根际细菌诱导的系统抗性

在植物根际附近 (包括根围和根内 )存在大量的细菌 ,其中非致病性根际细菌能诱导植物产生系统抗性 ,称之为 ISR,其表型与病菌诱导的系统获得性抗性 (SAR)相似。根际细菌调控诱导的系统抗性对许多植物如拟南芥、豆类、黄瓜等上的真菌、细菌、病毒有抑制作用。诱导细菌和挑战病菌在空间上是相对隔离的 ,ISR的信号途径需要茉莉酸 (JA)和乙烯的作用 ,ISR不产生 PRs。在大田条件下 ISR也是有效的 ,这就提供了一个植物病害生物防治的自然机制。

茄子感染黄萎病菌前后酶活性的动态反应和同工酶变化

研究了不同茄子品种接种黄萎病菌前后过氧化物酶 (POD)、多酚氧化酶 (PPO)、超氧化物歧化酶 (SOD)、苯丙氨酸解氨酶 (PAL)酶活性的动态反应及同工酶变化 ,结果表明在测定的大多数时间内 ,POD、PPO、PAL酶活性越大 ,抗性越强 ,供试的 3个茄子品种酶都出现一个高峰 ,而且抗病品种酶活性上升的较快。无论感病植株还是抗病植株 ,接种黄萎病菌后POD、PPO同工酶都出现新带 ,SOD同工酶没有出现新带 ,但酶量有所增加。这可为抗病育种提供理论依据。

内生细菌作为生防因子的研究进展

详细综述了内生细菌作为生防因子的四大优点即占据有利的生态位 ,能经受住植物的作用与病菌直接作用及作为外源基因的载体等。阐明了其生防机制 ,包括产生抗生素、某些酶类等次生物质 ,诱导植物产生ISR ,促进植物生长 ,与病菌竞争生态位等。另外对内生细菌在植物体内的转运情况 ,及对未来内生菌大田应用需要解决的问题也进行了讨论。

大肠杆菌O141 O-抗原基因簇的破译及进化分析

对大肠杆菌O14 1O 抗原基因簇进行测序 ,序列全长 15 6 0 1bp ,用生物信息学的方法进行序列分析 ,共发现 12个基因 :鼠李糖合成酶基因 (rmlB ,rmlD ,rmlA ,rmlC)、甘露糖合成酶基因 (manB ,manC) ,糖基转移酶基因(orf 6 ,orf 7,orf 9,orf 10 )、O 抗原转运酶基因 (wzx)和O 抗原聚合酶基因 (wzy)。用PCR的方法筛选出了针对大肠杆菌O14 1的特异基因 ,可以用于基因芯片或PCR方法对大肠杆菌O14 1的快速检测。通过对大肠杆菌O14 1的O 抗原基因簇及甘露糖和鼠李糖合成酶基因的进化分析发现 :大肠杆菌O14 1O 抗原基因簇是低GC含量的片段 ,仅O 抗原特异的基因才出现在O 抗原基因簇 ;并且这些基因可能介导了O 抗原基因簇间的重组及以O14 1O

大肠杆菌O138 O-抗原基因簇的破译及Gne的生物信息学鉴定

利用鸟枪法对大肠杆菌E .coliO138O 抗原基因簇进行测序 ,序列全长 14 139bp ,用生物信息学的方法进行序列分析 ,共发现 11个基因 ,分别为鼠李糖合成酶基因 (rmlB ,rmlD ,rmlA ,rmlC)、UDP GalNAcA合成酶基因 (gne ,gna)、糖基转移酶基因 (3个 )、O 抗原转运酶基因 (wzx)和O 抗原聚合酶基因 (wzy)。发现一种稀有单糖UDP Gal NAcA的合成途径 ,对合成该糖的第一种酶Gne进行了生物信息学鉴定 。

细菌脂多糖中GDP-colitose糖合成基因的预测、克隆及表达鉴定

colitose糖存在Salmonella enterica O50、S.enterica O35、E.coli O111、E.coli O55和Vibrio choleraeO139等少数几种细菌的O-抗原中.GDP-colitose糖的合成酶基因分别为wbdJ、wbdK和gmd.用PCR的方法扩增出三种基因的片断,克隆到表达载体pCAL-c中,从而构建了表达质粒pLW1、pLW4、pLW7,转化到大肠杆菌BL21-Gold中,获得工程菌株B10,B11,B12.IPTG诱导表达,纯化得到三种电泳纯的表达产物,分子量分别约为35kD,44kD,42kD,与预测结果相似.

应用遗传改造的鼠伤寒沙门氏菌治疗癌症

前癌症治疗包括放疗和化疗有很多缺陷,例如,高毒性,低组织渗透性,低特异性,靶位点不强等缺点。很多年以前,人们就已经开始用细菌进行防治癌症的研究,例如Wiliam B.Coley发现,癌症病人手术后如果感染细菌疾病,可以提高治愈率;

鸭疫里默氏杆菌TbdR1表位抗原免疫原性研究

TbdR1(Ton B-dependent receptor 1)是鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)血清1、2和10型中的一个很好的交叉免疫原性抗原。通过生物信息学分析,分段表达TbdR1的表位抗原,并对其免疫原性进行初步探究。结果表明,分段后的表位抗原对雏鸭均具有一定的保护力,这为深入研究鸭疫里默氏杆菌亚单位疫苗奠定了基础。

应用减毒沙门菌载体递呈多糖抗原的研究进展

近年来,应用减毒沙门菌载体递呈异源抗原开发口服活疫苗受到广泛的重视。沙门菌作为活的疫苗载体,其优点有:(1)沙门菌疫苗通过常规的细菌培养方法即可大量获得,而且可以通过食物或饮水口服给药,是大规模养殖场接种疫苗的经济、方便选择;(2)经口服接种的减毒沙门菌能够通过粘膜途径感染宿主,诱发特异性粘膜、体液和细胞免疫应答[1];(3)沙门菌可以在活细胞中生物合成多糖,并且这些多糖可以连接至类脂A(Lipid A)的核心寡糖部分,从而诱导针对异源多糖抗原的系统性免疫应答[2-3]。

畜产品加工学双语教学探析

为了响应国家“一带一路”的倡导,推进高校毕业生走向国际化,许多高校积极推进双语教学。本文初步探讨了畜产品加工学课程实行双语教学过程中的教学方法、教材及评价机制,通过对2个教学班的英文测验及问卷调查,发现双语教学在“畜产品加工学”教学中取得了较好的教学效果。

浅谈雨课堂在《分子生物学实验》教学中的应用

本文对雨课堂教学在分子生物学实验教学中的应用进行了探讨。教学实践结果表明,雨课堂教学能够有效地实现课前预习,课堂互动及课后线上辅导,协助教师进行线上考试,对活跃课堂气氛、提高学生学习兴趣以及拉近师生间的心理距离具有显著性的作用。

革兰氏阴性菌外膜囊泡作为亚单位疫苗的研究进展

外膜囊泡(OMVs,Outer membrane vesicles)是一种在革兰氏阴性菌甚至某些革兰氏阳性菌中普遍存在的包含生物学活性物质的囊泡状结构,其大小在20–250 nm之间。其组成成分包括脂多糖、外膜蛋白、磷脂、DNA以及在形成过程中被外膜包裹的周质成分等。由于外膜囊泡不能复制且含有大量的细菌抗原,并能有效激活免疫系统,所以被认为是极具潜力的疫苗候选。虽然外膜囊泡从发现至今有50多年的历史,但针对其作为疫苗的潜力探究最近几年才开始,中国关于这方面的文献报道还很少。本文从外膜囊泡诱导免疫应答的机制以及其作为疫苗的研究进展两个方面概述了外膜囊泡可以作为一种新颖的防控疾病的疫苗策略,为今后外膜囊泡疫苗的深入研究提供参考。

应用遗传改造的沙门菌介导肿瘤治疗的研究进展

肿瘤是机体在各种致瘤因子作用下,局部组织细胞异常增生所形成的赘生物。肿瘤治疗一直是临床上的一个难题,而放疗、化疗和手术等常规的肿瘤治疗方法均具有明显的局限性。早期研究发现某些厌氧菌或兼性厌氧菌具有抗肿瘤效应,例如兼性厌氧菌鼠伤寒沙门氏菌可以通过某些机制选择性定殖于肿瘤并抑制肿瘤生长,其应用于肿瘤治疗具有许多潜在的优势。过去的一二十年里,已有不少研究者通过遗传操作减弱沙门菌毒力,提高其定殖肿瘤的靶向性,或以减毒沙门菌作为载体向肿瘤靶向递呈各种治疗分子,并在许多动物试验中观察到遗传改造沙门菌的良好抗肿瘤效应。随着沙门菌抗肿瘤研究的不断深入,应用遗传改造的沙门菌有希望成为一条更有效的肿瘤治疗途径。本文将从沙门菌的抗肿瘤机制、遗传改造的沙门菌介导肿瘤治疗的研究进展和目前研究存在的问题等方面进行综述。

肠道沙门氏菌O-抗原多糖的研究进展

O-抗原是由多糖重复单元组成的多聚糖,表达于细菌的外膜,具有多样性,是划分沙门菌血清型的重要依据。O-抗原多糖由多基因协同作用而合成,这些基因在沙门菌基因组上成簇存在,形成O-抗原基因簇。O-抗原多糖也是重要的毒力因子,在沙门菌入侵宿主、体内存活、定殖等致病过程中均发挥着重要的作用。此外,O-抗原还是沙门菌主要的保护性抗原,能激发宿主产生高水平抗体并发挥免疫保护作用,成为疫苗研究的靶点。本文综述O-抗原多糖的基因结构和合成、生物学功能及其在疫苗研制中的应用与前景。

提高黏膜免疫的方法及研究进展

黏膜是很多病原体入侵机体的重要入口,黏膜疫苗能诱导产生黏膜保护性免疫应答和系统性免疫应答,阻止病原微生物黏附、入侵和繁殖。但多数候选黏膜疫苗的安全性、稳定性、免疫效力及保护作用还无法达到理想的效果,佐剂或载体的使用改善了黏膜疫苗存在的不足,使黏膜疫苗有了广阔的发展前景。文章综述了提高黏膜免疫的方法及研究进展。

细菌小细胞在癌症治疗中的应用

癌症一直是危害人类健康的主要疾病之一。传统的癌症治疗方法包括放疗、化疗和手术,均具有明显的毒副作用或局限性。脂质体和纳米颗粒作为被广泛研究的药物递送载体,在人体临床试验中也出现了药物渗漏和装载功能不全等问题。目前而言,应用具有肿瘤靶向性的载体递送抗肿瘤药物或小分子,是有希望介导安全、有效的肿瘤治疗的策略之一。近年来,细菌来源的非复制型小细胞已受到越来越多的关注。小细胞是细菌异常分裂时期产生的纳米级无核细胞,其直径为200–400 nm,因而具有较大的药物装载能力。对小细胞的表面进行修饰,例如,装配能与肿瘤细胞表面特异性抗原或受体结合的抗体/配体,可显著提高小细胞的肿瘤靶向性。这种具有靶向性的纳米材料能将抗肿瘤的化疗药物、功能性核酸或编码功能性小分子的质粒靶向递送至肿瘤,而减少药物在正常组织器官的集聚。因此,使用小细胞作为靶向递送载体有助于降低药物对机体的毒性,从而最大限度地发挥药物分子在体内的抗肿瘤活性。文中将对小细胞的产生与纯化、药物装载、肿瘤细胞靶向性、内化过程以及其用于递送抗肿瘤药物的研究进展等方面进行综述,为开发基于小细胞的癌症治疗策略提供一定的参考。

大肠杆菌CRISPR/Cas9基因编辑系统的建立及验证

根据大肠杆菌W3110菌株的waaL基因序列设计CRISPR/Cas9的作用靶点,构建sgRNA表达质粒,然后设计同源修复供体DNA序列,通过电转化法导入宿主菌内,从而构建完整的大肠杆菌CRISPR/Cas9基因编辑系统。结果显示,应用该系统成功地构建了大肠杆菌waaL基因缺失株。将该系统继续用于大肠杆菌W3110菌株wecA基因的缺失,结果表明,该系统可快速高效地用于大肠杆菌基因缺失,这为构建大肠杆菌生物工程菌奠定基础。

肠杆菌共同抗原的研究进展

肠杆菌共同抗原(Enterobacterial common antigen,ECA)是由多糖重复单元组成的多聚糖,几乎表达于所有肠杆菌细菌外膜,具有生物学功能。ECA由多基因协同作用而合成,这些基因在肠杆菌细菌基因组上成簇存在,形成ECA抗原基因簇。ECA是重要的毒力因子,在肠杆菌细菌入侵宿主、体内存活等过程中有一定作用。同时,ECA在维持细菌外膜渗透屏障、鞭毛表达、群集运动及抗胆酸胆盐等方面也有重要作用。此外,锚定在细菌脂多糖核心区的ECALPS还是细菌重要的表面抗原,能激发宿主产生高水平抗体,可以作为疫苗研究的靶点。结合笔者的研究,文中对ECA纯化、基因结构和合成、免疫特性、生物学功能及应用等方面进行了综述。

裂解系统在细菌载体疫苗中的应用

重组细菌载体疫苗因其能够诱导机体产生粘膜免疫、体液免疫和细胞免疫的特点,已经被广泛用作递送保护性抗原和核酸疫苗的载体来预防某些传染病。但是重组到细菌载体疫苗中的保护性抗原和核酸难以穿越细菌细胞壁释放到宿主细胞内发挥作用,残留在动物或畜禽产品中的疫苗菌株还可能造成环境的污染和疫苗菌株的传播。而有效解决这些问题的方法是构建一种细菌自动裂解系统,使疫苗菌株能够在体外培养时正常生长而在体内环境中自动裂解死亡。目前主要应用的细菌裂解系统包括:基于调控延迟肽聚糖合成的裂解系统、基于噬菌体裂解蛋白调控的裂解系统、基于毒素-抗毒素系统(Toxin-antitoxin system)的裂解系统。此外,一种潜在的基于细菌Ⅵ型分泌系统(Type Ⅵ secretion system,T6SS)的裂解系统也有望成为构建自动裂解菌株的新方法。文中将着重对这几种裂解系统的调控机制进行阐述。