自噬在脂多糖引发的心肌损伤中的作用机制及中医药研究

脓毒症引发的心肌损伤是重症监护病房脓毒症患者死亡的主要原因之一。通过研究脂多糖(LPS)诱导的脓毒症致心肌损伤模型,探讨保护心肌损伤的治疗方法与策略,能为临床治疗脓毒症引起的心肌损伤提供实验依据。自噬通常被认为是降解多余、受损的细胞成分实现物质循环再利用的调节机制,在保护心肌细胞结构和功能方面发挥重要的调控作用。最新研究发现自噬失衡是引发心脏毒性损伤的关键机制,而通过自噬调节可以改善LPS引发的心肌损伤。现系统梳理自噬信号通路在LPS引发的心肌损伤中的作用机制及中医药治疗的研究进展,为脓毒症引起的心肌损伤的治疗提供新的思路和方法。

心力衰竭不同阶段底物代谢变化及治疗研究进展

综述心肌底物代谢的生理过程,阐述心力衰竭(HF)早期、中期、晚期底物代谢的变化特点及中西医的治疗进展,为HF的能量代谢疗法寻求新策略。提示以能量代谢为切入点,在西医治疗的同时,配合中医的辨证论治,做到中西医结合优势互补,从而形成个体化、有针对性的治疗方案,是治疗HF的有效措施。

心血管疾病中脂毒性的机制研究及中医药防治进展

综述正常心肌脂肪酸代谢、代谢紊乱诱导潜在的脂毒性物质产生及其激活后相关机制等,从中医药入手,以期找到改善脂毒性、保护心功能的潜在治疗方案。

丹七片调控神经酰胺通路改善心肌梗死后心力衰竭小鼠的药效及机制研究

目的探究丹七片(DQP)基于神经酰胺通路抗心肌脂毒性的药效及机制研究。方法利用冠状动脉左前降支结扎术制备心肌梗死后心力衰竭动物模型,分为假手术组、模型组、丹七片组、辛伐他汀组。利用超声、血生化、病理切片染色、蛋白免疫印迹法(Western Blot)和酶联免疫吸附(ELISA)法等技术进行相应指标的检测。结果与模型组比较,丹七片组左心室射血分数(LVEF)和左心室短轴缩短率(LVFS)升高(P<0.01或P<0.001),而左室收缩末期内径(LVESD)和左室舒张末期内径(LVEDD)降低(P<0.05或P<0.01)。苏木精-伊红(HE)和Masson染色显示,丹七片能够减轻小鼠心肌损伤的程度,改善病理结构变化。血清检测结果提示丹七片可以有效降低心肌损伤标志物肌酸激酶同工酶(P<0.05)、肌钙蛋白I(P<0.001)的表达,进而减轻心脏损伤程度。此外,丹七片干预后可明显下调单链丝氨酸棕榈酰转移酶长链1(SPTLC1)及SPT长链2(SPTLC2)蛋白的表达(P<0.05或P<0.01),并明显降低心肌组织内神经酰胺含量(P<0.001)。结论丹七片可能通过调控从头合成途径关键限速酶单链丝氨酸棕榈酰转移酶来降低心力衰竭小鼠心肌神经酰胺水平,从而改善小鼠心功能,减轻心肌损伤。

丹参酮Ⅰ基于Akt-Nrf2抗氧化通路减轻多柔比星诱导的心脏毒性

多柔比星(doxorubicin,DOX)是一种蒽环类抗生素,广泛用于治疗肿瘤,但其长期使用会产生严重不良反应,尤其是急性和慢性心脏毒性。本研究探索了丹参酮Ⅰ(tanshinoneⅠ,TanⅠ)对DOX诱导的急性心脏毒性的保护作用及其潜在的分子机制。动物福利和实验过程均遵循北京中医药大学实验动物伦理委员会的规定。采用小鼠尾静脉注射DOX(6 mg·kg^(-1),每周2次)和DOX刺激H9C2心肌细胞方法制备在体和离体急性心脏毒性模型。在体实验于尾静脉注射前5天,灌胃给药TanⅠ(10 mg·kg^(-1)),直至实验结束,检测TanⅠ对小鼠心功能、心肌组织形态学、血清学指标的影响。离体实验进一步研究TanⅠ抗氧化应激的具体机制。应用免疫荧光技术检测核因子E2相关因子2(nuclear erythroid factor 2-related factor 2,Nrf2)的表达量和入核情况,并用Western blot方法检测氧化应激相关蛋白蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、Nrf2、血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)、NAD(P)H脱氢酶醌1[NAD(P)H uinone dehydrogenase 1,NQO1]水平的变化,最后进行分子对接验证。结果显示,TanⅠ能明显改善小鼠的心功能,同时降低血清中心肌损伤指标肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB,CK-MB)、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)的表达水平。免疫荧光结果提示TanⅠ能增加H9C2细胞中Nrf2的表达水平并促进Nrf2进入细胞核。Western blot结果也提示,与DOX组相比,DOX+TanⅠ组氧化应激相关蛋白P-Akt、Nrf2、HO-1、NQO1的水平均显著升高。上述结果证明,TanⅠ能减轻DOX诱导的急性心脏毒性,其机制是通过上调Akt-Nrf2通路,抑制氧化应激,从而减轻DOX诱导的急性心肌损伤。

丹七片调控mTOR-ULK1/TFEB自噬通路保护阿霉素诱导心肌损伤的作用机制

目的:探讨丹七片对阿霉素诱导心肌损伤(DIMI)的保护作用及调控机制。方法:18只DIMI小鼠随机分成模型组、丹七片组和普伐他汀组,每组6只,另取6只C57BL/6小鼠作为正常对照组。丹七片组和普伐他汀组分别予1.5g/kg丹七片和40mg/kg普伐他汀混悬液灌胃,模型组和正常对照组予蒸馏水灌胃,连续干预4周。超声和HE检测心功能,电镜和GFP-mRFP-LC3腺病毒转染检测自噬通量,Western blot检测自噬相关蛋白的表达。结果:与模型组比较,丹七片组显著提高DIMI小鼠的射血分数(EF)和左室短轴缩短率(FS)(P<0.01,P<0.05);HE染色显示,丹七片有效改善心肌细胞排列紊乱和心肌纤维溶解的情况;电镜结果提示,丹七片组显著减少自噬溶酶体的累积。体外GFP-mRFP-LC3荧光结果表明,丹七片通过减少自噬溶酶体的累积和促进自噬体的形成恢复阿霉素阻断的自噬流;此外,丹七片组显著上调Beclin1和LAMP1(P<0.05),下调p-mTOR和p-ULK1(P<0.05),促进TFEB入核(P<0.01);联合mTOR激动剂MHY1485后,丹七片的调控作用均消失。结论:丹七片通过mTOR-ULK1/TFEB通路分阶段调控自噬保护DIMI。

基于网络药理学的丹七片治疗冠心病作用机制研究

利用网络药理学方法探究丹七片治疗冠心病的活性成分和作用机制,为临床冠心病的治疗提供理论依据。采用TCMSP数据库筛选出丹七片的活性成分及其靶标;通过GeneCards数据库筛选冠心病的预测靶点;将两者靶点进行映射交集;利用STRING数据库构建蛋白互作网络图并筛选出65个核心靶点;再通过DAVID数据库进行GO(gene ontology)生物过程和KEGG信号通路富集分析,最后利用Cytoscape-3.6.2软件构建活性成分-关键靶点-作用通路网络图。通过建立过氧化氢(H2O2)诱导的心肌细胞H9C2损伤模型,对关键活性成分进行实验验证。网络药理学研究提示,丹七片通过槲皮素、木犀草素和丹参酮IIA等活性成分作用于炎症因子和细胞凋亡相关通路,改善体内促炎或抗炎失衡,保护心肌细胞,从而达到治疗冠心病的目的,证实了丹七片治疗冠心病多成分、多靶点的作用特点,为其进一步的实验研究及临床诊治提供客观依据。