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复方蒙药广枣-肉豆蔻片的制备与质量控制
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作者 孔伟浩 孙帅 +5 位作者 陆禹河 徐达峰 殷佳伟 张锦原 秦昆明 高珣 《科学技术与工程》 北大核心 2024年第9期3632-3637,共6页
研究了广枣-肉豆蔻片的制备过程并对其质量进行控制。基于《中国药典》(2020年版)片剂项要求,考察片剂的外观性状、硬度、崩解时限、重量差异及脆碎度;采用高效液相色谱法测定广枣-肉豆蔻片中4种抗氧化成分的含量。结果表明,片剂外表光... 研究了广枣-肉豆蔻片的制备过程并对其质量进行控制。基于《中国药典》(2020年版)片剂项要求,考察片剂的外观性状、硬度、崩解时限、重量差异及脆碎度;采用高效液相色谱法测定广枣-肉豆蔻片中4种抗氧化成分的含量。结果表明,片剂外表光滑,色泽均匀,硬度值处于30~40 N,崩解时限控制在10 min内,脆碎度小于1%;槲皮素、原儿茶酸、甲基丁香酚、肉豆蔻醚分别在0.16~0.8μg/mL(r=0.999)、4~20μg/mL(r=0.999)、8~40μg/mL(r=0.999)、100~500μg/mL(r=0.999)内呈良好的线性关系,平均回收率分别为99.3%、101.6%、100.3%、99.3%。且方法学验证项下精密度、稳定性和重复性试验的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)数值均未超过2%。该含量测定方法操作简便、专属性强、结果准确可靠,可为复方蒙药广枣-肉豆蔻片的质量标准提供参考。 展开更多
关键词 蒙药 广枣-肉豆蔻片 质量 高效液相色谱
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6种诱芯对天牛科昆虫的诱捕效果 被引量:7
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作者 徐智文 孔伟浩 +1 位作者 周艳涛 严善春 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期94-98,共5页
为了筛选利于天牛科(Cerambycidae)昆虫种群监测及高效诱捕的诱芯,2013年分别在黑龙江省哈尔滨市内、东北林业大学帽儿山实验林场老山观测站、东北林业大学凉水实验林场各设置1个样地,对天牛的6种不同信息素诱芯(混合1、混合2、…、混... 为了筛选利于天牛科(Cerambycidae)昆虫种群监测及高效诱捕的诱芯,2013年分别在黑龙江省哈尔滨市内、东北林业大学帽儿山实验林场老山观测站、东北林业大学凉水实验林场各设置1个样地,对天牛的6种不同信息素诱芯(混合1、混合2、…、混合6)进行了林间诱捕试验。2014年,根据首年试验结果,在帽儿山实验林场老山观测站选择2块云杉(Picea asperata)纯林样地,采用墨天牛属(Monochamus)信息素Monochamol,分别与利它素、植物源挥发物组合成诱芯,每种诱芯设4个重复,空白对照搭载无引诱剂的空白诱芯,对墨天牛属进行诱捕试验。首年试验结果表明,6种诱芯共诱捕到4个属天牛,共93头,包括墨天牛属67头、脊虎天牛属(Xylotrechus)22头、断眼天牛属(Tetropium)3头、花天牛属(Leptrua)1头。只有混合2诱芯具有广谱的诱捕效果,诱捕到了全部4个属天牛,且对各属天牛的诱捕效果无显著差异(P=0.274>0.05)。混合4对墨天牛属具有显著的诱捕效果(P=0<0.05),共诱捕到墨天牛属58头,其中云杉大黑天牛(M.urussori)4头,云杉小黑天牛(M.sutor)12头,云杉花墨天牛(M.saltuarius)42头,且对云杉花墨天牛的诱捕效果显著优于同属其他2种(P=0.019、0.008)。次年试验结果表明,墨天牛属信息素与植物源挥发物组合诱芯,对云杉花墨天牛的诱捕效果均优于这2种独立诱芯,且显著提升了雄性云杉花墨天牛的诱捕效果(P=0.040、0.039)。利它素对墨天牛属信息素诱捕效果未表现出显著影响。由此,在一般性天牛科昆虫调查和种群监测时,推荐使用混合2诱蕊;对于某地区墨天牛属天牛进行调查时,可以使用混合4诱蕊;而对云杉花墨天牛进行监测诱捕时,推荐使用墨天牛属信息素植物源挥发物组合诱芯。 展开更多
关键词 信息素 天牛科昆虫 云杉花墨天牛 利它素 植物源挥发物 诱捕效果
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MiR-155在大鼠肝移植术后排斥反应中作用机制的研究 被引量:3
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作者 李坤 孔伟浩 +5 位作者 张俊斌 陈强星 孙翀 尹东亮 李慧 张剑 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期194-199,共6页
目的探讨微小核糖核酸(miRNA,miR)-155在大鼠肝移植术后排斥反应中的作用机制。方法将大鼠分为异系移植模型组(排斥组,n=10),供体为雄性Lewis大鼠,受体为雄性BN大鼠;同系移植模型组(对照组,n=10),供、受体均为雄性Lewis大鼠;两组均按照&... 目的探讨微小核糖核酸(miRNA,miR)-155在大鼠肝移植术后排斥反应中的作用机制。方法将大鼠分为异系移植模型组(排斥组,n=10),供体为雄性Lewis大鼠,受体为雄性BN大鼠;同系移植模型组(对照组,n=10),供、受体均为雄性Lewis大鼠;两组均按照"二袖套法"建立大鼠原位肝移植模型。术后第7日处死大鼠取血标本和肝组织。检测肝功能指标丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆红素(TB)以及细胞因子白细胞介素(IL)-2、IL-4、干扰素(IFN)-γ的水平;光学显微镜下观察肝组织的病理变化情况。对两组大鼠肝组织样本每组选取3例进行高通量测序,检测排斥反应相关miRNA,进行生物信息学分析,预测并分析其相关的信号通路以及基因。结果肝功能检测显示排斥组大鼠血清中ALT、TB水平均高于对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.01)。外周血细胞因子检测显示,与对照组比较,排斥组的IL-2和IFN-γ水平升高(均为P<0.01),IL-4水平下降(P<0.01)。病理检查结果提示,与对照组比较,排斥组发生了明显的排斥反应。高通量检测结果示排斥组miR-155表达上调明显,为对照组5.89倍。生物信息学分析提示,miR-155的上调表达与哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)及T细胞受体信号通路有关,可能参与调节的基因有酵母自噬基因(ATG1)及其同源基因ULK2、胰岛素样生长因子-1(Igf-1)以及G蛋白偶联受体的调节基因(Arrb1)等。结论 miR-155可能促进了大鼠肝移植术后排斥反应的发生发展,涉及此过程的信号通路可能有m TOR、MAPK信号通路及T细胞受体信号途径,ATG1、ULK2、Igf-1以及Arrb1等基因可能参与了此过程。 展开更多
关键词 肝移植 急性排斥反应 免疫耐受 微小核糖核酸(miRNA) MIR-155 高通量测序 信号通路 生物信息学分析 基因
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PD-1/PD-L1信号通路在不同组织来源间充质干细胞中免疫调节作用的研究进展 被引量:2
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作者 孔伟浩 张剑 《器官移植》 CAS CSCD 2017年第6期483-485,共3页
间充质干细胞(MSCs)是一类具有自我更新、多向分化、免疫调节功能的干细胞,能够从骨髓、脂肪、脐血等组织中分离得到。程序性死亡分子1(PD-1)/程序性死亡分子1配体(PD-L1)信号通路在免疫反应的负性调控和维持外周免疫耐受中发挥着重要... 间充质干细胞(MSCs)是一类具有自我更新、多向分化、免疫调节功能的干细胞,能够从骨髓、脂肪、脐血等组织中分离得到。程序性死亡分子1(PD-1)/程序性死亡分子1配体(PD-L1)信号通路在免疫反应的负性调控和维持外周免疫耐受中发挥着重要作用。近年来,PD-1/PD-L1信号通路在MSCs中的作用逐渐受到重视。本文就PD-1/PD-L1通路在不同组织来源MSCs中免疫调节作用的研究现状进行综述。 展开更多
关键词 程序性死亡分子1(PD-1) 程序性死亡分子1配体(PD-L1) 间充质干细胞 调节性T细胞 免疫调节 小干扰核糖核酸(si RNA) 吲哚胺-2 3双加氧酶(IDO) 白细胞介素
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中性粒细胞与淋巴细胞比值预测急性胰腺炎严重程度的Meta分析 被引量:33
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作者 张文龙 孔伟浩 +2 位作者 张剑林 王兴宇 方茂勇 《肝胆外科杂志》 2020年第2期113-117,共5页
目的中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil to lymphocyte ratio,NLR)是反应系统性炎症反应的定量指标之一,最近已经有一些研究探索了NLR可以作为反应急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)严重程度的重要指标,但是不同研究间存在不一致性... 目的中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil to lymphocyte ratio,NLR)是反应系统性炎症反应的定量指标之一,最近已经有一些研究探索了NLR可以作为反应急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)严重程度的重要指标,但是不同研究间存在不一致性.因此,在这项研究中,我们首次系统性地评估了不同研究中性粒细胞与淋巴细胞比值对急性胰腺炎严重程度的预测价值.方法我们在PubMed,Embase,Web of Science和Cochrane Library数据库中检索2019年4月以前关于中性粒细胞与淋巴细胞比值和胰腺炎的相关文章.三位作者分别独立审查检索到的文章.如果文章是探讨中性粒细胞与淋巴细胞比值预测急性胰腺炎严重程度的文献则纳入研究.如果是个案报道、综述、基础研究、动物实验、会议摘要则被排除.所有纳入文献的质量评分采用诊断准确性研究的质量评估-2指南(Quality Assessment of Diagnostic Accuracy Studies-2 guidelines,QUADAS-2)进行评估.双变量随机效应模型用于中性粒细胞与淋巴细胞比值预测胰腺炎严重程度的效应量的合并.结果:这项研究总共纳入10项研究(1713例患者),合并后的诊断效应量分别如下:敏感度0.76(0.68~0.82)、特异度0.72(0.61~0.81)、阳性似然比2.7(1.8~4.0)、阴性似然比0.34(0.24~0.48)、受试者工作曲线下面积0.79(0.75~0.82)和诊断比值比8(4~16).结论:NLR是一种容易检测且价格低廉的标记物,具有一定的诊断价值,能够预测急性胰腺炎患者的严重程度,从而为临床上急性胰腺炎的治疗提供新的思路. 展开更多
关键词 中性粒细胞与淋巴细胞比值 急性胰腺炎 严重程度 META分析
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多杀菌素和乙基多杀菌素对斑马鱼胚胎发育的影响 被引量:1
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作者 孔伟浩 高薇珊 范咏梅 《热带生物学报》 2018年第3期267-273,338,共8页
本实验以斑马鱼胚胎为模型,测试多杀菌素和乙基多杀菌素对鱼类等水生脊椎动物胚胎发育的影响。经过预实验确定正式试验多杀菌素浓度为120,151,190,240,302,380,480 mg·L^(^(-1));乙基多杀菌素浓度为0.60,1.80,5.45,16.40,49.40 mg&... 本实验以斑马鱼胚胎为模型,测试多杀菌素和乙基多杀菌素对鱼类等水生脊椎动物胚胎发育的影响。经过预实验确定正式试验多杀菌素浓度为120,151,190,240,302,380,480 mg·L^(^(-1));乙基多杀菌素浓度为0.60,1.80,5.45,16.40,49.40 mg·L^(^(-1)),实验按照OECD标准进行。结果表明:在斑马鱼的胚胎受精96 h后,多杀菌素的LC50为242.27 mg·L^(^(-1));乙基多杀菌素的LC50为9.713 mg·L^(^(-1))。2种药剂对胚胎孵化后24 h 1 min内自主运动频率、48 h 20 s内的心跳率、96 h的体长均不存在剂量-效应关系;药剂对胚胎72 h畸形表现为脊椎弯曲,2种药剂畸形率与浓度均存在剂量-效应关系。多杀菌素和乙基多杀菌素均属低毒,但在高浓度条件下,多杀菌素比乙基多杀菌素对鱼类更友好。 展开更多
关键词 多杀菌素 乙基多杀菌素 斑马鱼 胚胎发育 毒性
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基于oncomine数据库分析细胞周期蛋白B2在肝细胞癌中的表达及意义 被引量:1
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作者 朱云峰 孔伟浩 +1 位作者 王恒毅 吴雪生 《肝胆外科杂志》 2019年第6期470-473,共4页
目的探讨细胞周期蛋白B2(CCNB2)在肝细胞癌(肝癌)中的表达及意义。方法通过对Oncomine数据库挖掘肝癌中CCNB2的信息,并对肝癌中有关CCNB2的研究进行meta分析。肝癌组织与癌旁正常组织之间CCNB2的表达差异采用t检验,CCNB2的表达与肝癌预... 目的探讨细胞周期蛋白B2(CCNB2)在肝细胞癌(肝癌)中的表达及意义。方法通过对Oncomine数据库挖掘肝癌中CCNB2的信息,并对肝癌中有关CCNB2的研究进行meta分析。肝癌组织与癌旁正常组织之间CCNB2的表达差异采用t检验,CCNB2的表达与肝癌预后的关系采用Kaplan-Meier法和Log-rank检验。结果Oncomine数据库中共收集了415个不同类型的研究,其中关于CCNB2表达有统计学意义的研究结果有86个.CCNB2表达上调的研究有76个、表达下调的研究有10个。共有7项研究涉及CCNB2在肝癌组织和正常组织中的表达,与正常肝组织相比.CCNB2在肝癌中呈高表达(t=2.789,P=0.004)。oncomine数据库中共提取2项关于CCNB2与肝癌患者预后的相关数据的队列研究,研究显示CCNB2的表达量与预后均无关(X2=0.2737,2.894;P>0.05)。结论CCNB2在肝癌中呈高表达,为临床肝癌发病机制的探索及肝癌靶向药物的开发提供了一个新的思路。 展开更多
关键词 肝细胞 细胞周期蛋白B2 Oncomine meta分析
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棘孢木霉ACCC30536葡聚糖酶Glu41基因克隆及分析
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作者 郭瑞婷 王志英 +4 位作者 于泽洋 孔伟浩 姚翰文 张贺 刘志华 《中国农学通报》 CSCD 2014年第30期56-64,共9页
克隆获得生物防治菌棘孢木霉(T.asperellum)ACCC30536菌株葡聚糖酶基因Glu41的c DNA序列和DNA序列,cDNA和DNA的Gen Bank接受号分别为KJ541741和KJ541742,编码区长度为1134bp,编码378个氨基酸。克隆获得的启动子序列长度1500bp,含有6个... 克隆获得生物防治菌棘孢木霉(T.asperellum)ACCC30536菌株葡聚糖酶基因Glu41的c DNA序列和DNA序列,cDNA和DNA的Gen Bank接受号分别为KJ541741和KJ541742,编码区长度为1134bp,编码378个氨基酸。克隆获得的启动子序列长度1500bp,含有6个逆境响应元件。Blast P相似性分析表明该基因与Glyco-hydrolase-16家族中棘孢木霉CBS433.97基因同源性最高相似度是60%,Signal P信号肽分析显示N端第25个和第26个氨基酸中间存在一个信号肽剪切位点(AFA||AP)。Pfam蛋白家族分析显示它属于Glyco-hydrolase-16家族的葡聚糖酶基因。将棘孢木霉ACCC30536菌株葡聚糖酶基因Glu41基因对Glyco-hydrolase-16家族中木霉属的CBS433.97基因组进行同源性搜索,在基因组上获得4个同源序列。4个同源基因表达中仅有Glu41在杨树根茎叶粉的诱导条件下表达。表明棘孢木霉葡聚糖酶基因Glu41与生物防治相关。 展开更多
关键词 棘孢木霉 葡聚糖酶 基因克隆 生物信息学 序列分析
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“课程思政”融入药物分析课程活动的实践与改革 被引量:13
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作者 高珣 吴文静 +1 位作者 孔伟浩 秦昆明 《广东化工》 CAS 2021年第14期277-278,共2页
“课程思政”既是一种全新的教育理念,也是一种新颖的育人模式,通过分析当前药物分析教学过程中普遍呈现出来的问题,同时紧密结合当下对各大高校思想政治教育的新要求,本文综述了“课程思政”融入药物分析专业课程的必要性及其改革策略... “课程思政”既是一种全新的教育理念,也是一种新颖的育人模式,通过分析当前药物分析教学过程中普遍呈现出来的问题,同时紧密结合当下对各大高校思想政治教育的新要求,本文综述了“课程思政”融入药物分析专业课程的必要性及其改革策略。通过充分挖掘药物分析教学中的课程思政元素,以期实现教书育人相统一的目标。 展开更多
关键词 药物分析 课程思政 课程改革 思政元素 立德树人
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“课程思政”在分析化学教学中的整合与应用 被引量:9
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作者 高珣 孔伟浩 +1 位作者 马卫兴 徐凯 《广东化工》 CAS 2021年第11期200-201,共2页
分析化学作为药学专业的基础核心课程,在培养学生专业知识和技能方面起到承前启后的重要作用。在目前"大思政"的背景下,将思想政治内容融入分析化学课程的教学中,在进行专业课程教学的同时开展思政教育能够起到事半功倍的作... 分析化学作为药学专业的基础核心课程,在培养学生专业知识和技能方面起到承前启后的重要作用。在目前"大思政"的背景下,将思想政治内容融入分析化学课程的教学中,在进行专业课程教学的同时开展思政教育能够起到事半功倍的作用。本文综述了在分析化学教学中开展课程思政的必要性、目标以及实施思路,以期实现专业课程教育和思政教育的结合统一,实现立德树人的追求。 展开更多
关键词 分析化学 课程思政 立德树人
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溴氰虫酰胺对羊角月牙藻的急性毒性效应 被引量:3
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作者 徐成滨 王宇心 +3 位作者 孔伟浩 张晓凯 刘诗颖 范咏梅 《热带生物学报》 2019年第2期135-139,164,共6页
以羊角月牙藻(Selenastrum capricornutum)为生物模型,依据Organisation for Economic Cooperation and Development(OECD)的方法,研究溴氰虫酰胺对羊角月牙藻的急性毒性。通过测定羊角月牙藻生物量、光合色素、丙二醛(MDA)含量以及超... 以羊角月牙藻(Selenastrum capricornutum)为生物模型,依据Organisation for Economic Cooperation and Development(OECD)的方法,研究溴氰虫酰胺对羊角月牙藻的急性毒性。通过测定羊角月牙藻生物量、光合色素、丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力的变化,评价溴氰虫酰胺对羊角月牙藻的毒性效应。结果表明,溴氰虫酰胺对羊角月牙藻的72 h-ErC 50为24.15 mg·L^-1、72 h-EyC 50为20.01 mg·L^-1。随着溴氰虫酰胺浓度的增加,其对羊角月牙藻生长的抑制作用不断增强,同时抑制光合色素(叶绿素a,叶绿素b,类胡萝卜素r)的合成。溴氰虫酰胺诱导羊角月牙藻产生氧化应激反应,其中,SOD活力下降,CAT活力和MDA含量上升。 展开更多
关键词 溴氰虫酰胺 羊角月牙藻 急性毒性 光合色素 抗氧化酶活性
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关于药物液相色谱分析前处理技术的教学研究
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作者 高珣 秦昆明 +1 位作者 孔伟浩 马卫兴 《广东化工》 CAS 2022年第9期194-196,共3页
药物分析样品前处理技术是可以显著减少测定干扰因素并提高测定结果可靠性的有效方法,特别适用于成分复杂的药物样品分析。结合药物分析案例,概括各类前处理技术及其特点,为药物分析学习者和药物分析科技工作者针对成分复杂的药物样品... 药物分析样品前处理技术是可以显著减少测定干扰因素并提高测定结果可靠性的有效方法,特别适用于成分复杂的药物样品分析。结合药物分析案例,概括各类前处理技术及其特点,为药物分析学习者和药物分析科技工作者针对成分复杂的药物样品分析提供药物分析前处理技术创意思路。有力证明了结合样品前处理技术的药物分析实验课程是培育复合型药学人才的重要渠道。 展开更多
关键词 药物分析 液相色谱 前处理技术 教学 研究
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基于关键质量属性与质量源于设计的化学药物质量控制研究进展
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作者 张燕 崔佳琪 +4 位作者 高珣 朱汉帅 闫占宽 孔伟浩 王洪森 《药物评价研究》 CAS 2023年第12期2505-2514,共10页
我国化学创新药物产业正蓬勃发展,药物创新体系不断完善,国产创新药及高端制剂处于快速发展阶段,将为我国新药研发格局带来深刻变革。化学药物质量控制是药物研发的重点,是药品安全有效的前提。围绕化学药物产业发展战略,攻坚关键核心技... 我国化学创新药物产业正蓬勃发展,药物创新体系不断完善,国产创新药及高端制剂处于快速发展阶段,将为我国新药研发格局带来深刻变革。化学药物质量控制是药物研发的重点,是药品安全有效的前提。围绕化学药物产业发展战略,攻坚关键核心技术,要重视科技创新。结合当前国内外前沿理念及技术,未来我国化药制造将持续发展。从化药制造关键质量属性辨识、化药生产质量源于设计和化药质量控制与剂型改良3个角度展开论述,以近10余年国内外相关研究为参考,围绕化药产业发展战略,紧扣关键质量属性与质量源于设计理念对化药质量控制相关内容进行归纳总结,以期为化药质量控制提供方向和参考。 展开更多
关键词 关键质量属性 质量源于设计 剂型改良 质量控制 化药制造
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BDH2基因对肝癌细胞增殖能力的抑制作用及机制 被引量:3
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作者 梁豪 熊志勇 +5 位作者 姚志成 李瑞曦 孔伟浩 徐见亮 曹明波 邓美海 《中华肝脏外科手术学电子杂志》 CAS 2018年第4期327-331,共5页
目的探讨β-羟丁酸脱氢酶2(BDH2)基因对肝癌细胞增殖能力的抑制作用及其机制。方法合成表达BDH2的慢病毒载体,构建稳定表达BDH2的肝癌细胞株HepG2-BDH2(实验组)和对照细胞株HepG2-Vector(对照组)。RT-PCR检测两组细胞中BDH2 m RNA表达... 目的探讨β-羟丁酸脱氢酶2(BDH2)基因对肝癌细胞增殖能力的抑制作用及其机制。方法合成表达BDH2的慢病毒载体,构建稳定表达BDH2的肝癌细胞株HepG2-BDH2(实验组)和对照细胞株HepG2-Vector(对照组)。RT-PCR检测两组细胞中BDH2 m RNA表达水平。采用CCK-8法检测两组肝癌细胞的增殖能力,平板克隆实验观察两组细胞的克隆形成能力。Western blot检测BDH2蛋白和Bcl-2细胞凋亡相关蛋白的表达。实验数据比较采用t检验。结果实验组BDH2 mRNA表达量为(2.20±0.10)×10^(-3),明显高于对照组的(0.20±0.01)×10^(-3)(t=34.95,P<0.05)。实验组细胞培养3、4、5、6、7 d的A_(450)值分别为0.55±0.20、0.73±0.02、1.26±0.12、1.62±0.14、2.19±0.12,明显低于对照组的0.70±0.06、1.13±0.08、1.77±0.15、2.45±0.12、3.02±0.15(t=-5.19,-11.34,-5.96,-10.35,-9.54;P<0.05)。细胞生长曲线显示实验组肝癌细胞的增殖能力明显弱于对照组。平板克隆实验结果显示,实验组细胞克隆形成数目为(184±7)个,明显少于对照组的(429±15)个(t=-25.84,P<0.05)。与对照组相比,实验组的BDH2、cleaved caspase-3蛋白表达明显升高,而Bcl-2蛋白表达明显降低。结论 BDH2基因可抑制肝癌细胞增殖,其机制可能是通过Bcl-2信号通路促进肝癌细胞的凋亡。 展开更多
关键词 肝细胞 细胞增殖 细胞凋亡 BDH2基因 BCL-2
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miR-17-5p通过靶向作用AKT3抑制肝癌侵袭和迁移 被引量:1
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作者 孔伟浩 李坤 +4 位作者 肖翠翠 胡竞雄 黄泽楠 陈强星 张剑 《中华肝脏外科手术学电子杂志》 CAS 2018年第2期152-155,共4页
目的探讨micro RNA(mi R)-17-5p对肝细胞癌(肝癌)细胞侵袭和迁移的影响及机制。方法采用RT-PCR检测L-02人正常肝细胞及QGY-7703肝癌细胞中mi R-17-5p的表达。mi R-17-5p模拟物和模拟物对照分别转染QGY-7703肝癌细胞。Transwell和划痕试... 目的探讨micro RNA(mi R)-17-5p对肝细胞癌(肝癌)细胞侵袭和迁移的影响及机制。方法采用RT-PCR检测L-02人正常肝细胞及QGY-7703肝癌细胞中mi R-17-5p的表达。mi R-17-5p模拟物和模拟物对照分别转染QGY-7703肝癌细胞。Transwell和划痕试验检测mi R-17-5p对肝癌细胞侵袭和迁移能力的影响。生物信息学分析确定mi R-17-5p的靶基因,Western blot检测其在肝癌细胞中表达。对靶基因行si RNA沉默后,观察肝癌细胞的侵袭和迁移能力。两种细胞中micro RNA比较采用t检验。结果 mi R-17-5p在肝癌细胞中表达量为0.16±0.04,较L-02正常肝细胞的1.01±0.19明显下调(t=-9.67,P<0.05)。转染mi R-17-5p模拟物的肝癌细胞穿膜细胞数、迁移速度分别为(36±4)个、(5.37±0.15)mm/d,明显低于对照组的(62±7)个、(7.50±0.01)mm/d(t=-15.40,-32.00;P<0.05)。生物信息学分析显示AKT3是mi R-17-5p的关键靶基因,AKT3在肝癌细胞中表达明显低于正常肝细胞。转染si RNA-AKT3的肝癌细胞穿膜细胞数、迁移速度分别为(13±3)个、(4.13±0.15)mm/d,明显低于对照组的(58±3)个、(7.23±0.25)mm/d(t=-17.88,-53.69;P<0.05)。结论 mi R-17-5p通过靶向作用于AKT3抑制肝癌细胞的侵袭和转移能力。 展开更多
关键词 肝细胞 miR-17-5p AKT3 肿瘤侵润 细胞迁移
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靶向垂钓技术在中药活性成分筛选中的研究进展 被引量:3
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作者 孔伟浩 徐依桐 +3 位作者 徐达峰 刘开科 张锦原 高珣 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第18期2288-2295,共8页
目的研究近年来靶向垂钓技术(主要为配体垂钓和靶标垂钓)在中药活性成分筛选方面的进展,并做相关总结。方法以近年来发表的相关文献为依据,对靶向垂钓-液质联用技术在中药活性成分的筛分与鉴定进行了综述。结果目前常使用靶向垂钓技术... 目的研究近年来靶向垂钓技术(主要为配体垂钓和靶标垂钓)在中药活性成分筛选方面的进展,并做相关总结。方法以近年来发表的相关文献为依据,对靶向垂钓-液质联用技术在中药活性成分的筛分与鉴定进行了综述。结果目前常使用靶向垂钓技术筛分不同种类的中药活性成分,该方法具有筛分速度快、设备简单、操作简单及特异性好等优点。结论对复杂多样的中药混合物进行分析时,利用靶向垂钓-液质联用技术可以较好地筛分目标物并鉴定其结构。 展开更多
关键词 中药 活性成分 靶标垂钓 配体垂钓
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单人直视下改良建立大鼠原位肝移植模型 被引量:5
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作者 陈强星 李坤 +1 位作者 孔伟浩 张剑 《中华肝脏外科手术学电子杂志》 CAS 2017年第2期127-133,共7页
目的探讨简便、有效的大鼠原位肝移植模型建立方法。方法基于"二袖套法",采用单人直视下改良建立大鼠原位肝移植模型的方法对30对SD大鼠行不重建肝动脉的原位肝移植手术。对麻醉、供肝获取、供肝灌注、修肝、受体肝脏切除、... 目的探讨简便、有效的大鼠原位肝移植模型建立方法。方法基于"二袖套法",采用单人直视下改良建立大鼠原位肝移植模型的方法对30对SD大鼠行不重建肝动脉的原位肝移植手术。对麻醉、供肝获取、供肝灌注、修肝、受体肝脏切除、受体胆道重建等重要操作步骤进行改良,无肝期受体采用小剂量肝素化方案。观察并记录肝移植手术过程中供肝灌注前供体手术时间、供肝冷缺血时间、无肝期时间、受体手术时间和肝移植手术总时间。术后对30只受体按随机数字表法随机分为A、B两组,其中A组10只,用于检测肝功能;B组20只,用于观察生存情况。生存分析采用KaplanMeier生存曲线。结果灌注后供肝良好,受体大鼠移植术后一般状况良好,手术过程中供肝灌注前供体手术时间、供肝冷缺血时间、无肝期时间、受体手术时间、肝移植手术总时间分别为(18.5±1.6)、(75.1±3.8)、(20.5±1.8)、(58.3±3.1)、(118.0±4.2)min。A组大鼠肝移植术后2周肝功能逐渐好转,B组大鼠术后1周生存率为100%,2周为90%,1个月为75%。结论单人直视下改良建立大鼠原位肝移植模型是一种简便、有效的方法。 展开更多
关键词 肝移植 大鼠 模型 动物
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microRNA-146在肝移植排斥反应中的调控作用及其机制
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作者 陈强星 张剑 +4 位作者 李坤 朱曙光 肖翠翠 孔伟浩 黄泽楠 《中华肝脏外科手术学电子杂志》 CAS 2018年第4期332-337,共6页
目的探讨microRNA(miR)-146在肝移植排斥反应中的调控作用及其机制。方法采用"二袖套法"建立两组原位肝移植模型,同种异体移植模型组(实验组)以Lewis大鼠为供体,BN大鼠为受体;同系移植模型组(对照组)以Lewis大鼠为供体,Lewis... 目的探讨microRNA(miR)-146在肝移植排斥反应中的调控作用及其机制。方法采用"二袖套法"建立两组原位肝移植模型,同种异体移植模型组(实验组)以Lewis大鼠为供体,BN大鼠为受体;同系移植模型组(对照组)以Lewis大鼠为供体,Lewis大鼠为受体,每组3只大鼠。移植术后7 d取肝脏组织进行病理组织学检测以及microRNA高通量测序;利用生物信息学网站对microRNA靶基因进行GO以及KEGG信号通路分析。结果病理学检测显示实验组肝脏组织排斥活动指数(RAI)为8.4±0.5,诊断为重度急性排斥反应;对照组RAI为1.5±0.5,诊断为无排斥反应。高通量测序显示可能与排斥反应高度相关的22种microRNA,其中21种microRNA在实验组表达均较对照组上调。21种上调的microRNA中有2种microRNA属于miR-146家族的成员,分别是miR-146a-5P和miR-146b-5P,其在实验组的表达量分别是对照组的1.1倍和2.3倍。GO和KEGG信号通路分析显示,miR-146a-5P和miR-146b-5P通过靶基因中白介素-1受体相关激酶1(IRAK1)、活化T细胞核因子5(NFAT5)和肿瘤坏死因子受体相关蛋白6(TRAF6)参与多条和免疫相关的信号通路。结论 miR-146a-5P和miR-146b-5P的上调与同种异体肝移植大鼠排斥反应发生相关,其机制可能是通过调控IRAK1、NFAT5和TRAF6的表达介导多条免疫相关信号通路而发挥作用。 展开更多
关键词 微RNAS 肝移植 移植物排斥 miR-146
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