艾灸对肥胖大鼠肠道屏障功能及TLR4/NF-κB p65信号通路的影响

目的:观察艾灸对肥胖大鼠肠道屏障功能及Toll样受体4(TLR4)/核转录因子κB p65(NF-κB p65信号通路的调控作用,探究艾灸干预肥胖的作用机制。方法:将55只SPF级7周龄雄性Wistar大鼠随机分为正常组(10只)和造模组(45只),造模组采用高脂饮食喂养建立肥胖大鼠模型。造模成功的30只大鼠随机分为模型组、艾灸组、安慰对照组,每组10只。艾灸组在距离“中脘”3~5 cm处施灸,温度保持在(46±1)℃;安慰对照组在距离“中脘”8~10 cm处施灸,温度保持在(38±1)℃。均每天干预1次,共干预8周。观察各组大鼠干预前后体质量、摄食量;ELISA法测定各组大鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、脂多糖(LPS)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);HE染色法观察各组大鼠结肠组织形态;实时荧光定量PCR法检测各组大鼠结肠闭锁连接蛋白-1(ZO-1)、咬合蛋白(Occludin)、紧密连接蛋白-1(Claudin-1)、TLR4、NF-κB p65 mRNA表达;Western blot法检测各组大鼠结肠ZO-1、Occludin、Claudin-1、TLR4和NF-κB p65蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量、摄食量、HOMA-IR及血清TC、TG、LPS水平升高(P<0.01);与模型组和安慰对照组比较,艾灸组大鼠体质量、摄食量、HOMA-IR及血清TC、TG、LPS水平降低(P<0.01,P<0.05)。与正常组比较,模型组大鼠结肠组织黏膜大量上皮细胞损伤脱落,间质内可见明显炎性细胞浸润。与模型组比较,艾灸组大鼠结肠组织损伤有不同程度恢复,间质内可见少量炎性细胞浸润;安慰对照组大鼠结肠组织上皮损伤有少许恢复,间质内可见炎性细胞浸润。与正常组比较,模型组大鼠结肠ZO-1、Occludin、Claudin-1 mRNA和蛋白表达降低(P<0.01),结肠TLR4、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达升高(P<0.01);与模型组和安慰对照组比较,艾灸组大鼠结肠ZO-1、Occludin、Claudin-1 mRNA和蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05),结肠TLR4、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达降低(P<0.01)。结论:艾灸可以降低肥胖大鼠体质量、摄食量,调节肥胖大鼠血脂,改善胰岛素抵抗,可能与改善肠道屏障功能、调节肠道TLR4/NF-κB p65信号通路来减轻炎性反应有关。