猪精子的体外获能与体外受精

通过5个实验研究了应用咖啡因、肝素和I-A23187促进猪精子体外获能的效果,比较了不同受精次数和不同种类的精液进行猪卵子体外受精的效果。试验表明,用肝素和咖啡因协同作用,猪精子体外获能的效果最好;采用2—3次受精法进行体外受精可以提高受精率;使用新鲜精液、新鲜附睾精液或冷冻附睾精液进行体外受精,其效果差异不显著。

猪卵子体外成熟方法与影响因素的研究

研究了猪卵子体外成熟时间,各种培养液以及添加物对猪卵子体外成熟的影响,以及猪卵子体外成熟方法。结果表明,带有完整或部份紧密卵丘细胞的卵子,需要32—36/小时进行体外成熟培养;促性腺激素和猪卵泡液有助于猪卵子体外成熟,卵子在m-KRB液或分别含有猪卵泡液、PMSG和FSH的m-KRB液中培养成熟,它们的体外受精卵裂率分别为7.94％、22.56％、30.23％和23.26％;卵子在含有促性腺激素和猪卵泡液的m-KRB和m-TCM199液中培养成熟,它们的体外受精卵裂率分别为26.32％和30.36％;将猪卵子移入到小鼠和大鼠的子宫角或大鼠和兔的输卵管中进行成熟培养,它们的体外受精卵裂率分别为10.42％、28.45％、3.33％和36.36％

影响猪体外受精卵发育的因素

研究了培养温度与培养液对猪体外受精卵发育的影响,并且对体外受精卵的发育能力进行了测定.结果表明,最适宜培养温度为39-39.5℃,其卵裂率达到50.75%,m-BMOC-2和m-whitten溶液对体外受精卵早期发育效果差异不显著,但对卵子突破4-细胞阻隔继续发育的效果差异显著;227枚体外受精卵移入受体母猪中进行体内培养,120-130小时后发育至桑椹期胚胎的比例为17.81%,150-160小时后发育至孵出囊胚期胚胎的比例为15.76%.

家兔卵子体外受精研究

从供体母兔输卵管冲取成熟的卵母细胞,与体外获能的附睾精子或射出精子体外受精。三种获能方法分别是 His-DM 法、肝素法和附睾精子 DM 预培养法,获能精子与卵母细胞体外受精后的2-细胞胚胎发育率分别是36.37%(24/66)、12.57%(13/102)和35.33%(53/150)。体外受精后体外发育到2-至4-细胞期胚胎经移植给7只同期发情受体母兔,结果有2头怀孕并产仔9只,胚移产仔率为28.57%(2/7),移入胚胎成仔率为11.39%(9/79)。

小鼠卵子体外受精技术研究

通过对310只雌鼠、2886枚卵子的体外受精实验,成功地培育出6窝共20只“试管小鼠”。试验主要研究了小鼠超数排卵方法,雌鼠、雄鼠对体外受精的影响,pH值和培养液对体外受精的作用;改进了小鼠胚胎移植工具,提高了移植成功率。用改进后的方法,对105只雌小鼠、951枚卵子进行体外受精,平均受精率66.45％,最高的达97.14％。

猪卵子体外受精研究

本研究旨在探讨影响猪卵子体外成熟、猪精子体外获能和猪卵子体外受精的某些因素。主要研究:(1)猪卵体外成熟所需的时间;(2)促性腺激素和猪卵泡液对猪卵体外成熟的影响;(3)咖啡因、肝素和离子钙I-A_(23187)对猪精子体外获能的促进作用;(4)不同体外受精次数对猪卵体外受精结果的影响;(5)不同种类猪精液的体外受精能力。各试验组的结果比较主要根据体外受精后卵子的卵裂率,数据用卡方(x^2)进行统计学分析。 试验结果表明:(1)猪卵子体外成熟需要32—36小时,经32—36小时体外成熟的 卵子体外受精后卵裂率(2—4细胞期)达31.16％,明显高于其他对照组(P<0.01);(2)促性腺激素和猪卵泡液能够促进猪卵子体外成熟,当0.25国际单位/毫升PMSG和10％猪卵泡液,或者0.25国际单位/毫升FSH和10％猪卵泡液分别加入到猪卵子体外成熟中,经此培养后的猪卵子体外受精卵裂率分别达到23.95％和35.00％,明显高于对照组(P<0.05);(3)咖啡因、肝素、离子钙I-A_(23187)对猪精子体外获能有促进作用。在精子预培养液中加入0.05毫克/毫升肝索,在受精液中加入2毫克/毫升咖啡因,获得了体外受精后最高的卵裂率36.16％,明显高于其他组(P<0.01);(4)多次体外受精法有助于提高体外受精率,因为卵子的体外成熟是不同步的,但是超过2次又是有害的。

不同获能培养液对猪精子体外获能效果的比较试验

本试验用精子穿透仓鼠卵的检测手段,研究苯甲酸钠咖啡因、钙离子载体A23187(Ⅰ—A23187)和肝素对猪精子体外获能的效果.结果0.05mg/ml的肝素与2mg/ml的咖啡因的协同作用能有效地提高猪鲜精精子对去透明带仓鼠卵子的穿透率.同时,用此获能培养液在附睾冻精的体外获能试验,亦得出比对照组高的精子穿透率.

猪卵子体外受精方法研究

本试验分别研究了:(1)猪卵子体外成熟所需要的培养时间;(2)促性腺激素和猪卵泡液对猪卵子体外成熟的作用;(3)不同体外受精次数对猪卵子体外受精率的影响;(4)不同精子获能辅助剂对猪精子体外获能的作用;(5)不同种类猪精液的体外受精能力.研究结果表明,猪卵子体外成熟所需培养时间是32～36小时,在体外成熟培养液中加入0.25IU/ml PMSG(或FSH)和10%猪卵泡液可以促进猪卵子体外成熟,在精子体外获能培养液中加入0.05mg/ml肝素,在体外受精培养液中加入2mg/ml咖啡因可以促进猪精子休外获能并可提高体外受精率,体外成熟后的猪卵子进行2次受精可以获得较高的体外受精率.本试验用新鲜射出精子,冷冻射出精子,新鲜附睾精子,冷冻附睾精子对体外成熟猪卵子进行体外受精,受精后卵裂率(2～4细胞期)分别是24.26%,23.40%,22.65%和24.24%.

猪卵子体外成熟方法研究

本文根据猪卵子带卵丘细胞不同,将卵子分为 A—D4级。实验表明,使用不同成熟培养时间和多次受精法,可以使处于不同发情期的卵子获得较高的体外受精率。B、C、D 级卵子(完整、部分完整或无卵丘)培养32—36小时后受精,体外受精率(2细胞率)25.60％,17.61％和15.78％。A 级卵(放射状卵丘)培养4—15小时后受精,体外受精率62.50～66.67％。在m—KRB 和 m—TCM 199培养液中添加卵泡液和 FSH 或 PMSG 可以促进卵子体外成熟,卵丘扩散成放射状。特别是用即将排卵的猪的大卵泡液和发情黄牛卵泡液,其效果更优。使用这两种培养液的平均受精率分别是19.78％和29.58％,最高30.23％和43.48％。将猪卵子移入小鼠和大鼠子宫角以及兔输卵管中进行卵子成熟培养获得成功,体外受精率分别是10.42％、28.45％和36.36％。

猪卵子体外成熟方法与影响因素的研究

研究了猪卵子体外成熟时间,各种培养液以及添加物对猪卵子体外成熟的影响,以及猪卵子体外成熟方法。结果表明,带有完整或部份紧密卵丘细胞的卵子,需要32—36小时进行体外成熟培养;促性腺激素和猪卵泡液有助于猪卵子体外成熟,卵子在 m-KRB 液或分别含有猪卵泡液,PMSG 和 FSH 的 m-KRB 液中培养成熟,它们的体外受精卵裂率分别为7.94%、22.56%、30.23%和23.26%;卵子在含有促性腺激素和猪卵泡液的 m-KRB 和 m-TCM199液中培养成熟,它们的体外受精卵裂率分别为26.32%和30.36%;将猪卵子移入到小鼠和大鼠的子宫角或大鼠和兔的输卵管中进行成熟培养,它们的体外受精卵裂率分别为10.42%、28.45%、3.33%和36.36%

用不同激素进行水牛同期发情试验(二报)

应用氯前列烯醇进行水牛同期发情定时输精是提高水牛繁殖力的有效措施。我们于1988年开始水牛同期发情的研究,主要采用15甲基PGF2ā和进口的利特时（Lu-tyse）进行同期发情定时输精的试验,取得了良好的开端。但因这两种激素价格较贵,于1991年采用以成本较低的氯前列烯醇为主,配合PMSG、FSH、HOG等不同配伍对水牛同期发情定时输精的试验,取得了较好的效果。在此基础上,1992年继续进行配伍组合配方的探讨。