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稀有密码子影响人RNaseH-Apaf1融合蛋白原核表达
被引量:
2
1
作者
兰泓
孔劭凡
+1 位作者
李慎涛
张玉祥
《氨基酸和生物资源》
CAS
2015年第4期72-78,共7页
通过限制性内切酶克隆法构建两个pET-28a-TAT-RNaseH-Apaf1重组质粒,其中一个质粒经过稀有密码子的优化。将两个重组质粒分别转化原核表达宿主菌BL21(DE3)和Transetta(DE3),通过SDS-PAGE观察相应融合蛋白诱导表达的情况,并用His标签抗体...
通过限制性内切酶克隆法构建两个pET-28a-TAT-RNaseH-Apaf1重组质粒,其中一个质粒经过稀有密码子的优化。将两个重组质粒分别转化原核表达宿主菌BL21(DE3)和Transetta(DE3),通过SDS-PAGE观察相应融合蛋白诱导表达的情况,并用His标签抗体和Apaf1抗体通过Western Blotting鉴定诱导蛋白。菌液PCR和测序证明经稀有密码子优化和未经稀有密码子优化的人源RNaseH-Apaf1序列成功重组到pET-28a-TAT载体中;经稀有密码子优化的重组质粒成功地在大肠杆菌宿主菌中表达RNaseH-Apaf1融合蛋白,并用Western Blotting检测到该融合蛋白。结果表明,稀有密码子可影响人RNaseH-Apaf1融合蛋白的原核表达。
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关键词
稀有密码子
RNaseH-Apaf1融合蛋白
原核表达
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职称材料
补肾单药和复方对急性电离辐射损伤后小鼠外周血作用的研究
被引量:
1
2
作者
孔劭凡
杨福军
+4 位作者
孟媛媛
杨向东
刘姚姚
宋娜玲
徐文清
《中国辐射卫生》
2018年第1期18-20,24,共4页
目的探究补肾单药(CP)和复方(KS)对急性电离辐射损伤后小鼠造血的调控作用。方法 9~10周龄C57BL/6小鼠分成空白对照组、照射组、照射+KS和照射+CP 4组,照射组、照射+KS和照射+CP三组进行5.5 Gy^(137)Cs-γ射线单次全身照射,剂量率1 Gy/...
目的探究补肾单药(CP)和复方(KS)对急性电离辐射损伤后小鼠造血的调控作用。方法 9~10周龄C57BL/6小鼠分成空白对照组、照射组、照射+KS和照射+CP 4组,照射组、照射+KS和照射+CP三组进行5.5 Gy^(137)Cs-γ射线单次全身照射,剂量率1 Gy/min。照射后,照射+KS组按1.5 g/kg体重灌服KS药液,照射+CP组按2.7g/kg体重灌服CP药液,其余两对照组灌服等体积生理盐水。每月取血监测血常规。另取小鼠按同样方式分组,照射后连续给药一个月,检测间充质干细胞集落形成。结果照射+KS组和照射+CP组在前两个月的白细胞和淋巴细胞高于照射组,集落数也多于照射组。结论 KS和CP可以促进电离辐射损伤后小鼠的造血恢复。
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关键词
抗衰片
辐射损伤
造血重建
原文传递
题名
稀有密码子影响人RNaseH-Apaf1融合蛋白原核表达
被引量:
2
1
作者
兰泓
孔劭凡
李慎涛
张玉祥
机构
首都医科大学生物化学与分子生物学系
首都医科大学免疫学系
出处
《氨基酸和生物资源》
CAS
2015年第4期72-78,共7页
文摘
通过限制性内切酶克隆法构建两个pET-28a-TAT-RNaseH-Apaf1重组质粒,其中一个质粒经过稀有密码子的优化。将两个重组质粒分别转化原核表达宿主菌BL21(DE3)和Transetta(DE3),通过SDS-PAGE观察相应融合蛋白诱导表达的情况,并用His标签抗体和Apaf1抗体通过Western Blotting鉴定诱导蛋白。菌液PCR和测序证明经稀有密码子优化和未经稀有密码子优化的人源RNaseH-Apaf1序列成功重组到pET-28a-TAT载体中;经稀有密码子优化的重组质粒成功地在大肠杆菌宿主菌中表达RNaseH-Apaf1融合蛋白,并用Western Blotting检测到该融合蛋白。结果表明,稀有密码子可影响人RNaseH-Apaf1融合蛋白的原核表达。
关键词
稀有密码子
RNaseH-Apaf1融合蛋白
原核表达
Keywords
rare codon
RNaseH-Apaf1infusion protein
prokaryotic expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
补肾单药和复方对急性电离辐射损伤后小鼠外周血作用的研究
被引量:
1
2
作者
孔劭凡
杨福军
孟媛媛
杨向东
刘姚姚
宋娜玲
徐文清
机构
中国医学科学院放射医学研究所
天津中医药大学第一附属医院
出处
《中国辐射卫生》
2018年第1期18-20,24,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(81273005)
国家自然科学基金面上项目资助(81273005
81774048)
文摘
目的探究补肾单药(CP)和复方(KS)对急性电离辐射损伤后小鼠造血的调控作用。方法 9~10周龄C57BL/6小鼠分成空白对照组、照射组、照射+KS和照射+CP 4组,照射组、照射+KS和照射+CP三组进行5.5 Gy^(137)Cs-γ射线单次全身照射,剂量率1 Gy/min。照射后,照射+KS组按1.5 g/kg体重灌服KS药液,照射+CP组按2.7g/kg体重灌服CP药液,其余两对照组灌服等体积生理盐水。每月取血监测血常规。另取小鼠按同样方式分组,照射后连续给药一个月,检测间充质干细胞集落形成。结果照射+KS组和照射+CP组在前两个月的白细胞和淋巴细胞高于照射组,集落数也多于照射组。结论 KS和CP可以促进电离辐射损伤后小鼠的造血恢复。
关键词
抗衰片
辐射损伤
造血重建
Keywords
KS
Radiation Damage
Hematopoietic Reconstitution
分类号
Q691 [生物学—生物物理学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
稀有密码子影响人RNaseH-Apaf1融合蛋白原核表达
兰泓
孔劭凡
李慎涛
张玉祥
《氨基酸和生物资源》
CAS
2015
2
下载PDF
职称材料
2
补肾单药和复方对急性电离辐射损伤后小鼠外周血作用的研究
孔劭凡
杨福军
孟媛媛
杨向东
刘姚姚
宋娜玲
徐文清
《中国辐射卫生》
2018
1
原文传递
已选择
0
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参考文献
引证文献
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