肾大部切除大鼠肾皮质环加氧酶2的表达及调节

目的 探索肾大部切除大鼠肾皮质环加氧酶2(cyclooxygenase,COX2)的表达及特异性COX2抑制剂罗 非昔布对其的影响。方法 将大鼠随机分为6组,每组6只:Ⅰ.假手术组(Sham组),Ⅱ.肾大部切除组(SNX 组),Ⅲ.SNX+罗非昔布组(Rof组),Ⅳ.SNX+吲哚美辛组(Ind组),V.SNX+氯沙坦组(Los组),Ⅵ.SNX+罗 非昔布+氯沙坦合用组(R+L组)。6周后检测大鼠尿蛋白与尿血栓烷素B2(TXB2)的排泄量,检测肾皮质血管 紧张素Ⅱ浓度,应用免疫组化、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blotting的方法检测COX2及COX1 mRNA及蛋白质的表达。结果 SNX组大鼠血压较Sham组显著升高,Los组及R+L组血压较SNX组明显降 低(P<0.01),而Rof组及Ind组血压与SNX组相比无显著差别(P>0.05)。与Sham组相比,SNX组大鼠尿蛋 白及肾皮质COX2的表达与尿TXB2排泄明显增多,COX1表达无明显变化,AngⅡ浓度明显增高。Rof组及R+ L组肾皮质COX2表达下调,尿'IX]吃排泄明显减少,(X)X1表达无明显变化,AreⅡ浓度降低。Ind组(X)X2及 COXl表达均下调,尿'IX]B2排泄明显减少;氯沙坦对(X)X2及COXl无明显影响。结论肾大部切除大鼠肾皮 质(X)X2的表达与尿'TXB2排泄明显增多,COXl表达无明显变化。特异性COX2抑制剂罗非昔布使ODX2的 表达下调.部分抑制肾素一血管紧张素系统的兴奋。

农业环境中的土壤污染检测及治理技术探析

农业生产过程中,大量使用化肥、农药等投入品导致土壤遭受严重化学污染,严重威胁着农业可持续发展。本文从云南省曲靖市宣威市的农业环境出发,系统分析了土壤污染检测和土壤修复治理两个方面,系统分析了农业环境中土壤污染治理的相关技术。首先,探讨了土壤污染物种类及其危害,介绍了先进的土壤污染监测技术,为有效防治土壤污染提供了依据。其次,综述了生物修复、化学修复、物理修复等土壤修复技术的原理和应用情况,并对各种技术的优缺点进行了对比分析。最后,提出了未来土壤污染治理技术发展的趋势,为宣威市农业可持续发展提供技术支撑。

尿毒症患者血清中分子肽物质的提纯和生物活性研究

分离、纯化尿毒症中分子物质并研究其生物活性。采用反相高效液相色谱技术将初提的中分子组分进一步纯化，并通过提纯猪肾Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ及体外培养正常人外周血单个核细胞来研究其生物活性。结果表明，尿毒症中分子组分第２～３峰经两步反相高效液相色谱提纯出含肽的中分子化合物。该组分浓度在１．０ｇ／Ｌ以上对Ｎａ＋、Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ有抑制作用；浓度在０．２５ｇ／Ｌ以上对淋巴细胞的增殖有抑制作用。结论：尿毒症患者血清中含有高浓度的含肽中分子物质，其对Ｎａ＋。

川芎嗪和SOD对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用

目的：探讨川芎嗪对肾缺血再灌注损伤的保护作用。方法：选用大鼠一侧肾切除，对侧肾缺血６０分钟动物模型，观察再灌注前、再灌注后２４小时肾组织中丙二醛（ＭＤＡ）含量及Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ活力的改变以及使用超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和川芎嗪治疗对它们的影响。结果：６０分钟肾缺血和再灌注导致肾皮质ＭＤＡ含量显著增高，而Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ活力明显降低，用ＳＯＤ和川芎嗪治疗后，肾皮质ＭＤＡ含量明显低于缺血组（Ｐ值分别＜０．０１和０．０５），Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ活力则高于缺血组（Ｐ值均＜０．０５）。结论：川芎嗪通过抗氧化作用干扰氧自由基对肾组织的损伤。

小鼠足细胞Tbxa2r基因敲低方法探讨

目的设计并筛选对足细胞血栓素A2受体(Tbxa2r)基因表达敲低效果最佳的siRNA序列。方法培养永生性小鼠足细胞(MPC5),取生长占培养板70%细胞用于实验。设计4条siRNA序列(Tbxa2r-mus-1150、Tbxa2r-mus-1309、Tbxa2r-mus-1677、Tbxa2r-mus-1884),经转染效率验证后转染足细胞。将细胞分为四组:干扰组(以筛选出的干扰序列转染细胞)、空白组(正常细胞样品)、模拟组(只加转染试剂的细胞样品)、阴性对照组(转染无序干扰系列的细胞样品)。Real-time PCR检测各组细胞Tbxa2r基因,Western blot法检测Tbxa2r蛋白。结果筛选出干扰效果最强的siRNA序列Tbxa2r-mus-1677,其转染24 h后对Tbxa2r基因表达干扰效果较小,而在转染48 h后足细胞Tbxa2r基因相对表达量最低。转染72 h后,细胞Tbxa2r蛋白相对表达量明显降低。结论采用Tbxa2r特异性siRNA技术成功敲低足细胞Tbxa2r基因表达,并筛选出敲低效果最佳的siRNA序列。

特异性环氧合酶-2抑制剂对肾大部切除大鼠肾脏纤溶酶原激活物抑制剂-1表达的影响

目的 探讨特异性环氧合酶 2 (COX 2 )抑制剂 (Rofecoxib)对肾大部切除 (SNX)大鼠肾脏纤溶酶原激活物抑制剂 1(PAI 1)表达的影响。方法 大鼠随机分为 5组 :Ⅰ组为假手术组 ;Ⅱ组为SNX组 ;Ⅲ组为SNX+Rofecoxib组 ;Ⅳ组为SNX +吲哚美辛组 ;Ⅴ组为SNX +氯沙坦组。 6周后检测大鼠血压、肾功能、尿蛋白及尿血栓烷素B2 (TXB2 ) ,应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法检测肾皮质内PAI 1mRNA的表达 ;采用免疫组织化学及WesternBlot法检测PAI 1蛋白质的表达。结果 Rofecoxib组大鼠尿蛋白水平较SNX组显著降低 (P<0 .0 5 ) ,肾小球硬化及肾小球基底膜增生程度较SNX组明显减轻 ,与氯沙坦组相近。Rofecoxib组肾皮质PAI 1mRNA及蛋白质表达水平分别较SNX组下调 40 .2 4%和 31.16 % (P <0 .0 1)。结论 特异性COX 2抑制剂可能通过部分抑制PAI 1基因的表达 ,减少细胞外基质的分泌并促进其降解 。

特异性环氧合酶-2抑制剂塞来昔布对嘌呤霉素氨基核苷诱导的足细胞凋亡的影响

目的研究特异性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside,PA)诱导的足细胞凋亡的影响,初步探讨特异性COX-2抑制剂对足细胞保护作用的机制。方法以条件永生性小鼠足细胞株为研究对象,分为正常对照(CON)组、PA组、塞来昔布(CEL)组和地塞米松(DEX)组。在0、8、24和48h检测各组足细胞活性和凋亡水平,并检测足细胞凋亡过程中caspase-3的活性水平,运用Western印迹法检测各组足细胞P53及COX-2的表达。结果与CON组比较,PA、CEL、DEX组在24、48h的足细胞凋亡率均显著升高(P值均<0.05),但各组这两个时点间的足细胞调亡率的差异无统计学意义(P值均>0.05)。与PA组比较,CEL、DEX组在24、48h的足细胞凋亡率均显著降低(P值均<0.05)。与CON组比较,各组细胞caspase-3活性无明显变化(P值均>0.05)。与CON组比较,PA组在24、48h的P53、COX-2表达均显著增多(P值均<0.05),各组这两个时间点间P53、COX-2表达的差异无统计学意义(P值均>0.05)。与PA组同时间点比较,CEL、DEX组在24、48h的P53、COX-2的表达显著下降(P值均<0.05)。结论 PA诱导的足细胞凋亡呈时间依赖性,随时间延长,足细胞凋亡逐渐增多。PA诱导的足细胞凋亡过程中P53、COX-2的表达增加,足细胞凋亡过程与caspase-3无关。COX-2抑制剂具有抑制足细胞凋亡的作用,与地塞米松相当。

塞来昔布对嘌呤氨基核苷诱导的足细胞凋亡的影响

以条件永生性小鼠足细胞株为研究对象,分为正常对照组(CON组)、嘌呤霉素氨基核苷组(PA组)、地塞米松组(DEX组)、塞来昔布组(CELE组)、地塞米松+嘌呤氨基核苷组(DEX+PA组)、塞来昔布+嘌呤氨基核苷组(CELE+PA组)。在0、8、24和48 h检测足细胞凋亡水平、caspase-3蛋白酶活性水平及凋亡过程中p53水平。结果显示,与CON组比较,CELE、DEX组凋亡率无明显变化,PA组凋亡率明显增高(P<0.01),而CELE+PA、DEX+PA组凋亡率较PA组明显下降(P均<0.05)。PA组24 h时,p53表达较CON组明显增多(P<0.01),用CELE、DEX干预后明显降低(P均<0.05)。认为塞来昔布可以抑制PA诱导的足细胞凋亡,且p53参与了PA诱导的足细胞凋亡过程。

川芎嗪注射液加苯那普利治疗糖尿病肾病疗效观察

目的 :观察川芎嗪注射液加苯那普利治疗糖尿病肾病的疗效。观察其甘油三酯、胆固醇、尿蛋白、血压 ,肾功能的变化。方法 :将 4 8例糖尿病肾病病人分为三组 ,每组 16例 ,A组给予川芎嗪注射液 ,苯那普利。B组用川芎嗪注射液。C组 :苯那普利。观察治疗二个月前后血压 ,2 4小时尿蛋白 ,甘油三酯 (TG) ,胆固醇 (TC) ,血肌酐 (Scr)和血尿素氮 (BUN)的变化。结果 :川芎嗪 (B组 )可减低血胆固醇 ,甘油三酯 ,有轻度降血压作用。苯那普利 (C组 )可减少蛋白尿、血压 ,改善肾功能。联合用药 (A组 )能明显减低胆固醇、甘油三酯、降血压、蛋白尿 ,降低SCr、BUN水平 (P <0 0 5orP <0 0 1)。结论 :川芎嗪注射液和苯那普利能降低血压 ,减少尿蛋白排出 ,降低血脂 ,改善肾功能 ,防止和缓糖尿病肾病的发展。

环氧合酶在单侧输尿管梗阻大鼠肾脏的表达

目的 观察环氧合酶 (COX)的两种同工酶 ,即COX 1和COX 2在单侧输尿管梗阻 (UUO)大鼠术侧肾脏的表达情况。方法 建立左侧输尿管梗阻模型 ,设假手术组为对照。 4周后分别应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)和免疫组织化学方法检测COX 1、COX 2的mRNA水平及蛋白质表达 ,并采用放射免疫法测定术侧肾脏的残余尿液中血栓烷素B2 (TXB2 )浓度。结果 COX 1的mRNA和蛋白水平在两组间差异无显著性。病变组大鼠尿液中TXB2 的浓度急剧上升 ,COX 2的基因表达和蛋白质合成大幅增加 ,病理上呈现明显的肾小管间质纤维化。结论 COX

雷马曲班对嘌呤霉素氨基核苷诱导的足细胞凋亡的影响

目的:观察雷马曲班对嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside,PAN)诱导的小鼠足细胞凋亡的影响。方法:将条件永生性小鼠足细胞随机分为4组,对照组用RPMI-1640培养液培养,模型组用100 mg/m L PAN诱导足细胞损伤,实验组先用100μg/m L雷马曲班干预1 h,再加入100 mg/m L PAN作用足细胞,雷马曲班组用100μg/m L雷马曲班单独作用足细胞;分别在24、48 h时收集各组细胞,应用FITC-Annexin V/PI双染色法荧光显微镜观察足细胞的凋亡并定量分析,透射电镜观察足细胞损伤、凋亡及超微结构变化。结果:Annexin V/PI染色荧光定量检测结果显示,与对照组相比,模型组、实验组24、48 h的足细胞凋亡率均明显升高(P均<0.05),雷马曲班组足细胞凋亡率无明显变化(P均>0.05)。与模型组相比,实验组24 h足细胞凋亡率明显下降(P<0.05),48 h足细胞凋亡率明显降低(P<0.01)。透射电镜结果显示,实验组24、48h足细胞损伤均较模型组明显减轻,凋亡形态的细胞减少。结论:雷马曲班能够降低PAN诱导的足细胞凋亡,减轻足细胞超微结构损伤。

环氧合酶-2基因敲低对足细胞凋亡及podocin蛋白表达的影响

目的观察足细胞环氧合酶-2(COX-2)基因敲低对足细胞凋亡及podocin蛋白表达的影响,以进一步探讨足细胞凋亡的分子机制。方法将条件永生性小鼠足细胞株随机分为阴性转染组、5μL siRNA组、10μL siRNA组、15μL siRNA组。经诱导分化成熟,在siRNA干扰48 h后用半定量RT-PCR和Western bolt分别检测足细胞COX-2 mRNA及蛋白表达水平,用流式细胞仪检测足细胞凋亡水平。将10μL siRNA组分别设立足细胞正常对照组、足细胞COX-2基因敲低组和足细胞阴性转染对照组三个亚组,用Western bolt检测podocin蛋白、BAX蛋白及BCL-X1蛋白的表达水平。结果与阴性转染组比较,随着干扰浓度的增加,COX-2 mRNA及蛋白表达逐渐减少,而足细胞的凋亡率逐渐升高,15μL的siRNA组凋亡率明显增高。足细胞COX-2基因敲低组podocin蛋白表达显著低于足细胞阴性转染对照组(P<0.05)。与足细胞阴性转染对照组相比,足细胞COX-2基因敲低组BAX蛋白表达显著上调,而BCL-X1蛋白表达稍有下调。结论敲低COX-2基因表达可以导致足细胞凋亡,且随着siRNA干扰浓度的增加,足细胞凋亡率逐渐增加。在干扰浓度为10μL时,足细胞podocin蛋白的表达下调。BAX蛋白上调及BCL-X1蛋白下调参与了足细胞的凋亡。

体外培养小鼠足细胞表达COX-2的实验研究

目的:研究环氧合酶-2(COX-2)在小鼠足细胞中的表达情况,为进一步研究嘌呤霉素氨基核苷(PA)诱导足细胞凋亡过程中特异性COX-2的表达,以及特异性COX-2抑制剂对足细胞的保护作用建立实验基础。方法:将体外培养的条件永恒的足细胞复苏并传代培养,采用Western blot法分析COX-2在足细胞中的表达。结果:在33℃增殖状态下,足细胞呈鹅卵石状,在37℃分化状态下的足细胞呈分叉状。正常足细胞在37℃分化14 d后,用低血清培养液培养后,随着时间延长,COX-2表达逐渐增多,24 h达最高,以后逐渐减少。结论:COX-2在足细胞上的表达呈时间依赖性。

肾病综合征血栓前体蛋白与D-二聚体检测临床意义

目的:观察肾病综合征(N S)患者低分子肝素抗凝治疗前后测定血中血栓前体蛋白(TPP)与D-二聚体(D-D im er)的含量变化及临床意义。方法:将24例N S病随机分治疗组12例,予低分子肝素钙、潘生丁、速尿抗凝利尿治疗。对照组12例用潘生丁、速尿治疗。两组治疗前及治疗后4周后分别检测血浆中TPP与D-D im er的水平变化及观察临床症状改善情况。结果:两组治疗前血浆中TPP与D-D水平明显高于正常。治疗组抗凝利尿治疗4周后二项指标水平明显下降(P<0.01)。对照组下降不明显,无统计学意义(P>0.05)。治疗组血浆蛋白轻度增加,血脂稍有减低。两组红细胞、白细胞、血小板无明显变化。结论:血浆中TPP与D-D水平能较好的反映肾病综合征患者体内高凝状态及抗凝治疗后纤溶状态。

血栓素A_2与肾病

血栓素A_2(thromboxane A_2,TXA_2)是肾重要的前列腺素类生物活性物质,在肾的生理和病理生理过程中发挥重要作用,近年来研究发现TXA_2参与了多种肾病的发生发展,TXA_2与糖尿病肾病、急性肾损伤、慢性肾病及肾移植排斥反应均密切相关。文中就近年来TXA_2与肾病的研究进展进行综述。

使用尿激酶及肝素联合手法按摩治疗AVF急性血栓的疗效分析

目的探索肾透析患者前臂动静脉内瘘急性血栓形成,使用尿激酶+肝素钠+手法按摩治疗的效果。方法连续入选自2012年9月至2017年8月期间收治的前臂动静脉内瘘急性血栓形成患者共35例,在距前臂动静脉内瘘吻合口血栓近心端5 cm处阻断头静脉,并在距血栓近心端2-3 cm处置入留置针,静脉推入尿激酶+肝素钠+生理盐水混合溶栓溶液,并配合手法按摩溶栓。结果 35例患者经溶栓治疗后,32例成功,3例失败,成功率91. 43%。再通成功的内瘘随访1-12个月,情况良好。结论尿激酶+肝素钠+手法按摩溶栓治疗动静脉内瘘急性血栓安全有效,可以作为有效的治疗措施。

前列腺素E1对局灶节段性肾小球硬化模型大鼠肾血管内皮生长因子表达的影响

目的:探讨前列腺素E1脂微球载体制剂(L ipo-PGE1),地塞米松对局灶节段性肾小球硬化模型大鼠的影响。方法:用单侧肾切除加1周后静脉注射多柔比星(5 mg/kg)的方法建立局灶节段性肾小球硬化(FSGS)大鼠模型,设立假手术组为正常对照组,同时设立FSGS模型组、地塞米松治疗组、L ipo-PGE1治疗组、L ipo-PGE1联合地塞米松治疗组。检测各组术后第2,6,10周末的尿蛋白及第10周末血清尿素氮、肌酐、总蛋白、白蛋白及肾组织病理改变,并应用免疫组化方法检测肾组织内胶原Ⅰ(ColⅠ)、胶原Ⅲ(ColⅢ)的沉积和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白质的表达。结果:L ipo-PGE1治疗组比FSGS模型组尿蛋白排泄量明显减少,血肌酐、尿素氮水平下降,肾小球增生、硬化程度及肾小管间质病变程度明显减轻(P<0.01);免疫组化显示,模型组肾组织胶原Ⅰ、胶原Ⅲ沉积增多,VEGF蛋白表达减少,L ipo-PGE1治疗组比模型组减少(P<0.01),地塞米松治疗组比模型组尿蛋白排泄量增加,血肌酐、尿素氮水平上升,肾小球增生、硬化程度及肾小管间质病变程度加重,L ipo-PGE1联合地塞米松治疗组表现与地塞米松治疗组无显著差异(P>0.05)。结论:L ipo-PGE1对局灶节段性肾小球硬化模型大鼠肾脏损害有一定的保护作用,可能与影响肾小球足细胞VEGF表达有关,但是不能纠正由于地塞米松导致的FSGS模型加重的表现。

镀锌层三价铬常温彩色钝化工艺

常温耐腐蚀的彩色三价铬的钝化,可获得耐蚀性良好、高性能、色泽亮丽的彩色钝化膜。在大量实验基础上,我们讨论了络合剂、金属盐、p H值、钝化温度、浸泡时间和钝化膜的耐蚀性之间的关系,为我们获得良好的钝化加工技术提供了有力的依据。