禽源Pm对氨基糖苷类药物的耐药性,其耐药机理为磷酸转移酶类对氨基糖苷类抗生素结构的修饰作用,核糖体靶位点突变和外排泵的过量表达。

禽多杀性巴氏杆菌PCR检测方法的初步建立

禽多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,PM)是引起禽霍乱的一种病原菌,能快速引起家禽的败血症等一系列病症,给我国的家禽业造成了巨大的经济损失。试验通过在Gene Bank中查询禽多杀性巴氏杆菌的全基因组序列,从而找到PM的保守序列,运用Primer5设计引物,常规PCR后得到目的核酸扩增产物。经过敏感性、特异性、干扰性等试验确定了该方法的特异性和稳定性。结果证明该方法特异性强,敏感性高,干扰性极低,并且与生化鉴定得出的结果有较高的符合率。该方法简单易操作,适合广泛应用于临床以检测禽多杀性巴氏杆菌病。

七字话东南

作为一个公认的“白面书生”，高一升高二的暑假本应在题海中打拼，夏令营和实践活动似乎注定离这汗水淋漓的假期十分遥远，直到走进驶往六朝古都动车前的那一瞬问，我仍这样想。可一旦踏上了远方的道路，便将眼前俗务归为尘土。路绵延，延全东南，东南西北好朋来，来者不拒尽欢。欢歌笑语写七字，七字话东南。

迪拜城市外交实践的多维度分析

城市外交的历史可追溯至遥远的古希腊时期。二战结束以来,城市外交发展迅速,逐渐受到学界关注。迪拜是中东地区首屈一指的全球都市,发展水平高,是地区城市外交的先行者。本文在回顾城市外交历史发展的基础上,借助荷兰学者罗杰•范•德•普拉伊吉姆和简•梅利森提出的“城市外交六维度”理论,对迪拜的城市外交实践进行考察和分析。并得出结论,在“城市外交六维度”框架下,迪拜的城市外交显得成熟且完善,照应了迪拜国际经济文化之都的城市定位。

《伊玛拉:阿联酋英雄》中的文化身份建构

《伊玛拉:阿联酋英雄》是由食星工作室于2016年制作的动漫作品,作为阿联酋的本土动漫获得了世界各地观众的好评。这部作品本国文化色彩鲜明,剧情设置独到、画风兼具传统和现代元素,将代表阿拉伯伊斯兰和海湾社会的地域文化因子与跌宕起伏的英雄传奇融为一体,向观众展示了阿联酋社会在阿拉伯伊斯兰传统文化和现代文明浸染下表现出的三大特质——多元包容、性别平等、追求进步,由此成功地建构了阿联酋传统与现代有机交互的独特文化身份。

禽巴氏杆菌链霉素耐药株转录组测序与分析

为鉴定禽源多杀性巴氏杆菌(Pm)链霉素(Str)敏感株与耐药株(MIC=1024μg/mL)在转录组水平上的差异,本研究采用RNA-seq技术对Str敏感株与耐药株进行双向测序,筛选得到差异表达基因,通过GO、KEGG和ARDB数据库对差异表达基因进行分组和富集性分析,并利用荧光定量PCR对筛选出的差异表达基因进行验证。结果显示,共筛选获得625个差异表达基因,其中包括581个上调基因和44个下调基因。通过GO功能富集分析显示差异表达基因多数发挥细胞膜转运功能;对差异表达基因进行信号通路富集性分析显示,大多数差异表达基因分布在ABC转运蛋白与双组分系统代谢途径中;采用ARDB对差异表达基因进行耐药基因分析,显示其中的耐药基因主要为氨基糖苷转移酶类和外排系统两类。本研究结果表明,禽源Pm对Str的耐药机制可能与细胞膜上多药外排泵的过量表达和氨基糖苷转移酶类灭活抗菌药物有关。同时,也为进一步研究禽源Pm对Str的耐药机制奠定了基础。

中国影视节目在埃及的传播现状与改进策略

本文通过研究中国影视节目在埃及的传播效果,针对字幕翻译、表演方式、文化风俗、价值观念、历史背景和社会现实六方面问题,提出面对中东受众改进影视传播的三点对策,即:主题选择典型化,译制模式组合化,传播渠道多样化。

拟态弧菌VMH蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备

目的实现拟态弧菌热不稳定性溶血素(VMH)的原核表达,制备兔抗VMH蛋白的多克隆抗体。方法根据GenBank上已有的拟态弧菌vmh基因序列,设计并合成引物,通过PCR方法扩增vmh基因。PCR纯化产物酶切后,定向插入到PET-32a表达载体构建重组表达质粒PET-32a-vmh。重组表达质粒转化至E.coli Rosetta感受态细胞,在IPTG诱导下进行VMH蛋白表达。SDS-PAGE分析重组VMH蛋白(rVMH)的表达形式,并分别采用兔血平板扩散法和Western blot检测其溶血活性和免疫反应性。用纯化的rVMH蛋白免疫新西兰大白兔,3次免疫后采集免疫血清,采用饱和硫酸铵分级沉淀结合亲和层析法纯化多克隆抗体,并检测其纯度与效价。结果重组表达质粒PET-32a-vmh诱导表达后,经SDS-PAGE分析发现分子量约为77.8kDa的rVMH蛋白主要以包涵体形式表达,该蛋白经变性复性后具有溶血活性和免疫反应性。兔抗rVMH蛋白的多克隆抗体经纯化后,其纯度达95%,ELISA效价为1∶26843545600,琼扩效价为1∶32。结论成功制备了rVMH蛋白及其多克隆抗体,为进一步采用噬菌体肽库筛选技术鉴定VMH蛋白表位提供了物质基础。

股骨干骨折合并同侧股骨颈骨折的临床诊治分析

Delaney和Street首次报告了股骨干骨折合并同侧股骨颈骨折病例，文献报道其发生率约占全部股骨干骨折的2％～9％。近年来随着高能量损伤增多，文献报道其发病率逐渐增加。我们总结自2003年5月至2009年5月间收治的16例股骨干骨折伴同侧股骨颈骨折病例，分析如下。

模卡混凝土砌块配筋剪力墙受弯低周反复加载试验的研究

免浆混凝土空心砌块砌体与传统小砌块砌体的最大区别,就在于"砌筑"时不需要砂浆,而是靠公母榫头连接,这将影响砌体的力学行为。本文以新型免浆砌块——模卡混凝土砌块为研究对象,对两片模卡砌块配筋墙片进行伪静力试验,研究试件的破坏模式、变形能力及耗能性能,同时也得到了墙片试件的滞回曲线、承载力、骨架曲线、刚度退化曲线、位移延性系数等。试验结果表明,模卡砌块配筋墙片具有良好的抗弯性能,并且可以用普通混凝土小型空心砌块配筋砌体的相关规范、规程,进行极限承载力验算。

后路小切口微创人工全髋关节置换术的临床应用

近年来,随着骨科微创术概念的兴起,导航系统及骨科器械的不断发展和更新,微创全髋关节置换术（MIS-THA）已成为近年来国际上关节外科发展的新技术,在临床上得到越来越多的认识。我科自2006年5月至2009年3月采用后路小切口微创技术进行人工全髋关节置换术,疗效满意。

BO原则在胫骨粉碎性骨折治疗中的临床应用

临床上胫骨粉碎性骨折的治疗较为困难，治疗方法也多样，其关键的骨愈合问题已受到了广大临床医师的关注；而随着骨折内固定技术的发展和治疗理念的更新，生物学固定（B0）的新理论已逐渐应用于胫骨粉碎性骨折的临床治疗。2005年5月至2009年5月我院应用BO原则治疗胫骨粉碎性骨折50例并取得了满意的疗效，现报告如下。