低流量下同轴阵列电容法测量含水率实验研究

针对我国各油田在注水开发后期广泛存在的含水率大于90%、日产量小于10m3的油井含水率测量难的问题,根据同轴电容法测量含水率原理,设计了同轴阵列电容含水率传感器,根据动态实验研究结果建立了含水率测量模型。所研制的同轴阵列电容传感器的含水率特性在0～100%含水率变化范围内为某种对数关系,在含水率大于90%情况具有更高的响应分辨率、良好的重复性,但响应特性受测量流量有规律的影响;所建立的含水率测量模型能够对流量影响进行校正,在含水率大于30%时,由测量模型计算得到的含水率标准误差小于3%,表明所研制的同轴阵列含水率传感器适合于低流量和中、高段含水率测量,特别是适合于含水率大于80%的油井含水率测量。

一种用于低流量测量的浮子流量传感器

针对目前广泛存在的日产量小于10m3的油井及目前所应用的涡轮流量计测量下限较高和易砂卡等问题,根据流体力学相关原理,建立适合低流量测量的理论模型,分析其中的影响因素,采用独特设计技术,研制出外径为28mm的浮子流量传感器。通过实验,确立油井流量在0～20m3/d变化范围内,所研制的浮子流量传感器的测量频率响应与被测液体流量之间为线性关系。在模拟仿真系统所能提供的水流量下限(0.24m3/d)和油流量下限(0.05m3/d)情况下,传感器仍有较高频率输出响应,表明所研制的浮子流量传感器适合低产液油井流量测量。

“双碳”目标下生产测井技术研究进展及展望

全球能源转型不断推进,油服公司投资受国际油价影响明显,生产测井作为油气开发中的重要环节愈加受到重视。近年来大数据、人工智能、物联网、远程作业、云处理、光纤等技术迅猛发展,为生产测井提质增效提供了契机。国内外生产测井技术应用主要经历了探索应用、理论完善、装备发展、新兴技术持续推广应用4个阶段,近年来发展应用主要体现在作业模式创新和测井仪器性能提升。生产测井传统技术最具代表性的进展是仪器性能优化带来了测量精度提高、作业效率提升,光纤传感技术是新技术应用的主要代表。当前生产测井发展面临的挑战主要包括仪器设备性能与工艺的局限性,以及低成本行业发展策略。“双碳”目标下,生产测井将加快传统技术升级迭代,构建新兴技术体系,作业方式由单井监测向地质油藏工程一体化模式转变,数字化智能化将推动全新工作模式变革,新能源发展将开拓绿色低碳应用前景。

低速同轴阵列电容法测量含水率的新理论模型

低速、泡状油水两相介质在流过同轴阵列电容含水率传感器的环形空间时,会增加或减少带绝缘层的内电极上油相滞留层的厚度。根据这一机理和一些假设,建立了一个新的含水率检测理论模型。该模型揭示了同轴阵列电容含水率传感器输出信号频率与含水率间为复杂的对数关系,并与流体的流量、黏度、温度、电容传感器绝缘层材料、传感器结构等有关。同轴阵列电容含水率传感器的特性实验和实验条件下的理论计算表明,在含水率大于50%的情况下,含水率绝对误差很小,标准差为1.4%。这表明在内电极绝缘层上滞留的油层厚度的增减遵从指数变化规律,依此建立的含水率模型具有高含水良好的适用性。

小儿颅内肿瘤的临床与流行病学研究:西北地区单中心数据分析

目的回顾性分析西北地区单中心儿童颅内肿瘤的临床与流行病学特征。方法 2008年1月至2017年12月期间,对明确病理学类型的839例儿童(0~15岁)颅内肿瘤,按照2016版WHO中枢神经系统肿瘤分类新标准,分析肿瘤部位、类别和级别,及其与患儿性别、年龄和来源地区的关系。结果 839例颅内肿瘤患儿来源于西北五省,以幕上肿瘤居多(68.4%),低级别肿瘤占多数(56.4%)。总体男∶女为1.53∶1,7~9岁为发病高峰年龄。位于前五位的肿瘤分别是星形细胞肿瘤(16.4%)、颅咽管瘤(11.6%)、髓母细胞瘤(9.3%)、生殖细胞瘤(7.0%)和室管膜瘤(6.3%),男∶女为1.19∶1。低级别∶高级别为2.61∶1。结论本研究基于单中心近10年的儿童颅内肿瘤资料分析,在一定程度上反映了西北地区儿童颅内肿瘤的临床特征和流行病学特点。

外泌体miR-146a对N9型小胶质细胞介导炎症反应的作用

目的探讨外泌体源性微小RNA-146a(micro RNA-146a,miR-146a)对N9型小胶质细胞介导的炎症反应的作用和机制。方法利用装载有miR-146a的质粒转染人胚肾293 (human embryonic kidney 293,HEK293)细胞。然后应用SBI(system biosciences)试剂盒提取外泌体,通过电镜观察和蛋白印迹法(Western Blot,WB)鉴定外泌体。将外泌体加入N9型小胶质细胞培养皿内,用脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导炎症反应后利用聚合酶链法(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测N9型小胶质细胞内miR-146a的含量,用RT-PCR和WB法检测Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)信号通路上肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)和白细胞介素-1受体相关激酶1 (interleukin-1 receptor-associated kinase 1,IRAK1)的表达水平,用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测与神经炎症相关因子干扰素β(interferon-β,IFN-β)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、白介素6(interleukin-6,IL-6)的表达水平。结果通过质粒转染和SBI试剂盒成功获取了内含有miR-146a的外泌体,应用该外泌体干预N9型小胶质细胞后可以提高miR-146a的含量。与单纯采用LPS刺激相比,用内含miR-146a的外泌体干预后再接受LPS刺激作用可明显降低IFN-β、TNF-α、IL-1β和IL-1的表达水平,同时明显降低细胞内TRAF6分子的mRNA和蛋白表达,而对IRAK1的表达没有影响。结论外泌体源性miR-146a提高了N9型小胶质细胞内MiR-146a的表达量,并通过调控TLR4信号通路中TRAF6分子的表达负反馈抑制N9型小胶质细胞介导的炎性反应。

创伤性脑损伤激活miR-124-3p/Notch通路促进大鼠神经干细胞增殖和分化

目的观察创伤性脑损伤(TBI)大鼠伤侧海马区微小RNA-124-3p(miR-124-3p)的表达变化,探讨miR-124-3p对大鼠TBI后神经再生的影响。方法将健康雄性大鼠按随机数字表法分为假手术组、 TBI组、 miR-124-3p激动剂(miR-124-3p agomir)组与miR-124-3p抑制剂(miR-124-3p antagomir)组,后3组大鼠应用控制性皮层撞击(CCI)法建立TBI模型。创伤后, miR-124-3p agomir组与miR-124-3p antagomir组通过由创伤对侧侧脑室分别注射miR-124-3p agomir或miR-124-3p antagomir各1 nmoL,假手术组和TBI组注入等量溶剂。造模后12 h、 1 d、 3 d、 7 d,实时定量PCR检测大鼠伤侧海马区组织miR-124-3p的表达, Western blot法检测Delta样分子1(DLL1)的表达水平,免疫荧光组织化学染色检测海马组织5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)、神经元核抗原(NeuN)、神经上皮干细胞蛋白(nestin)的表达。生物信息学软件预测并通过荧光素酶报告实验验证miR-124-3p与DLL1之间的靶向结合作用。结果与假手术组相比, TBI组大鼠海马区miR-124-3p和DLL1的表达均显著升高;与TBI组比较, miR-124-3p agomir组miR-124-3p的表达量明显升高、 DLL1表达量明显减少, miR-124-3p antagomir组miR-124-3p表达量明显降低, DLL1表达量则明显升高。创伤后7 d, TBI大鼠海马组织BrdU^+NeuN^+细胞与BrdU^+nestin^+细胞数量明显多于假手术组, miR-124-3p agomir处理增加BrdU^+NeuN^+细胞与BrdU^+nestin^+细胞数量, miR-124-3p antagomir处理则减少BrdU^+NeuN^+细胞与BrdU^+nestin^+细胞数量。生物信息学分析证实DLL1为miR-124-3p的靶基因。结论创伤区miR-124-3p的高表达可靶向抑制DLL1蛋白表达,促进神经干细胞增殖和分化。

儿童神经纤维瘤病的临床特点和手术疗效

目的探讨儿童神经纤维瘤病(NF)的临床特点和手术疗效。方法回顾性分析2007年1月至2019年3月空军军医大学西京医院神经外科行手术治疗并经病理学证实的儿童NF患者,共18例。年龄为3~18岁;NF I型17例,NF Ⅱ型1例;2例有家族史。临床表现为皮肤牛奶咖啡斑15例,皮下结节14例,肢体麻木无力4例,视力减退4例,骨侵袭2例,腰部脊膜膨出伴脊髓拴系1例。颅内肿瘤4例[镰旁1例、颅眶沟通2例、双侧小脑脑桥角(CPA)区1例],椎管内肿瘤4例。对有局部压迫症状、肿瘤进行性增大及行活组织检查者,行姑息性肿瘤切除,观察手术疗效。结果 W例患儿中,4例颅内NF和4例椎管内NF患儿,7例肿瘤为全切除,1例双侧CPA区肿瘤者仅行左侧病变全切除;皮下肿瘤切除10例。术后早期症状消失者10例,缓解3例,4例有视力障碍者术后无改善。双侧CPA区肿瘤患儿左侧肿瘤切除后左耳听力较术前减退。术后随访时间为2?143(74 ±37)个月。原手术区肿瘤复发4例(皮下3例,CPA区1例),颈部和胸部皮下新增包块各1例。4例椎管内肿瘤者术后均未见复发。术后病理学显示Ki-67阳性细胞指数为1%~8%o结论儿童NF I型发病多于NFII型,常合并多系统肿瘤;皮下及CPA区NF手术切除后易复发;为降低手术并发症,提高患儿生命质量,提倡行姑息性手术治疗。

小儿神经外科疾病的单中心研究

目的总结单中心小儿神经外科疾病的流行病学特征。方法回顾性分析2008年1月至2018年6月空军军医大学西京医院神经外科收治的5790例0~15岁神经外科疾病患儿的临床资料,分析不同疾病类型以及患者的年龄、性别、病变部位等临床特征的分布情况。结果5790例患儿中,先天性畸形2259例(39.0%)、肿瘤1561例(27.0%)、外伤性疾病953例(16.5%)、脑血管疾病360例(6.2%)、炎症性疾病159例(2.7%)、功能性疾病91例(1.6%)、其他疾病407例(7.0%)。男女比例为1.76∶1.00。各类疾病中,男性患儿所占比率均高于女性患儿(P<0.001)。总体发病高峰年龄为0~3岁,其中先天性畸形和肿瘤分别好发于0~3岁(42.9%)、13~15岁(26.3%)。最常见的3类先天性畸形分别为蛛网膜囊肿(29.6%)、先天性脑积水(28.2%)、脊髓拴系综合征(20.0%);蛛网膜囊肿患儿中,颞叶为其最常见部位(45.4%)。最常见的3类脑肿瘤分别为胶质瘤(19.7%)、颅咽管瘤(9.0%)、髓母细胞瘤(8.8%);脑肿瘤:脊髓肿瘤比例为5.61∶1.00;小脑幕上肿瘤:小脑幕下肿瘤的比例为1.73∶1.00;低级别肿瘤:高级别肿瘤的比例为1.67∶1.00。外伤中原发性颅脑损伤共365例(58.6%),其中脑挫裂伤占比最高(59.2%)。脑血管疾病中,自发性出血的占比最高(27.2%)。炎症性疾病中,炎性肉芽肿的占比最高(22.6%)。此外,随年龄的增长,先天性畸形的发生率逐渐下降,而脑血管病的发生率逐渐上升(均P<0.001)。结论小儿神经外科疾病具有独特的临床流行特征。先天性畸形和肿瘤较为好发,其中蛛网膜囊肿和胶质瘤的发病率最高。不同的疾病种类中,男性发病率均高于女性,且发病高峰年龄不同。

Ⅱ型神经纤维瘤病合并多类型肿瘤的最新研究进展

Ⅱ型神经纤维瘤病患者常合并多种神经系统肿瘤,包括神经鞘瘤、脑(脊)膜瘤、星形细胞瘤和室管膜瘤等,其中双侧前庭神经鞘瘤是特征性病变。90%以上的Ⅱ型神经纤维瘤病家族性病例和80%~85%散发性病例均被证实肿瘤组织和血液中同时存在Ⅱ型神经纤维瘤病基因突变。本文围绕Ⅱ型神经纤维瘤病与不同类型肿瘤的关系及其发病情况、自然病史和最新治疗策略进行综述,以期为Ⅱ型神经纤维瘤病合并多类型肿瘤患者的诊治提供新线索。

儿童颅咽管瘤术后基于快速康复外科理念的水电解质管理效果分析

目的探讨儿童颅咽管瘤术后基于快速康复外科(ERAS)理念水电解质管理的临床疗效。方法回顾性分析2018年1月至2020年3月空军军医大学西京医院神经外科采用手术治疗的80例颅咽管瘤患儿的临床资料。术后37例参照2017版《颅咽管瘤围手术期管理中国专家共识》进行治疗(A组),43例依据在ERAS理念指导下拟定的水电解质管理方案治疗(B组),比较两组患者的临床资料、血清Na+含量与每24 h波动幅度、尿崩控制情况及其疗效。结果两组患者的年龄、性别、体重指数、肿瘤最大径、肿瘤质地、QST分型、手术入路、肿瘤切除程度及病理学类型间的差异均无统计学意义(均P>0.05)。术后1周,B组血清Na+出现高危(<130 mmol/L和>150 mmol/L)的次数少于A组[中位数(四分位数间距)分别为:53(20.3)对比84(33.5)、67(25.6)对比90(35.8),均P<0.05],而出现低危(130~150 mmol/L)的次数多于A组[141(54.1)对比77(30.7),P<0.05]。术后1~7 d,A组的血清Na+每24 h波动幅度均高于B组(均P<0.05);两组均随术后时间的增加,血清Na+每24 h波动幅度逐渐减小(F1=105.200、F2=87.100 ,均P<0.05)。术后1 d,两组日平均尿量的差异无统计学意义(P>0.05),而术后2~7 d,A组的日平均尿量均高于B组(均P<0.05);两组均随术后时间的增加,日平均尿量逐渐减少(F1=62.600、F2=99.400,均P<0.05)。出院时B组的格拉斯哥昏迷评分高于A组[分别为(14.5±3.6)分、(10.3±4.9)分,P<0.05],且住院时间短于A组[分别为(9.7±2.9)d、(14.9±4.8)d,P<0.05],但是两组Karnofsky功能状态和医院焦虑抑郁量表评分的差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论儿童颅咽管瘤术后基于ERAS理念的水电解质管理具有稳定血清Na+含量、降低Na+波动幅度、控制尿崩及在一定程度上改善临床疗效的作用。

外泌体源性miR-124对创伤性脑损伤急性期小胶质细胞活化状态的作用研究

目的 探讨外泌体源性微小RNA(miR)-124对创伤性脑损伤(TBI)大鼠急性期损伤区脑组织中小胶质细胞活化状态的作用,为TBI后神经炎症的干预提供实验依据.方法 (1)将体外培养的HEK293细胞分为miR-124转染组和对照组,分别转染载有miR-124的质粒和空质粒,2~3周后分离出单克隆细胞系,继续培养2周后应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测2组细胞miR-124的含量;应用美国系统生物科技(SBI)试剂盒从2组细胞上清液中提取外泌体,电镜下观察外泌体的形态,应用Western blotting检测2组外泌体表面标记分子CD63的表达,RT-PCR检测2组外泌体内miR-124的含量.(2)60只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组(n=12)、TBI组(n=24)和外泌体组(n=24),后2组大鼠应用控制性皮层撞击(CCl)法建立TBI模型.造模后24 h,外泌体组大鼠通过尾静脉注入外泌体(3×109个微粒),假手术组和TBI组大鼠注入等量溶剂.造模后3 d,应用RT-PCR检测3组大鼠损伤区脑组织miR-124的表达,流式细胞术(FCM)检测脑组织Iba-1^+/CD32+和Iba-1^+/CD206^+小胶质细胞所占百分比,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测脑组织促炎因子白介素(IL)-1、IL-6和抑炎因子IL-4、IL-10的表达.结果 (1)RT-PCR检测显示miR-124转染组细胞miR-124的表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).电镜下显示有直径约100 nm的球形微小颗粒,并有明显的膜性结构;Western blotting检测显示miR-124转染组外泌体表面标记分子CD63的表达量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);RT-PCR检测显示miR-124转染组外泌体miR-124的含量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).(2)外泌体组大鼠损伤脑组织中miR-124的表达高于TBI组和假手术组,差异有统计学意义(P<0.05).与假手术组比较,TBI组大鼠损伤脑组织Iba-1^+/CD32^+和Iba-1^+/CD206^+小胶质细胞所占百分比增加、IL-1、IL-6和IL-4、IL-10的浓度增加,差异有统计学意义(P<0.05);与TBI组比较,外泌体组大鼠损伤脑组织中Iba-1+/CD32+小胶质细胞所占百分比降低,Iba-1^+/CD206^+小胶质细胞所占百分比增高,IL-1、IL-6的浓度降低,IL-4、IL-10的浓度增加,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 外泌体源性miR-124可以促进TBI急性期损伤脑组织中小胶质细胞由M1型向M2型转化,从而减轻TBI的神经炎症.

创伤性脑损伤大鼠海马区神经干细胞增殖能力及其与PTEN/Akt/mTOR信号通路的关系

目的研究创伤性脑损伤(TBI)后大鼠海马区神经干细胞(NSCs)的增殖能力及其与第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PTEN/Akt/mTOR)信号通路的关系。方法健康成年雄性SD大鼠18只,按随机数字表法随机分为假损伤组(6只)和TBI组(12只)。采用控制性皮质损伤方法构建TBI模型。另取24只大鼠,随机分为TBI+生理盐水组、TBI+双过氧化钒(BPV)组(各12只)。TBI+BPV组和TBI+生理盐水组在建立TBI模型前24h腹腔注射BPV(总量20μg/100g,分4次注射,1次/4h)或等量的生理盐水。于TBI后第7天取脑组织行免疫荧光染色,检测海马区NSCs(BrdU/Sox2双标阳性细胞)的增殖情况;行蛋白印迹实验,检测海马区PTEN的表达量及PTEN/Akt/mTOR信号通路的表达水平。结果与假损伤组比较,TBI组海马区BrdU/Sox2双标阳性NSCs细胞的数量明显增多[(113.4±3.9)个对比(30.3±2.3)个,P<0.01],PTEN蛋白的表达水平明显下调(1.03±0.07对比2.13±0.04,P<0.01);TBI组PTEN蛋白的表达水平与BrdU/Sox2双标阳性NSCs数量呈负相关(r=-0.948,P<0.01)。与TBI+生理盐水组比较,TBI+BPV组大鼠海马区BrdU/Sox2双标阳性NSCs的数量明显增多[(135.8±7.4]个对比(117.5±6.6)个,P<0.01)]、PTEN的表达水平明显下降(0.64±0.03对比1.32±0.08,P<0.01)、mTOR和Akt的磷酸化水平均明显提高(p-mTOR/mTOR的比值为2.15±0.16对比0.93±0.12,P<0.01;p-Akt/Akt的比值为1.95±0.19对比1.08±0.11,P<0.01)。结论TBI后大鼠海马区NSCs的增殖能力增高,抑制PTEN表达可以增强NSCs的增殖能力;其机制可能与PTEN/Akt/mTOR信号通路有关。

外泌体源性miR-124对神经元损伤后轴突再生相关因子表达的影响

目的 探讨以外泌体为载体将miR-124递送给神经元的可能性及其对轴突再生相关因子表达的影响. 方法 将装载miR-124的质粒转染至HEK293细胞,并应用实时定量PCR（qPCR）鉴定转染效果.从转染了miR-124的HEK293细胞培养液上清液提取外泌体,应用电镜观察、Western blotting及qPCR鉴定外泌体及其中是否内含miR-124.将C57BL/6孕鼠胚胎皮层神经元体外培养7d后分为4组：对照组、损伤组、损伤＋不含miR-124外泌体组、损伤＋内含miR-124外泌体组,其中后3组用移液器塑料滴头在培养板内划割造成机械性损伤,后2组分别将不含或内含miR-124的外泌体加入培养板内,继续培养72 h后分别应用qPCR和Western blotting检测各组神经元中miR-124及神经纤毛蛋白-1（NRP-1）、微管相关蛋白Tau、生长相关蛋白43（GAP-43）蛋白的表达. 结果 成功获得了内含miR-124的外泌体.损伤＋内含miR-124外泌体组神经元中miR-124及NRP-1、GAP-43蛋白表达量均明显高于其他3组,损伤组和损伤＋不含miR-124外泌体组神经元中miR-124及NRP-1、GAP-43蛋白表达量均明显高于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）. 结论 外泌体可递送miR-124至机械性损伤后的小鼠皮层神经元并提高神经元中轴突再生相关因子NRP-1、GAP-43的表达.

创伤性脑损伤后大鼠海马区神经干细胞增殖及其与Janus激酶2/信号传导与转录激活因子3信号通路活性的关系

目的探讨创伤性脑损伤(TBI)后大鼠海马区神经干细胞(NSCs)增殖能力及其与Janus激酶2/信号传导与转录激活因子3(JAK2/STAT3)信号通路活性的关系方法108只SD大鼠按随机数字表法分为对照组(36只)和TBI组(72只),利用PinPoint^TM精密皮质撞击器构建TBI模型。伤后1,3,7,14,21和28<1.取大鼠脑组织进行免疫荧光染色以检测海马区NSCs[5-漠脱氧尿曙睫核昔(BrdU)^*/干细胞关键蛋白-2(Sox2)^*]增殖情况;采用Westernblot法检测磷酸化JAK2(p-JAK2)和磷酸化STAT3(p-STAT3)的表达水平,并分析二者的变化趋势〉在初步分析伤后海马区NSCs增殖能力和JAK2/STAT3信号通路活性变化趋势的基础上,另取24只SD大鼠,按随机数字表法分为TB1+生理盐水组和TBI+AG490(JAK2特异性抑制剂)组,每组12只伤后7<1,采用免疫荧光染色检测海马区NSCs增殖能力;采用Westernblot法检测p-JAK2和p-STAT3的表达水平,从而进一步确认TB1后海马区NSCs的增殖能力与JAK2/STA13信号通路的相关性。结果与对照组比较,TBI组海马区NSCs细胞数量和p-JAK2,p-STAT3的表达量增多,且在伤后7<1最显著(NSCs数量:对照组为31.2±4.7,TBI组为111.4±8.l;p-JAK2:对照组为1.11±0.09,TBI组为2.16±1.01:p-STAT3:对照组为1.05±0.06,TBI组为2.06±0.09)(P均<0.01),TBI组海马区NSCs增殖能力与p-JAK2、p-STAT3表达量的变化趋势一致"伤后7<1,TBI+AG490组p-JAK2和p-STAT3的表达量及NSCs的增殖能力明显下降(p-JAK2:TBI+生理盐水组为2.18±0.15,TB1+AG490组为1.24±0.10;p-STAT3:TBI+生理盐水组为2.21±0.12.TB1+AG490组为1.25±0.11;NSCs:TBI+生理盐水组为112.8±&6,TBI+AG490组为75.5±6.4)(P均<0.01),结论TB1后大鼠海马区NSCs的增殖能力提高.JAK2/STA13信号通路活性也增强,且两者有相同的变化趋势JAK2抑制剂AG490可以降低JAK2/STA13倍号通路活性和NSCs的增殖能力.该结果可为促进TBI后神经再生与功能修复的相关研究提供参考.

间充质干细胞来源的外泌体与创伤性脑损伤的研究进展

外泌体是细胞分泌的、直径为30~100 nm的囊性小泡,其内含有蛋白质、脂类、mRNAs和miRNAs等多种分子。其中,来源于间充质细胞(MSCs)的外泌体以其对某些神经系统疾病具有干预和治疗潜能而备受关注。近期研究表明,将MSCs来源的外泌体注入创伤性脑损伤(TBI)动物体内具有减轻神经炎性反应、促进神经再生及恢复神经功能的作用。鉴于MSCs来源的外泌体具有体积微小、不能增殖、易保存及免疫原性低等诸多优点,可能成为一种治疗TBI的新策略。本文将对MSCs来源外泌体的生物学特性与功能进行阐述,并对其与TBI后神经炎性反应、神经再生及治疗前景的关系进行探讨。

MiR-9a-5p靶向SPTLC2抑制神经元创伤后凋亡的作用及其机制研究

目的初步探讨微小RNA-9a-5p(miR-9a-5p)靶向丝氨酸棕榈酰转移酶长链碱性亚基2(SPTLC2)抑制大鼠原代神经元创伤后凋亡的作用及其机制。方法体外培养大鼠原代神经元,将其分为对照组(n=9)、无意义序列转染组(n=9)和miR-9a-5p模拟物转染组(n=9),并分别建立机械划伤模型。通过转染、实时荧光定量PCR、Western blot和TUNEL荧光染色等方法观察miR-9a-5p对大鼠原代神经元凋亡的影响。利用生物信息学预测、荧光素酶基因报告实验和挽救实验验证SPTLC2与miR-9a-5p的关系。利用蛋白质相互作用数据库预测、免疫共沉淀实验验证SPTLC2相互作用的蛋白。结果实时荧光定量PCR结果显示,miR-9a-5p模拟物转染组miR-9a-5p的相对表达量(6.162±0.184)较对照组(0.938±0.058)和无意义序列转染组(1.010±0.095)明显增高(均P<0.05)。Western blot实验结果显示,miR-9a-5p模拟物转染组SPTLC2的相对表达量(0.272±0.034)较对照组(0.855±0.037)和无意义序列转染组(0.880±0.040)明显降低(均P<0.05);凋亡相关蛋白检测结果表明,miR-9a-5p模拟物转染组神经元的凋亡程度较对照组和无意义序列转染组显著降低(均P<0.05)。TUNEL染色结果显示,高表达miR-9a-5p可抑制神经元凋亡,miR-9a-5p模拟物转染组的凋亡细胞比例(0.165±0.004)较对照组(0.239±0.008)和无意义序列转染组(0.229±0.010)显著降低(均P<0.05)。荧光素酶基因报告实验和挽救实验证实,SPTLC2是miR-9a-5p的直接靶点。免疫共沉淀实验和Western blot结果表明,SPTLC2可与Toll样受体4(TLR4)、核因子NF-κB p105亚基(NF-κB1)分别相互作用,但不影响二者的表达水平(均P>0.05)。miR-9a-5p可影响TLR4的表达水平(P<0.05),但不影响NF-κB1的表达水平(P>0.05)。结论SPTLC2是miR-9a-5p抑制神经元凋亡的一个新靶基因。MiR-9a-5p可降低细胞损伤后SPTLC2的表达水平,并通过TLR4/NF-κB信号通路抑制神经元凋亡。