miR-492对非小细胞肺癌细胞迁移及侵袭能力的影响

目的:探讨miR-492对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞迁移和侵袭能力的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:RT-qPCR检测NSCLC组织及细胞株(Calu-1、A549、H1650和H1299)中miR-492的表达。A549细胞瞬时转染miR-492 mimics或miR-492 inhibitors,并通过划痕实验及Transwell实验检测细胞的迁移及侵袭能力。双荧光素酶实验证实miR-492调控的靶基因。结果:NSCLC组织及细胞株中miR-492表达明显升高。将miR-492 mimics转染A549细胞后,细胞的迁移和侵袭能力明显增强。将miR-492 inhibitors转染A549细胞后,细胞的迁移和侵袭能力明显减弱。PTPN9是miR-492的直接靶基因。结论:miR-492可能通过调节靶基因PTPN9,从而促进NSCLC细胞的迁移和侵袭。

miR-206通过靶定Arpc3抑制食管癌细胞的迁移和侵袭

目的探讨miR-206在食管癌组织和细胞中的表达,及其对食管癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法 qRT-PCR检测miR-206在食管癌组织和细胞系中的表达水平;慢病毒感染获得稳定过表达miR-206的TE-1细胞,划痕实验和Transwell实验检测细胞的迁移及侵袭能力;生物信息学预测miR-206与Arpc3可能的结合位点,并通过双荧光素酶报告实验验证其靶向调控关系;通过siRNA技术降低TE-1细胞中Arpc3的表达,并检测其对细胞迁移和侵袭能力的影响。结果与癌旁组织比较,食管癌组织中miR-206表达水平明显下调(P<0.01);与正常人食管上皮细胞系比较,食管癌细胞系(TE-1、KYSE-30、KYSE-70和Eca-109)miR-206表达水平明显下调(均P<0.01);过表达miR-206能显著抑制TE-1细胞的迁移和侵袭(均P<0.01);Arpc3是miR-206的直接靶基因,过表达miR-206后TE-1细胞中Arpc3表达降低(P<0.01);抑制Arpc3表达能抑制TE-1细胞的迁移和侵袭(均P<0.05)。结论 miR-206通过靶向调控Arpc3而抑制食管癌细胞的迁移和侵袭,在食管癌中发挥抑癌基因的作用。

miR-98-3p对食管癌KYSE-30细胞增殖和凋亡的影响及机制

目的探讨miR-98-3p在食管癌组织和细胞中的表达,并研究其对食管癌细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法qRT-PCR法检测miR-98-3p在食管癌组织及细胞系中的表达水平;miR-98-3p模拟物(miR-98-3p mimics)和miR-98-3p抑制物(miR-98-3p inhibitors)瞬时转染食管癌KYSE-30细胞,CCK-8法和流式细胞术分别检测miR-98-3p对细胞增殖和凋亡能力的影响;生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-98-3p与β-catenin的靶向结合关系;Western blot实验检测miR-98-3p对KYSE-30细胞中β-catenin、Cyclin D1及Bax蛋白表达的影响。结果食管癌组织中miR-98-3p的表达显著低于癌旁组织(P<0.01),且食管癌细胞TE-1、Eca-109及KYSE-30中miR-98-3p的表达也均显著低于人食管上皮细胞HEEC(均P<0.01);转染miR-98-3p mimics能抑制KYSE-30细胞增殖并促进细胞凋亡,而转染miR-98-3p inhibitors则起到相反的作用;双荧光素酶报告基因实验证实β-catenin是miR-98-3p的靶基因;转染miR-98-3p mimics能导致KYSE-30细胞中β-catenin、Cyclin D1表达降低,而Bax表达升高。结论miR-98-3p可抑制KYSE-30细胞增殖并诱导凋亡,其机制可能与靶向调控β-catenin蛋白表达有关。