警惕青少年脑卒中

某游戏比赛开赛期间,大一学生小王和同学们相约网吧通宵。在比赛前,他们吃了烧烤并喝了啤酒。随着时间进入深夜,小王开始心脏不适、头晕、逐渐看不清眼前的屏幕,他向身边的同学求救,却发现说不清话,在短暂挣扎后,小王突然抽搐昏迷。幸好网吧人多,小王获得了及时救治。医生解释,小王是出现了急性脑供血不足引起的脑卒中。原来,小王有心脏病史,熬夜、喝酒等行为促使小王突发心脏病,引起了脑供血不足。

卵泡抑素基因过表达对其通路上相关基因表达的影响

为了探讨过表达卵泡抑素(follistatin,FST)基因对其通路上相关基因表达量的影响,本研究采用PCR方法扩增了民猪的FST基因,构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-Dsig-FST,对转染了重组质粒的成纤维细胞进行了鉴定,并采用实时荧光定量PCR检测通路上相关基因表达量的变化。结果表明,本研究成功克隆了民猪的FST基因,并在猪胎儿成纤维细胞中显著过表达,结果导致了ActRⅡB和BMP4基因显著下调(P<0.05),Smad4和Myostatin基因有下调趋势,ActRⅡA基因有上调趋势。由此可见,FST基因的表达变化对其通路上部分相关基因的表达有不同程度的抑制或促进作用。

敲减FST基因对猪成纤维细胞中相关基因表达的影响

旨在获得敲减FST基因的猪胎儿成纤维细胞,并探讨对相关基因表达的影响。将构建成功并鉴定准确的发夹RNA真核表达载体FR1-shRNA利用脂质体转染至猪胎儿成纤维细胞中,并进行G418筛选,获得稳定转染细胞株,并利用Real-time检测了相关基因表达的变化。结果表明,在稳定转染的细胞株中,FST基因的表达受到显著抑制,结果导致了ActivinRⅡA、Myostatin和Bmp4基因的表达出现下调趋势,并且极显著地降低MyoD基因的表达。

脑卒中后抑郁障碍的患病率及相关危险因素分析

目的探讨在门诊就诊的脑卒中后患者抑郁障碍的患病率及其危险因素。方法选择在脑卒中专病门诊连续就诊的资料完整的脑卒中后初次就诊的患者1055例,按有无抑郁障碍分为两组。统计抑郁障碍的患病率,分析影响抑郁障碍发生的因素,单因素分析有意义的因素再进行多因素Logistic回归分析。结果 1055例患者中291例（27.6%）有抑郁障碍。单因素分析显示,抑郁障碍患者中女性、教育程度低、经济条件差、高血压、心脏疾病史、高脂血症、脑卒中史以及有高血压和心脏疾病家族史的构成比显著高于无抑郁障碍者（P值均〈0.05）。多因素Logistic回归分析显示,女性（RR=1.450,95%CI为1.087~1.936,P=0.012）、经济条件差（RR=6.451,95%CI为1.093~1.938,P=0.010）、高血压（RR=1.615,95%CI为1.135~2.298,P=0.008）、高脂血症（RR=2.085,95%CI为1.490~2.918,P〈0.001）、脑卒中史（RR=1.443,95%CI为1.034~2.014,P=0.031）及有心脏疾病家族史（RR=1.844,95%CI为1.228~2.769,P=0.003）是独立相关因素。结论在门诊就诊的脑卒中后患者中抑郁障碍的患病率为27.6%。女性、经济条件差、多种血管性危险因素是脑卒中后抑郁障碍的独立相关因素。

脑卒中后抑郁患者370例的临床分析

目的观察370例患者缺血性脑卒中后1个月内脑卒中后抑郁(PSD)的患病率、相关因素及症状特点。方法采用病例登记连续观察的研究方法,对370例急性脑卒中后1个月内意识清楚、无智力障碍、能正常交流并完成检查的患者进行观察。以中国精神障碍诊断和分类标准第3版(CCMD-3)的抑郁诊断标准诊断PSD,采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD,17项版本)评估抑郁症状的严重程度。将研究对象分为非PSD组(HAMD评分≤6分)和PSD组(HAMD评分>7分),再将PSD组进一步分为轻度抑郁症状亚组(HAMD评分>7分且≤16分)和中-重度抑郁症状亚组(HAMD评分≥17分)。结果缺血性脑卒中后1个月内PSD的患病率为17.0%,PSD组的既往脑卒中史的构成比为31.7%,显著高于非PSD组的19.5%(P<0.05)。轻度抑郁症状患者占88.9%,PSD的临床症状以阻滞、焦虑/躯体化障碍、睡眠障碍多见。轻度抑郁症状亚组中阻滞因子评分最高,而中-重度抑郁症状亚组中焦虑/躯体化因子评分最高。中-重度抑郁症状亚组的焦虑/躯体化、体重变化、阻滞、睡眠障碍因子评分均显著高于轻度抑郁症状亚组(P值均<0.05)。结论 PSD以轻度抑郁症状为主,且躯体化症状及睡眠障碍多见。

失眠症患者抑郁障碍及相关因素的研究

目的评估失眠症患者抑郁障碍的共病率及其相关因素。方法对失眠专病门诊就诊的失眠患者进行前瞻性登记，连续收集专病门诊中符合ICD-10非器质性失眠症诊断标准、并能配合问卷及量表调查的患者，通过自编问卷进行详细的人口学资料及失眠临床特征调查，应用汉密顿抑郁量表（HDRS17）进行抑郁障碍的筛选，同时应用多元Logistic回归分析，研究失眠症患者存在抑郁障碍的相关因素。结果52．8％失眠症患者存在抑郁障碍，14．0％为重度抑郁。总睡眠时间少（OR1．618，95％CI1．239～2．114）、经济状况较差（OR1．755，95％CI1．210～2．544）、生活不规律（OR2．395，95％CI1．321～4．343）、女性（OR1．899，95％CI1．139—3．166）为失眠症患者合并抑郁障碍的独立危险因素。结论失眠症患者有较高的抑郁障碍共病率，对总睡眠时间少、经济状况较差、生活不规律、女性的失眠人群要特别重视与抑郁障碍其病的可能。

血管内支架治疗症状性颈动脉狭窄的疗效评估

目的评估血管内支架（CAS）治疗症状性颈动脉狭窄的临床价值和安全性。方法回顾性分析125例行CAS治疗的症状性颈动脉狭窄患者的临床资料。结果125例颈动脉狭窄均成功进行了CAS,颈动脉支架植入成功率为100%,其中100例（80%）采用脑保护装置;多发性狭窄40例（32%）,伴发颅内动脉瘤3例（2.4%）;术后30天内死亡2例（1.6%）,短暂性脑缺血发作（TIA）及小中风6例（4.8%）;100例随访6～52个月（平均22个月）,无TIA及中风发生;DSA发现3例（3.0%）再狭窄。结论颈内动脉狭窄的CAS治疗是安全的,操作规范能减少并发症,中远期随访效果较为满意。

卒中专病门诊随访对卒中患者高血压治疗率和达标率的影响

目的通过卒中专病门诊登记随访,提高对卒中患者高血压的管理。方法选择资料完整的、连续的在卒中专病门诊登记的伴高血压的卒中患者833例,按能否坚持在专病门诊随访分为两组,比较两组患者高血压的治疗率和达标率。结果833例患者中,随访后高血压的治疗率和达标率分别从随访前的40.5%和18.2%提高到92.1%和57.4%(P<0.01)。其中门诊随访患者的治疗率和达标率分别从41.0%和20.7%提高到98.4%和65.9%,电话随访患者的治疗率和达标率分别从39.0%和11.5%提高到74.3%和33.5%(P<0.001)。随访后患者联合使用降压药的比例从21.7%提高到28.8%(P=0.013),患者清淡饮食(48.3%到74.7%)、保持每日活动(17.3%到58.8%)、每周测血压(24.7%到46.7%)比例显著增加(P均<0.01),戒烟率(76.5%到94.4%,P<0.01)和戒酒率(77.1%到88.8%,P=0.002)亦显著增加。结论卒中专病门诊可以提高卒中患者高血压的治疗率和达标率,提高生活方式的改变。坚持专病门诊随访者较未能坚持者的高血压的治疗率和达标率更好。

四环素诱导的猪黑素皮质激素受体-4基因真核表达载体的构建

猪黑素皮质激素受体-4(melanocortin-4receptor,MC4R)基因是影响猪生长肥育的主效基因之一,为了进一步研究MC4R基因的生物学功能,制备高成活率转基因猪,通过采用条件性诱导表达载体系统,PCR方法扩增了猪MC4R基因完整编码区,四环素诱导表达系统(Tet-on)的启动子调控区与转录调节元件。采用双酶切和连接等方法将上述元件连接到pcD-NA3.1(+)上,构建了重组质粒pcDNA3.1(+)-rtTA-PTight-MC4R。经双酶切和测序鉴定,结果显示片段正向连接且片段全长测序正确。试验成功构建了四环素诱导的pcDNA3.1(+)-rtTA-PTight-MC4R真核表达载体,并能在时间特异性方面调控MC4R基因的表达。

中西医结合治疗后循环缺血性眩晕的效果观察

目的观察养血清脑颗粒联合西药治疗后循环缺血性眩晕对比单独西药治疗效果。方法选取2011年3月至2013年3月期间在本院门诊和住院的后循环缺血性眩晕患者90例,随机分为对照组45例和治疗组45例。治疗组服用养血清脑颗粒联合西药,对照组服用西药,观察2组在治疗前及治疗后2周分别做TCD检查。结果治疗组痊愈23例,显效17例,有效10例,无效1例,总有效率为97.7%;对照组痊愈14,显效11例,有效10例,无效9例,总有效率为79.5%;两组比较差异有统计学意义(P<0.05),且无明显副反应。结论养血清脑颗粒联合西药治疗后循环缺血所致眩晕具有起效快、疗效显著、无明显不良反应等特点。

猪卵泡抑素基因特异表达载体的构建及鉴定

采用RT-PCR方法扩增猪的FST基因完整编码区,采用双酶切和连接方法构建可在肌肉细胞中特异表达的真核载体,并转染C2C12细胞系进行验证。结果表明,猪FST基因全长1 032 bp,与网上已提交序列相似度为99.13%,成功构建可在肌肉细胞中特异表达的真核载体pEGFP-C1-α-actin-FST,转染C2C12细胞后,通过实时定量PCR检测,表明FST基因过表达可抑制MSTN基因表达。

民猪LPL基因真核表达载体的构建

为了进一步分析脂蛋白脂酶(Lipoprotein lipase,LPL)基因的生物学功能。采用克隆测序的方法获得了民猪LPL基因的完整CDS序列,将其克隆到pMD-18T载体上,将测序验证正确的基因序列插入到pcDNA3.1(+)质粒载体中,构建了pcDNA-LPL真核表达载体。结果表明,所得序列与GenBank中登录的猪LPL基因同源性为99.30%,说明LPL基因的真核载体构建成功。该研究为在细胞水平上研究LPL的表达和功能奠定了试验基础,为进一步分析LPL基因功能提供了理论依据。

MALDI-TOF-MS高灵敏度分析EGFR基因多位点突变方法的建立与应用

目的以基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)为分析平台,建立表皮生长因子受体(EGFR)基因多位点突变的高灵敏度同步检测方法,用于辅助临床伴随诊断。方法使用MALDI-TOF-MS推荐的网站设计引物和单碱基延伸引物(UEP),设计添加针对野生型基因组的blocker,以减少野生型模板对突变位点检测的干扰。用数字PCR定量标准品,使用定量后的标准品验证检测体系的灵敏度。收集228例非小细胞肺癌(NSCLC)患者的血液标本,比较MALDI-TOF-MS平台与微滴式数字PCR(ddPCR)平台检测结果的特异度、灵敏度。结果MALDI-TOF-MS检测E746_A750del位点、T790M位点突变灵敏度达0.1%,最小突变检出拷贝数达2.8;L858R位点突变灵敏度达0.5%,最小突变检出拷贝数达12。与ddPCR检测相比,MALDI-TOF-MS检测E746_A750del、L858R和T790M位点的灵敏度、特异度、Kappa值分别为94.4%(34/36)、99.5%(191/192)、0.95,94.6%(35/37)、100.0%(191/191)、0.97,83.3%(15/18)、99.5%(209/210)、0.87。结论MALDI-TOF-MS建立的检测方法具有很高的灵敏度,与ddPCR检测具有非常高的一致性,有广阔的临床应用前景。

猪成纤维细胞敲减卵泡抑素基因后的生物信息学分析

在哺乳动物中,卵泡抑素(follistatin,FST)不仅参与生殖调控,还与肌肉生长、脂肪沉积等显著相关。为了探究该基因在成纤维细胞中的生物学功能,本研究利用二代测序技术对敲减FST基因的猪成纤维细胞进行转录组测序,筛选差异表达基因,并利用在线生物学软件对差异基因进行GO功能注释及生物学通路富集分析。结果发现,敲减FST基因后共有370个基因显著上调,287个基因显著下调。与细胞增殖、凋亡相关的HOXA6、PARP14、ZBP1、NDUFB9、RAB13、FAM83D、THBS1和BTF3基因以及与疾病相关的ZNF354C、RNF213、IFIT1、CCL5和VPS13C基因均发生了显著变化。这些差异基因共得到51个GO功能注释,生物过程分类下的生物调节、细胞过程、代谢过程、单一生物过程和细胞组分分类下的细胞器、细胞区域、细胞及分子功能分类下的黏合条目下聚集的差异基因数量最多,均>200个。共发现12条显著富集的通路,包括3条与细胞增殖相关的通路(p53信号通路、细胞周期和真核生物中核糖体的生物发生),4条与疾病相关的通路(阿尔茨海默氏病、沙门氏菌感染、亨廷顿病和非小细胞肺癌),2条与肌肉收缩相关的通路(血管平滑肌收缩和心肌收缩)以及泛素介导的蛋白水解作用、肌动蛋白细胞骨架的调节和缝隙连接通路。以上研究结果表明,在成纤维细胞中敲减FST基因后,与细胞增殖分化和部分疾病相关的基因和生物学通路被显著富集,暗示FST基因在成纤维细胞的创伤修复过程中发挥重要的作用。

机械通气患者质谱激光病原学检测气管导管末端病原菌的特征分析

目的基质辅助激光解析电离飞行时间质谱检测,探讨机械通气患者气管导管末端病原菌的临床特征及相关影响因素。方法选取2019-2020年上海健康医学院附属嘉定区中心医院急诊ICU收治的机械通气患者共105例为研究对象,记录所有患者入院时的一般人口学资料(性别、年龄)及合并症(高血压病、糖尿病等),计算并记录急性生理学及慢性健康状况评分系统(APACHEⅡ评分),记录导管留置原因及留置时间,随访患者并记录住院天数及预后,统计分析气管导管末端病原菌的临床特征。结果机械通气患者ICU总体病死率为36.2%。纳入患者气管导管末端检出病原菌105株,其中革兰阳性菌11株,占10.5%;革兰阴性菌86株,占81.9%;真菌8株,占7.6%。病原菌以鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌及金黄色葡萄球菌为主。相较于2019年,2020年肺炎克雷伯菌的检出率增加(P<0.001)。鲍曼不动杆菌的检出率在<65岁组和≥65岁组之间,以及导管留置时间≤6 d组和导管留置时间>6 d组之间差异均有统计学意义(P<0.05)。ICU总体病死率随着病原菌菌种的增多而增加(P<0.05)。检出耐药菌50例,均为革兰阴性菌,占所有病原菌株的47.6%(50/105)。耐药菌的发生与导管留置时间呈正相关(r=0.246,P=0.011)。结论机械通气患者气管导管末端病原菌以革兰阴性杆菌占比最高,其中以鲍曼不动杆菌及肺炎克雷伯菌为主;鲍曼不动杆菌的检出率与患者年龄、导管留置时间存在关联,肺炎克雷伯菌检出率有上升趋势;存在复合病原菌的患者,ICU病死率显著增加;耐药菌的发生与导管留置时间密切相关。

乳腺癌组织样本中HER2基因拷贝数的检测分析

目的·利用微滴式数字PCR系统(droplet digital PCR system,ddPCR)建立乳腺癌组织福尔马林固定石蜡包埋(formalin-fixed paraffin embedded,FFPE)样本和血浆样本中HER2基因拷贝数检测体系,并对检测体系进行性能评估,为临床辅助诊疗提供科学依据。方法·收集2020年1月—2021年6月就诊于上海健康医学院附属嘉定区中心医院普外科乳腺癌患者组织样本12例及其中4例配对血浆样本用于检测体系评价,同期收集健康志愿者血浆样本24例及就诊的乳腺癌组织切片样本77例,提取核酸,用于建立检测体系空白检测限及性能评价。设计及筛选检测体系,使用ddPCR检测体系的空白检测限、精密度、灵敏度及线性范围,使用高通量测序(next generation sequencing,NGS)验证ddPCR检测一致性,并与荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,IHC)/免疫组化(immunohistochemistry,FISH)金标准方法比对检测体系准确性。定量资料比较采用χ^(2)检验和配对样本t检验进行分析,使用Poisson概率函数分析体系空白检测限,变异系数(coefficient of variation,CV)评价灵敏度及精密度,线性回归相关系数(R^(2))评价线性范围。结果·使用ddPCR平台建立了乳腺癌患者组织切片DNA中HER^(2)基因拷贝数定量和扩增检测体系,配对样本t检验评价:与NGS方法检测组织核酸和血浆游离核酸样本结果相比,检测拷贝数结果相关系数0.987,扩增判读一致性100%。评估检测体系的批内精密度为6.8%、批间精密度为9.4%,灵敏度为1 ng,线性良好(R^(2)>0.98)。与传统的IHC/FISH方法相比,检测体系的灵敏度和特异度分别为84.6%(95%CI 64.3%~95.0%)和76.5%(95%CI 62.2%~86.8%),Kappa为0.57,一致率为79.2%。结论·使用ddPCR建立乳腺癌患者HER^(2)拷贝数检测体系,临床检测一致性良好,可能为乳腺癌患者的诊疗和预后判断的研究提供辅助手段。

渐进式排气康复操对腹腔镜胆囊切除术病人术后消化功能、肋肩疼痛改善及活动能力的影响

目的:探讨在腹腔镜胆囊切除术(LC)病人术后康复治疗中应用渐进式排气康复操对病人病情的影响。方法:选取105例腹腔镜胆囊切除术术后病人作为研究对象,使用随机数字表法将病人分为对照组52例、观察组53例。对照组给予按摩+药物+常规体位活动干预,观察组在对照组基础上增加渐进式排气康复操。比较两组病人术后消化功能、肋肩疼痛、活动能力。结果:干预后观察组术后肠鸣音的出现时间、首次排便时间以及首次排气时间、首次进食流质饮食时间均短于对照组(P<0.05);观察组病人术后1 d、5 d疼痛视觉模拟(VAS)评分低于对照组(P<0.05);观察组病人术后首次下床行走时间短于对照组,术后1 d、5 d日常活动能力(ADL)评分均高于对照组(P<0.05)。结论:渐进式排气康复操能够改善腹腔镜胆囊切除术病人术后消化功能,缓解肋肩疼痛,提高病人的活动能力。

缺血后处理抑制神经元凋亡减轻大鼠脑缺血再灌注损伤

目的研究缺血后处理(Ipost C)对脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及机制。方法通过手术前后局部脑血流多普勒检测,神经行为学测试和脑梗死面积评估等方法建立SD大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,在大脑中动脉闭塞100 min后立即予Ipost C干预。使用改良神经损害严重程度评分和转棒实验评估大鼠神经功能损伤程度,TTC染色测量脑梗死面积。Western blot分析凋亡相关蛋白表达(Bax、细胞色素C),透射电镜观察线粒体损伤和TUNEL评估缺血周边皮质的凋亡。结果相对于脑缺血再灌注,Ipost C能显著减少脑梗死面积,降低神经功能受损,改善脑缺血再灌注后的局部脑血流量。同时,Ipost C能减少线粒体的Bax转位及细胞色素C的释放,减轻线粒体损伤及缺血侧大脑皮质神经元的凋亡。结论 Ipost C抑制神经元凋亡,减轻脑缺血再灌注损伤,有可能成为急性缺血性脑卒中临床治疗中的新靶点。

卒中和短暂性缺血发作患者的卒中预防指南:美国心脏协会/美国卒中协会指南

此更新指南的目的是为缺血性卒中和短暂性缺血发作幸存者的卒中预防提供全面、及时和循证的建议。该指南适合所有参与卒中二级预防的临床医师。循证的推荐包括危险因素控制、血管闭塞的干预、心源性栓塞的抗栓治疗及非心源性栓塞性卒中的抗血小板治疗。推荐还针对特定情况的卒中复发预防,包括主动脉弓粥样硬化、动脉夹层、卵圆孔未闭、高同型半胱氨酸血症、高凝状态、抗磷脂抗体综合征、镰状细胞病、脑静脉窦血栓形成和妊娠等。有专门的章节介绍脑出血后的抗栓和抗凝治疗以及对指南的应用。

颈动脉狭窄的血管内治疗

颈动脉内膜切除术(CEA)是公认的预防有症状或无症状重度颈动脉狭窄患者卒中的标准治疗方法。近年来,包括球囊扩张术和支架成形术在内的颈动脉血管内治疗在临床上得到广泛应用,无论是单中心研究还是世界范围的多中心研究均显示出良好的治疗效果,尤其是在CEA高危患者中,栓子保护装置下的颈动脉支架成形术效果更佳。越来越多的证据表明,血管内治疗可能成为CEA之后治疗颈动脉粥样硬化性狭窄的又一重要方法。