北京大学人民医院2015年-2018年HCV感染筛查情况分析

目的分析一家综合性三甲医院HCV感染筛查漏检的情况。方法 回顾分析2015年-2018年就诊于北京大学人民医院同期进行抗-HCV和HCV RNA检测的3659例患者信息。抗-HCV采用雅培Architect I2000和强生Vitros 3600检测,HCV RNA采用罗氏Cobas AmpliPrep/Cobas Taqman 96全自动病毒定量系统检测。收集HCV RNA阳性而抗-HCV阴性的患者标本,Sanger测序法检测HCV基因型,并对患者HCV感染状况及其临床状况追踪随访。抗-HCV检测结果用样本吸光度值与阳性判定值(cut-off)的比值(S/CO)表示。利用GraphPad Prism 5.0作抗-HCV S/CO比值分布图。结果 3659例患者中6例(0.16%)患者至少1种试剂检测抗-HCV为阴性,而HCV RNA为阳性,均值为(6.40±1.86)log 10 IU/ml。6例患者中5例(83%)为急性白血病患者,另1例为呼吸系统疾病患者。6例患者中1例预后良好,3例预后不良,2例死亡。结论 HCV感染使用抗体作为首选筛查方法,仍有0.16%感染者会被漏检,且漏检患者多数预后不良,对免疫功能不全的患者,应检测HCV RNA以避免漏检。

抗中性粒细胞胞浆抗体对自身免疫性肝炎的检测意义

目的探讨抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)对自身免疫性肝炎的检测意义。方法选择210例肝功能异常患者,其中自身免疫性肝炎(AIH)41例,原发性胆汁性肝硬化(PBC)19例,原发性硬化性胆管炎(PSC)3例,其他肝功能异常患者147例。应用间接免疫荧光法和免疫印迹法检测ANCA及其他相关自身抗体,并对患者临床资料进行分析比较。结果本组患者中,ANCA阳性16例,占肝功能异常患者的7.6%。16例ANCA阳性患者中AIH11例,PSC3例,慢性乙型肝炎1例,药物性肝损伤1例。41例AIH中,11例ANCA阳性(11/41,26.8%),同时伴有ANA阳性,核型以均质型为主(8/11,72.7%);30例ANCA阴性者中,25例ANA阳性,核型多样化,均质型仅占20.0%(6/30)。结论本研究中AIH中的ANCA阳性率仅为26.8%,以高滴度为主;ANCA阳性AIH患者ANA均阳性,其核型以均质型为主,且未观察到特殊的临床特征。

一种HBV DNA定量检测试剂的准确性分析

目的评价一种新型HBV DNA定量检测试剂的准确性。方法将第3代HBV DNA WHO国际标准品稀释为6种不同梯度浓度样本,8.5×10~5、8.5×10~4、8.5×10~3、8.5×10~2、85及42.5 IU/ml,用待评价试剂care HBV PCR Assay V3.0检测,并对实测值和理论值进行相关性分析;以Cobas Taqman HBV V2.0为参比试剂,用care HBV PCR Assay V3.0检测93份HBV感染者标本和30份健康者标本HBV DNA含量,并对2种试剂定量检测结果进行相关性和一致性分析;采用巢式PCR扩增漏检标本的HBV S区,直接测序法测定其基因型。结果 care HBV PCR Assay V3.0检测WHO国际标准品的实测值和理论值具有线性相关;2种定量试剂检测93份HBV感染者标本结果均阳性共68份,检测结果呈线性相关,差异无统计学意义(P>0.05),但care HBV PCR Assay V3.0检测值相对偏低;care HBV PCR Assay V3.0检测有14份标本漏检,其中13份标本Cobas Taqman HBV V2.0检测结果位于30~2 000 IU/ml间;对1份漏检标本的基因型检测结果为C型。结论 care HBV PCR Assay V3.0与Cobas Taqman HBV V2.0试剂检测结果有较好的相关性,但对基因型C型的标本可能存在漏检现象。

原发性胆汁性肝硬化患者肝硬化期外周血淋巴细胞计数及T细胞亚群检测与分析

目的探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者肝硬化期外周血淋巴细胞总数及T细胞亚群的特点并分析影响因素及临床意义。方法对86例肝硬化期PBC患者的临床资料、实验诊断数据进行回顾性分析,比较40例代偿期和46例失代偿期PBC患者肝功、免疫学指标和外周血淋巴细胞亚群特点,对可能的影响因素进行相关性分析。结果失代偿期PBC患者年龄、血清总胆红素(TBil)水平、血清总IgA水平、Mayo评分高于代偿期患者(P<0.05),而ALT、ALB、外周血淋巴细胞绝对数(LYMPH)、淋巴细胞百分率(LYMPH%)、T淋巴细胞绝对数(CD3+)、T辅助细胞绝对数(CD3+CD4+)和T抑制细胞绝对数(CD3+CD8+)均低于代偿期患者(P<0.05);LYMPH、LYMPH%、CD3+、CD3+CD4+和CD3+CD8+结果中,失代偿期减低者频率均高于代偿期(45.7%vs.10%,34.8%vs.7.5%,58.7%vs.17.5%,45.7%vs.5%,60.9%vs.27.5%,P<0.05),失代偿期增高者频率均低于代偿期(54.3%vs.90%,6.5%vs.27.5%,0 vs.20%,2.2%vs.22.5%,2.2%vs.10%,P<0.05)。在可能的影响因素中,年龄、Mayo评分、上消化道出血、脾大或脾切除、腹水等肝硬化失代偿表现对结果影响呈负相关;而ALT、ALB对结果影响呈正相关。结论随着肝硬化程度的加深,PBC患者外周血淋巴细胞总数及T细胞亚群数量降低;从淋巴细胞定量角度分析,随着疾病的进展,PBC患者免疫水平下降。

两种检测HAV-IgM试剂的敏感性评价

目的对国内市场上应用较广的两种甲型肝炎病毒抗体(HAV-Ig M)检测试剂进行敏感性评价。方法收集疑似HAV感染者的血清标本,以美国雅培公司的HAV-Ig M试剂检测结果作为金标准,评价北京万泰生物药业股份有限公司和北京现代高达生物技术有限责任公司两种检测HAV-Ig M试剂的敏感性;比较两种HAV-Ig M试剂样本值/临界值(S/CO)的相关性;评价两种检测HAV-Ig M试剂的一致性。结果万泰HAV-Ig M检测试剂和高达HAV-Ig M检测试剂的敏感性分别为94.3%、97.1%,特异性分别为85.2%、91.3%;万泰、高达与雅培HAV-Ig M检测试剂S/CO值有相关(r=0.597和0.541,均P=0.000);万泰、高达与雅培HAV-Ig M检测试剂结果均高度一致(K=0.648和0.772,均P=0.000)。结论万泰、高达试剂均有很好的检测性能,为临床检测和人群血清流行病学调查参考试剂选择提供重要参考依据。

原发性胆汁性肝硬化患者外周血单个核细胞Toll样受体表达与调节性T细胞相关性分析

目的探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血单个核细胞(PBMC)Toll样受体2、4、9(TLR2,TLR4,TLR9)表达及PBMC中CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)特点和影响因素。方法采用流式细胞术检测PBC患者(52例)和健康对照者(22例)外周血PBMC中TLR2、4、9阳性细胞及Tregs比例,比较其在PBC患者和健康对照者中的差别并分析TLR与Tregs相关性。结果PBC患者Tregs比例低于健康对照者[(1.53±1.33)vs(4.42±1.43),P<0.0001],TLR4阳性细胞比例高于健康对照者[(36.95±3.53)vs(32.84±8.06),P=0.003];PBC患者Tregs比例与TLR9阳性细胞比例呈负相关(R2=0.115,P=0.016),健康对照者Tregs比例与TLR2,4和TLR2,4,9联合表达阳性细胞比例呈负相关(R2=0.326,P=0.007;R2=0.226,P=0.034)。结论 PBC患者外周血PBMC中Tregs比例降低,TLR4表达升高,可能受肝硬化失代偿期腹腔感染的影响。

北京某综合三甲医院对COVID-19疑似和非疑似患者进行SARS-CoV-2核酸筛查结果分析

目的以北京综合三甲医院为例,对新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疑似患者和非疑似患者的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸筛查结果进行分析,为COVID-19的实验室诊断提供实验依据。方法SARS-CoV-2核酸检测的咽拭子标本来自2595例患者,COVID-19疑似患者81例,非疑似患者2514例。咽拭子标本采用QIAamp Viral RNA Mini Kit试剂提取RNA,分别采用国家药品监督管理局批准的3种(A、B、C)不同灵敏度试剂盒进行实时荧光PCR平行检测。结果81例COVID-19疑似患者标本中SARS-CoV-2核酸阳性检出率为6.17%(5/81),2514例非疑似患者标本中均没有检出SARS-CoV-2核酸。确诊的5例COVID-19患者,A试剂检出率为80.00%,B、C试剂检出率均为100.00%。结论在COVID-19低流行区(北京)综合三甲医院筛查的COVID-19疑似患者中SARS-CoV-2核酸阳性检出率较低。无症状的非疑似患者中SARS-CoV-2感染的概率极低,为减少核酸筛查的工作量,可采用混合标本检测。在实验室诊断中,对于低病毒载量的患者,可采用两种试剂盒平行检测,以提高实验室诊断的准确性。

甲型肝炎病毒抗体室内质控血清制备及评价

甲型肝炎（甲肝）是由甲型肝炎病毒（Hepatitis A virus，HAV）引起的，以黄疸、发热、腹痛、厌食为主要症状的急性病毒感染性疾病，主要通过粪-口途径传播。甲肝是与环境卫生和个人卫生水平有关的世界范围内的传染病之一。

抗乙醇脱氢酶抗体ELISA法的建立及其对自身免疫性肝炎诊断的价值

目的 建立血清抗乙醇脱氢酶（alcohol dehydrogenase，ADH）抗体ELISA法，并评价抗-ADH在诊断自身免疫性肝炎（AIH）中的价值。方法用免疫印迹试验对酵母ADH与人血清抗-ADH之间的反应性进行验证。用酵母ADH建立检测血清抗-ADH的ELISA法。以67例AIH、94例原发性胆汁性肝硬化（PBC）、199例慢性乙型肝炎（CHB）、132例慢性丙型肝炎（CHC）、24例酒精性肝病（ALD）和99例结缔组织病（CTD）患者及31名健康对照者为研究对象，对其血清中的抗-ADH进行检测并统计其阳性率，阳性率的比较用X^2检验。结果建立了一种检测人血清抗-ADH的ELISA法，并确定了最佳反应条件；免疫印迹试验证实酵母ADH与人血清抗一ADH有良好反应性。AIH患者血清抗-ADH阳性率为59．7％（40／67），高于健康对照组（0，X^2=31．271，P〈0．05）、PBC组（6．4％，X^2=54．492，P〈0．05）、CHB组（14．1％，X^2=54．848，P〈0．05）、CHC组（21．2％，X^2=29．269，P〈0．05）、ALD组（25．0％X^2=8．512，P〈0．05）和CTD组（43．4％，X^2=4．229，P〈0．05）。结论AIH患者血清中抗-ADH阳性率高于其他肝病和某些自身免疫性疾病患者，可能对AIH有一定辅助诊断价值。

中国汉族丙型肝炎患者代谢综合征患病率及危险因素分析

目的评估中国汉族丙型肝炎患者中代谢综合征的患病率及其危险因素。方法本研究为一项多中心、横断面研究。纳入997例中国汉族丙型肝炎感染者。采集人口统计学、人体测量数据及代谢综合征相关临床指标。统计学处理采用t检验(正态分布)或Mann-WhitneyU双样本检验(非正态分布)和卡方检验。与代谢综合征显著相关的因素进一步采用二元logistic回归分析。结果997例丙型肝炎患者中,170例(17.1%)患者被诊断为代谢综合征。二元logistic回归分析显示,基因2型(OR=1.594;95%CI:1.045~2.431,P=0.030)、高龄(OR=1.040;95%CI:1.022~1.058,P<0.01)、超重(OR=3.876;95%CI:2.593~5.792,P<0.01)、脂肪肝病史(OR=2.106;95%CI:1.384~3.204,P=0.001)、稳态模型胰岛素抵抗指数(OR=1.263;95%CI:1.118~1.427,P<0.01)、空腹胰岛素低水平(OR=0.949;95%CI:0.915~0.985,P=0.006)、低血清白蛋白水平(OR=0.957;95%CI:0.915~1.000,P=0.049)和高γ-谷氨酰转肽酶水平(OR=1.004;95%CI:1.000~1.008,P=0.0041)与代谢综合征的存在具有显著相关性。结论对基因2型、高龄、超重、有脂肪肝病史、稳态模型胰岛素抵抗指数偏高、空腹胰岛素水平偏低、血清白蛋白偏低、高γ-谷氨酰转肽酶水平的丙型肝炎患者,要重视代谢综合征的筛查。