甜瓜circRNA及其蔓枯病抗性靶基因鉴定

[目的]本文旨在通过甜瓜接种蔓枯病菌前、后circRNA的研究及靶基因的筛选验证,探究circRNA在甜瓜抗蔓枯病过程中的作用。[方法]利用感病品种‘白皮脆’和抗病材料PI420145,分别在接种前、后取样,构建circRNA文库,通过RNA-Seq、Real-time PCR验证以及基因结构分析,探索circRNA在抗蔓枯病过程中的作用。[结果]12个circRNA文库中共鉴定出3136个circRNA,过滤后共获得1511个circRNA。聚类分析结果表明,circRNA的种类和表达具有品种差异性,且接种蔓枯病菌会引起circRNA的变化。接种蔓枯病菌前、后,在PI420145和‘白皮脆’中分别筛选到4个和3个差异表达的circRNA,其中1个circRNA在2种材料中都有差异表达;对6个靶标基因的结构域分析及RT-qPCR分析结果表明,MELO3C022310、MELO3C002560和MELO3C010763基因与甜瓜蔓枯病抗性相关。[结论]circRNA参与了甜瓜材料PI420145对蔓枯病入侵的防御反应。

“海蜜”系列甜瓜蔓枯病抗性来源分子标记初步评价

通过对6份“海蜜”系列甜瓜材料进行蔓枯病病菌接种和蔓枯病抗性基因Gsb-1、Gsb-4分子标记检测,初步分析了“海蜜”系列甜瓜的蔓枯病抗性来源。田间鉴定结果显示,“海蜜6号”对蔓枯病表现出明显的抗性,其他“海蜜”品种表现为中抗。6份“海蜜”系列甜瓜均未得到与Gsb-1分子标记相同的190 bp条带;“海蜜2号”“海蜜6号”扩增出了与Gsb-4分子标记相同的120 bp、180 bp两条带,而“海蜜4号”“海蜜5号”“海蜜8号”“海蜜10号”均只扩增出一条带。研究初步确定“海蜜2号”“海蜜6号”的抗病基因与Gsb-4具有等位性。基于此研究,建议“海蜜”系列甜瓜均用携带抗性基因Gsb-1的抗源材料来改良其对蔓枯病的抗性。

远缘杂交结合胚培养法获得厚皮甜瓜阿鲁斯达令双单倍体

旨在系统地研究通过远缘杂交结合胚培养获得甜瓜双单倍体的方法,以拓宽甜瓜双单倍体获得路径。以西印度瓜(Cucumis anguria L.)为远缘花粉供体,对厚皮甜瓜阿鲁斯达令进行授粉,并结合胚培养方法进行研究,以期获得厚皮甜瓜阿鲁斯达令的双单倍体。结果表明,对阿鲁斯达令甜瓜进行远缘授粉后如果不作处理,子房会全部败育,而对子房表面涂抹坐果灵后坐果率可达73.33%;授粉28 d后,共采收22个远缘杂交果实,累计获得359粒种子;胚培养后获得4株再生植株,再生植株占比为1.11%;通过流式细胞仪鉴定得出,再生植株有二倍体、混倍体2种类型。对比二倍体再生植株和母本阿鲁斯达令发现,二倍体再生苗的叶、花较小,植株长势较弱,果实较圆,平均花粉活力较低。对二倍体再生植株R3、母本阿鲁斯达令自交1代(S_(1)代)群体形态学性状进行遗传变异系数比较发现,R3 S_(1)代群体各项指标的遗传变异系数均远低于母本阿鲁斯达令S_(1)代群体。利用筛选出的2对在阿鲁斯达令基因组中具有多态性的简单重复序列(SSR)引物CMATN240、CMCTN71对R3 S_(1)代群体进行基因型分析,结果表明,20株R3 S_(1)代群体均为纯合带型。通过形态学鉴定、SSR分子标记鉴定分析发现,获得的再生植株R3为双单倍体。由研究结果可知,通过远缘杂交结合胚培养获得了甜瓜再生植株,通过细胞流式仪倍性鉴定、SSR标记分析与S_(1)代群体性状遗传变异系数鉴定得出,再生植株为双单倍体。

关于监考教师的态度和表情对考生情绪影响的调查

一、问题的提出 考试是当今检查评定学生学习成绩的重要形式,按着教学计划规定,学校中规模较大的考试有学期中间考试,学期末考试,学年升级考试和升学考试等。

野生种西印度瓜与甜瓜种间杂种的创制

[目的]本文旨在利用外源优良基因改良栽培甜瓜,拓宽其遗传基础。[方法]选用12份普通甜瓜栽培种和1份野生种材料西印度瓜(Cucumis anguria L.)进行正反种间杂交,通过胚拯救获得以西印度瓜为母本,以栽培甜瓜‘新红瑞’为父本的杂交后代F_(1);将F_(1)与甜瓜进行回交获得BC_(1)植株,并从形态学、细胞学和分子水平分析评估此次杂交获得的F_(1)和BC_(1)。[结果]在胚拯救过程中,4粒F_(1)幼胚成功萌发了3粒,通过继代和驯化,最终保存了4株杂交后代植株。F_(1)子代前期生长缓慢、叶片黄化,叶片形状、雄花形状和大小等性状均表现为双亲中间型;F_(1)生长中后期,以上性状趋同于母本,父本的植物学特征消失。果实的果梗长短和茎部绒毛这2个性状仍表现为居间型。SSR分子标记分析发现,F_(1)子代中扩增出双亲互补型的条带。形态学和SSR分子标记鉴定都证明了种间杂种F_(1)的真实性。将杂交后代F_(1)与甜瓜进行回交,获得了2粒饱满的BC_(1)种子,BC_(1)中也检测到了西印度瓜的特征条带,且在田间调查中发现BC_(1)的卷须有苦味,而西印度瓜和‘新红瑞’的卷须均无苦味。[结论]获得了真实种间杂种F_(1),并通过回交将少量外源遗传物质转导到栽培甜瓜中,为利用野生种西印度瓜的优异基因改良栽培甜瓜提供了理论依据和技术参考。