棉花保卫细胞原生质体的有效分离与活性鉴定

模式植物拟南芥保卫细胞原生质体的分离技术已得到应用,然而如何有效分离和纯化棉花保卫细胞原生质体,已成为棉花气孔运动调控机理研究的限制因素。本文探索了一种棉花保卫细胞原生质体分离和活性鉴定的方法。我们选取生长2~3周的棉花幼叶下表皮,利用1.3%纤维素酶和0.03%果胶酶进行一步酶解约1.5 h,先低速15×g离心5 min,再高速105×g离心10 min分离,所获得保卫细胞原生质体的数量和纯度较好。利用膜片钳技术检测所分离得保卫细胞原生质体活性,发现记录的全细胞K+电流稳定性好,光处理明显增加K+的内流,说明所检测原生质体的细胞质膜及其生理活性保持较好。该棉花保卫细胞原生质体分离和鉴定方法的建立,可为研究棉花保卫细胞膜通透性、离子转运以及气孔运动机理提供基础。