新乡市某猪场猪瘟病毒的鉴别检测

新乡市某猪场发生疑似猪瘟病例,为了鉴别其为疫苗毒还是野毒,采用细胞免疫化学方法和RT-PCR,并对其NS5B基因进行序列测定,序列比对并构建进化树,结果表明,猪只为猪瘟野毒感染,且分离的猪瘟病毒与石门(Shimen)株在基因序列上未发生大的变异。

鸡传染性支气管炎病毒S1基因抗原区的原核表达及鉴定

本研究以鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)S1基因为研究对象,设计特异性引物扩增S1抗原集中区目的基因,长度为198bp,亚克隆至原核表达载体pGEX-6P-1,构建重组原核表达质粒pGEX-6P-1-S1,转化至宿主菌Rosetta(DE3)后进行诱导表达。SDS-PAGE分析结果显示,表达获得1条特异性蛋白条带,其分子质量大小为33.0ku,与预期蛋白大小一致。可溶性分析结果表明目的蛋白以包涵体形式存在。Western blotting结果显示,重组蛋白能与IBV鸡阳性高免血清反应,被GST标签单抗识别,结果表明该融合蛋白正确表达并具有良好的抗原性。本研究为制备IBV单克隆抗体奠定了抗原基础。

鸡新城疫病毒(NDV-XX08)单克隆抗体的制备与鉴定

本研究采用鸡胚繁殖NDV-XX08,差速离心法纯化NDV,用纯化的病毒免疫BALB/c小鼠。取免疫小鼠的脾细胞与NSO细胞进行融合,用间接ELISA和血凝抑制试验（HJ）进行筛选,挑选效价高的杂交瘤细胞进行克隆和亚克隆,建立阳性杂交瘤细胞株,最终得到一株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞,命名为4F12。采用体外细胞培养和体内诱生腹水的方法制备了其McAb。对获得的单克隆抗体采用ELISA,HI,Western-Blotting方法进行鉴定。杂交瘤细胞培养上清和腹水的ELISA效价分别为1：160和1：3.2×10~4。获得的单克隆抗体与NDV具有良好的特异性反应,与鸡胚阴性尿囊液、鸡正常组织、鸡[gG、鸡传染性囊病病毒、鸡传染性支气管炎病毒、禽流感检测抗原均无交叉反应性。HI试验表明,制备的单抗没有血凝抑制活性。Western-Blotting证明获得的单抗与新城疫病毒蛋白有特异性反应。经连续传代20次,冻存、复苏3次,4F12杂交瘤细胞株仍能稳定分泌抗体。

低碘环境下氟中毒子代大鼠甲状腺的病理学观察

研究高氟与低碘条件下对子代大鼠甲状腺的影响情况。健康Wistar大鼠(雌∶雄=3∶1)32只随机分为4组。对照组饲喂大鼠标准饲料,饮用去离子水;高氟组饲喂大鼠标准饲料,饮100mg/L氟化钠(NaF)去离子水;低碘组饲喂低碘饲料,饮用去离子水;高氟低碘组饲喂低碘饲料,饮100mg/L氟化钠(NaF)去离子水。模型建立后,生产子代,分别取10、20、30日龄子代大鼠甲状腺称重并进行HE染色。结果表明,与对照组相比,3个试验组的甲状腺出现了不同程度的损伤,但试验组间甲状腺重与体重比值差异不显著。高氟组甲状腺滤泡不完整,且含有细胞碎片;低碘组甲状腺滤泡大小不等,上皮细胞有的呈高柱状;而高氟低碘组的甲状腺滤泡除具有低碘组的特点外,还伴有局灶性细胞坏死。表明碘缺乏情况下氟中毒对大鼠甲状腺的损害更大。

醋酸铅对小鼠的急性毒性效应

【目的】研究醋酸铅对小鼠的急性毒性效应,以明确铅的毒性作用机制及其作用的靶器官。【方法】对小鼠经口灌胃不同剂量醋酸铅溶液,利用Bliss法检测醋酸铅的半数致死剂量(LD50)。将小鼠随机分为对照组、低铅组、中铅组和高铅组,分别饮用含醋酸铅0(对照组),2.4(低铅组),4.8(中铅组)和9.6(高铅组)mmol/L的去离子水9d,记录饮毒0和9d时小鼠的体质量,于处理后10d采集小鼠大脑、心脏、肺、肝脏、脾脏和肾脏,称其质量,计算脏器指数并进行病理组织学检查。【结果】醋酸铅对小鼠的LD50为10 562mg/kg。小鼠体质量随醋酸铅剂量的增加变化不明显。与对照组相比,低铅组小鼠肾脏指数显著增加(P<0.05),中铅组和高铅组小鼠肾脏指数极显著增加(P<0.01);醋酸铅处理组与对照组其余脏器指数差异均不显著(P>0.05)。经醋酸铅处理后,小鼠各组织均有病变发生,其中高铅组小鼠各组织病变尤为严重。【结论】醋酸铅属于低毒物质,对小鼠大脑、心脏、肺、肝脏、脾脏、肾脏均具有一定的急性毒性效应,且小鼠病理组织变化明显。

一种新型无钩豆状囊尾蚴的鉴定和18S DNA序列分析

旨在鉴别无钩豆状囊尾蚴与有钩豆状囊尾蚴的区别。用扫描电镜对自然感染的豆状囊尾蚴头节进行超微结构观察,对其18S DNA进行PCR扩增和序列分析,并与其他动物的囊尾蚴作了进化树比较。结果显示:超微结构观察无钩和有钩豆状囊尾蚴的主要区别位于顶突,而吸盘和原始体节的结构是相同的。从囊泡中取出的豆状囊尾蚴多处于相对静止状态。无钩豆状囊尾蚴的顶突如同数层圆饼叠放在一起,表面比较平坦,中央有一个较大的结节,结节的直径约为20μm,周边有数层齿轮状花纹,形成重合式齿轮状构造。有钩豆状囊尾蚴顶突的前端比较钝,通过皮肌柱与形似鸡爪样的小钩相连。小钩表面光滑,富有光泽,具有坚硬的外观,长120~150μm。通过用18S-P1和18S-P2引物对无钩和有钩豆状囊尾蚴的目的基因、感受态细胞的培养液和菌体质粒的PCR检测,均获得相同的目的基因条带。测序结果表明18S-P1引物扩增的无钩豆状囊尾蚴与有钩豆状囊尾蚴750 bp序列的差别比18S-P2引物扩增的666 bp序列的区别明显。与其他动物囊尾蚴相关序列的进化比较显示,无钩豆状囊尾蚴与牛囊尾蚴有亲缘性,而有钩豆状囊尾蚴则与猪囊尾蚴有亲缘关系。总之,无钩和有钩豆状囊尾蚴虽然同属豆状囊尾蚴,但无钩豆状囊尾蚴是一种新发现的豆状囊尾蚴。

急性铅中毒对小鼠睾丸病理损伤研究

为了研究急性铅中毒对小鼠睾丸病理变化的影响,通过对小鼠饲喂含有醋酸铅的去离子水建立铅负荷小鼠模型.处理10 d后取材,分析体质量、睾丸指数和睾丸病理剖检变化.结果显示:与对照组相比,铅中毒组小鼠体质量无明显变化,睾丸指数降低,且差异显著(P<0.05);小鼠睾丸中支持细胞、生精细胞和间质细胞数量减少.铅对小鼠睾丸具有显著损害作用,从而影响小鼠的生殖健康.

血栓弹力图在颅脑损伤后弥散性血管内凝血诊治中的价值

目的探讨血栓弹力图在颅脑损伤后弥散性血管内凝血诊治中的应用价值。方法选取在我院进行治疗的100例颅脑损伤患者作为研究对象,根据是否有弥漫性血管内凝血(DIC)分为两组,观察组DIC患者(60例),对照组非DIC患者(40例),均应用血栓弹力图进行检查,探讨颅脑损伤后弥散性血管内凝血中血栓弹力图特点,并分析其应用效果。结果观察组DIC患者R时间(16.53±1.34)min、K时间(8.34±1.25)min均明显高于对照组非DIC患者R时间(6.66±0.28)min、K时间(2.26±0.28)min,观察组Ma值(47.55±8.76)mm、α角(45.24±3.45)°均低于对照组Ma值(68.59±2.59)mm、α角(57.66±5.28)°,均有统计学意义(P<0.05)。应用单因素Logistic回归分析血栓弹力图指标与DIC的相关性,R时间、T时间、Ma值、α角两行指标的P值分别为0.003、0.002、0.001、0.032,差异均有统计学意义(P<0.05)。经治疗后DIC患者R时间、K时间、Ma值、α角均优于治疗前,具有良好的治疗效果,均有统计学意义(P<0.05)。结论血栓弹力图能够对患者的凝血状态做出迅速判断,进而准确地对颅脑损伤后DIC做出诊断,指导临床抗凝治疗,血栓弹力图在颅脑损伤后DIC诊治中具有重要价值。

牛排白色泡沫样尿疾病的诊治

以排白色泡沫样尿为主的普通病主要有肾病综合征和淀粉样变性病。淀粉样变性病牛可发展成蛋白尿和肾病综合征,多发生于5岁以上的成年牛。该病在临床上分为原发性和继发性两种。

牛口蹄疫疫苗应激反应及预防措施

牛口蹄疫疫苗的注射工作至关重要,由此引发的应激反应的预防同样不可忽视,如若未能及时做好对应激反应的预防,很容易导致牛的死亡。1疫苗应激反应通常在牛注射口蹄疫疫苗后,存在应激反应,如牛的进食量大减,甚至绝食,精神萎靡,四肢乏力,卧倒不动,体温时高时低,肠胃蠕动周期变短。若应激反应严重,还会伴有口流白沫,身体肿胀,瞳孔变大等症状,最终死亡,在牛表现出应激行为后,需马上对症状,采取治疗措施,若治疗及时,则可以确保牛体逐渐恢复到健康状态。

经济内循环下农业人才贫乏对产业振兴影响研究--以凉山州为例

为了实现贫困地区产业振兴,推动经济内循环的发展,以凉山州为例进行研究,分析当地农产品质量、农产品附加值和农产品的销售方式等方面存在的问题。结果表明农业人才贫乏是阻碍凉山州产业振兴的主要原因,应该通过开展当地农业从业者文化技能培训、开展外地人员帮扶项目、送培农业人才和培养区域能人等方式,培养新型农业人才,实现产业振兴,让国内经济更好地循环起来。

猪瘟病毒E2蛋白配体表位的筛选与鉴定

为进一步精确定位猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白配体表位信息,利用DNASIS(Ver.2.5)软件分析设计合成7条多肽,主要覆盖E2蛋白,分别命名为SE21、SE22、SE231、SE232、SE241、SE242、SE03,同时设计合成1条无关多肽CP,均标记FITC。将PK-15细胞作为靶细胞,通过多肽与PK-15细胞结合试验、多肽抑制CSFV感染PK-15细胞试验和CSFV阻断多肽与PK-15细胞结合试验,筛选和鉴定E2蛋白配体表位。结果表明,多肽SE241、SE242与PK-15细胞结合的平均荧光强度分别为74.43±4.59和83.60±3.11,显著高于其他多肽,抑制CSFV感染PK-15细胞的感染抑制率也显著高于其他多肽,同时这2条多肽与PK-15细胞的结合被CSFV有效阻断。证实SE241、SE242多肽为CSFV与靶细胞PK-15细胞结合的配体表位,并能抑制CSFV感染PK-15细胞。本试验为CSFV新型多肽疫苗或免疫佐剂的研制提供依据。

兔脑炎原虫病与其相似病的鉴别及治疗

由兔脑炎原虫引起的歪头、斜颈和平衡障碍等神经症状,在临床上易与兔耳螨病和兔巴氏杆菌性中耳炎相混淆。本文通过对3种疾病的共同症状分析、病原形态学、临床症状和病理解剖学的鉴别建立了正确的诊断,并提供了治疗3种疾病的方法。

NGF mRNA在来航鸡体内主要器官中的表达

为了探讨神经生长因子对鸡的生长发育的影响,试验以2月龄来航鸡为试验对象,经RTPCR方法检测鸡体内主要器官中NGF mRNA的表达情况。结果表明:鸡体内主要器官中均有NGF mRNA的表达,并且在肺脏表达量最高,心脏、胰腺和胸腺次之。说明NGF在鸡体内主要器官的广泛表达预示着NGF参与鸡体各系统的发育过程,但具体作用机制还有待深入研究。